引物设计应该是科研汪都需要掌握的⼀项基本技能吧，我们在之前讲过如何现成拿验证过的PCR引物，也有涉及到如何做进⼀步的引物修饰，那么如何对MicroRNA进⾏引物设计呢，作为20世纪最⽕的科研对象之⼀，本引物设计你不能不回啊。 MicroRNA⼀般由20多个碱基组成，引物位置基本固定。下⾯给⼤家介绍简单的加尾法，只需设计正向引物，反向引物试剂盒⾃带。 水产学报另外还有茎环法，⽅法复杂，暂时不做介绍。
ATGCGTAGCTTCGTACGTAGCTGT
（原始序列为：AUGCGUAGCUUCGUACGUAGCUGU）
第⼆步打开链接轻兵器俱乐部
将以上转化后的序列按下列⽅式输⼊，点击Submit
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出现以下页⾯，⾸先检验Tm值，62.2度，温度稍微⾼了些。GC含量正常。
第三步修改
既然Tm值偏⾼，我们可以减少⼏个碱基，减少最后4个碱基（碱基只能去掉头或者尾，⾄于去掉⼏个，⼀般在保留19个以上碱基的情况下来确定，在此基础上保证GC含量和Tm值尽量满⾜要求。
以下，去掉4个尾部碱基，其他条件基本符合。
注意：⾸先得保证长度，不能太短。
作者琳琳猫----
⼀个会烹饪会写古⽂的耿直⼥⼦，浙江⼤学⾷品⼯程学硕⼠，曾就职于华⼤基因7年。有丰富的snp，甲基化，rna检测等⽅法学研究经验。彩视错觉
德隆系试剂测评专栏
女人十日谈⼀定是进⼝试剂好么？国内同类产品哪个好？哪个性价⽐好？在这个鱼龙混杂的⾏业，⼀不留神就被坑。我们是科学严谨的，光靠公司吹嘘我不⼲，在这个栏⽬，我们要拿实验数据来说话，猫在这个⾏业13年，乐于分享，勇于承
担，Freescience将和猫⼀起，做⼀些事情，倒逼这个⾏业的质量能够越来越好。
科研路，不孤单！^ ^
