(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910371371.3
(22)申请日 2019.05.06
(71)申请人 中生北控生物科技股份有限公司
管串
地址 102200 北京市昌平区科技园区超前
路27号
(72)发明人 张勇
(74)专利代理机构 北京路浩知识产权代理有限
公司 11002
代理人 王文君 黄爽
(51)Int.Cl.
G01N 33/68(2006.01)
(54)发明名称
PCT和IL-6联合检测试剂盒及其制备方法
(57)摘要
本发明提供一种PCT和IL -6联合检测试剂盒
及其制备方法。所述试剂盒包含PCT和IL -6联合
检测试纸条，所述试纸条包括样品垫、结合垫、分
析膜、吸收垫和底板，所述分析膜上设有2条检测
线(PCT、IL -6检测线)和1条质控线，样品垫、结合
垫、分析膜和吸收垫依次搭接地粘贴在底板上且
分别部分重合；所述结合垫包被有PCT和IL -6抗
备的试剂盒，可以同时检测PCT和IL -6，提高了临宫灯制作
床检测效率，具有高灵敏度、高特异性及快速检
测的优点，为感染性疾病、组织损伤坏死性疾病
等疾病的辅助诊断提供有效手段。权利要求书3页 说明书9页 附图1页CN 110133283 A 2019.08.16
C N 110133283
后轮驱动A
权 利 要 求 书1/3页CN 110133283 A
1.PCT和IL-6联合检测试纸条，其特征在于，包括样品垫、结合垫、分析膜、吸收垫和底板，所述分析膜上设有2条检测线和1条质控线，所述样品垫、结合垫、分析膜和吸收垫依次搭接地粘贴在底板上且分别部分重合；
其中，2条检测线靠近结合垫一端，质控线靠近吸水垫一端；
2条检测线分别为PCT检测线、IL-6检测线；所述PCT检测线包被有PCT检测抗体，所述IL-6检测线包被有IL-6检测抗体； 锯齿线面部提升术所述结合垫包被有PCT抗体标记荧光微球和IL-6抗体标记荧光微球；
所述检测线包被的抗体与所述结合垫包被的抗体分别具有不同的抗原结合位点。
摄像机三脚架
2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述样品垫为玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜；和/或
所述结合垫为玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜；和/或
所述分析膜为硝酸纤维素膜；和/或
所述底板的材质为PVC。
3.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所用荧光微球是含有荧光物质的聚苯乙烯微球，所述荧光物质选自异硫氰酸荧光素、罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、TO、Cy3、Cy5、藻红蛋白、量子点中的至少一种；
所述荧光微球的粒径为20nm～600nm，发射波长为500nm～700nm，荧光微球的使用浓度为0.00001mg/ml～0.1mg/ml；所述荧光微球的表面修饰有官能团，所述官能团选自羧基、氨基或醛基中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述PCT检测抗体为杭州启泰生物技术有限公司生产的抗体MJG03，所述IL-6检测抗体为Medix Biochemica公司生产的抗体2703；
所述PCT抗体标记荧光微球中使用的PCT抗体为杭州启泰生物技术有限公司生产的抗体MJG05，所述IL-6抗体标记荧光微球中使用的IL-6抗体为Medix Biochemica公司生产的抗体2704；
所述质控线包被有二抗，所述二抗选自羊抗鼠、羊抗兔、兔抗羊抗体中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述PCT抗体标记荧光微球是通过EDC和NHS使PCT抗体与荧光微球上的官能团连接；和/或
10种打隐私的方法所述IL-6抗体标记荧光微球是通过EDC和NHS使IL-6抗体与荧光微球上的官能团连接。
6.根据权利要求1-5任一项所述的试纸条，其特征在于，所述试纸条的长度为5～10cm，宽度为3～5mm。
7.PCT和IL-6联合检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1-6任一项所述的试纸条，任选包含用于装载所述试纸条的卡壳。
8.PCT和IL-6联合检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)微球活化：向1mg/ml荧光微球1～5ml中加入用50mM，pH6.1 MES溶解的0.1～10mg EDC和10mg NHS，活化10～60min，7000～15000rpm离心30min，弃上清，沉淀用pH7.0～8.0的50mM PBS重悬，得到1mg/ml活化的荧光微球溶液；
其中，所述荧光微球采用权利要求3中所述的荧光微球；
(2)PCT抗体的偶联：将0.5mg PCT标记抗体加入1mg/ml活化的荧光微球溶液2ml中，室温混匀2～4h，10000rpm离心30min，弃上清，沉淀用含5mg BSA的50mM PBS溶液封闭60min，
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