inu-006
中图分类号:R563.1文献标识码：A文章编号：1002-3127(2020)06-0454-07•论著•
LncRNA PVT1靶向miR・130a・3p对肺炎链球菌感染的 明是非-康秉南2，程建敏'
(1.重庆市医科学校护理教研组，重庆401420； 2.石家庄医学高等专科学校基础医学部微免教研室，
河北石家庄050599； 3.宿迁市第一人民医院肾内科，江苏宿迁223800)
【摘要】目的探究LncRNA PVT1靶向miR-130a-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法本研究首先探究PVT1在肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织和正常肺组织中的表达情况；然后构建PVT1敲减载体，转染肺泡上皮细胞A549，采用比MTT测定法检测细胞的增殖，流式细胞术检测细胞的凋亡,ELISA检测细胞因子IL-6和TGF-3的表达，qRT-PCR检测肺组织中PVT1的表达，以及A549细胞中PVT1和miR-130a-3p的表达，使用双荧光素酶实验和qRT-PCR试验测定PVT1和miR-130a-3p的靶向调控关系。结果与正常肺组织相比，肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织中PVT1表达上调(PV0.05)；肺炎链球菌感染可增加肺泡上皮细胞PVT1的表达(PvO.05)，敲减PVT1后，可增加肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞A549的增殖(PvO.05)，减少A549的凋亡和炎性因子IL-6和TCF-p的表达(P<0.05)o进一步双荧光素酶实 验证实PVT1可靶向负调控miR-130a・3p表达(PvO.05)o Anti-miR-130a-3p共转染A549细胞后，与SP+ si-PVTl+anti-miR-con组相比,SP+si-PVTl+anti-miR-130a-3p组miR-130a-3p的表达明显降低(P<0.05)，细胞增殖明显降低(P<0.05)，凋亡增加(PV0.05)，炎症因子TGF-p和IL・6表达明显升高(P<0.05)o结论LncRNA PVT1可靶向负调控miR-130a-3p，并减轻肺炎链球菌感染的肺泡上皮的损伤。
【关键词】LncRNA PVT1；miR-130a-3p；肺泡上皮细胞；肺炎链球菌；炎症
Effects of LncRNA PVT1targeting miR-130a-3p on the damage of alveolar epithelial cells infected by Streptococcus pneumoniae
MING Shi-fei',KANG Bing-nan2,CHENG Jian-min3
(1.Nursing Teaching and Research Group of Chongqing Medical School,Chongqing401420,China；
2.Department of Basicmedicine,Shijiazhuang Medical College,Shijiazhuang Hebei050599,China；
3.Department of Nephrology,Suqian First Hospital,Suqian Jiangsu223800,China)
[Abstract]Objective To investigate the effect of LncRNA PVT1targeting miR-130a-3p on the damage
of alveolar epithelial cells infected by Streptococcus pneumoniae.Methods Firstly,to investigate the expression of PVT1in normal lung tissue and the lung tissue of Streptococcus pneumoniae necrotizing pneumonia in vivo experiments；Then the si-PVTl expression vector was constructed,the alveolar epithelial cells A549were transfected by liposome.MTT assay was used to tested cell proliferation,flow cytometry was applied to detect cell apoptosis,ELISA was used to detect the expressions of cytokines IL-6and TGF-R,qRT-PCR was applied to detect the expression of PVT1in lung tissue,and the expression of PVT1and miR-130a-3p in A549,double luciferase assays was used to detect the targeting relationship between LncRNA PVT1and miR-130a-3p.Results The expression of PVT1in lung tissue of Streptococcus pneumoniae necrotic pneumonia was significantly increased compared with normal lung tissue(P<0.05).In vitro experiments showed that Streptococcus pneumoniae infection could increase the expression of PVT1in alveolar epithelial cells(P<0.05).SP+Si-PVT1group could increase the proliferation (P<0.05),and reduce the apoptosis and the expression of IL-6and TGF-0(P<0.05)of alveolar epithelial cells A549induced by Streptococcus pneumoniae,compared with SP+Si-PVTl control group.Double luciferase assays confirmed that PVT1could target miR-130a-3p and negatively regulated the expression of miR-130a-3p(P<0.05).Compared with SP+si-PVTl+anti-miR-con group,the expression of miR-130a-3p was significantly reduced(PvO.05),and the proliferation was significantly reduced(P<0.05),apoptosis was
increased (P<0.05),the expressions of TGF-P and IL-6were significantly increased(P<0.05)in SP+si-PVTl+anti-miR-130a-3p group.
作者简介：明是非，讲师，研究方向：临床医学。
通讯作者：康秉南，硕士，副教授，研究方向：病原微生物。
Conclusion LncRNA PVT1can target miR-130a-3p to reduce the damage of alveolar epithelium infected by Streptococcus pneumoniae.
[Key words]LncRNA PVT1；MiR-130a-3p；Alveolar epithelial cells；Streptococcus pneumoniae；Inflammation
肺炎是一种高度流行的疾病，每年有近100万儿童死于肺炎⑴。肺炎链球菌是导致肺炎的最常见病原菌，感染后可导致肺泡上皮细胞损伤。肺泡上皮细胞是机体抵抗肺部感染的第一道防线，在肺部炎症反应的启动和消退中起重要作用⑵。减少肺泡上皮细胞炎症因子的分泌和降低肺泡上皮细胞的凋亡是减轻肺部损伤的重要方法。
长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，但可与DNA、RNA或蛋白质相互作用，参与基因表达调控，进而影响多种疾病的发生与发
展⑶。近年来研究发现，LncRNA在细胞增殖、凋亡以及癌症进展中起关键作用⑶。LncRNA PVT1位于染体8q24，具有致炎和致癌的作用“句。研究表明，PVT1在脂多糖致THP-1源巨噬细胞炎症反应中高表达，且与炎症因子TNF-a及IL-lp mRNA表达呈正相关⑴。PVT1还可促进肺癌细胞的增殖和迁移，促进癌症的复发⑷。提示PVT1可能在肺炎链球菌感染诱导的肺泡上皮细胞损伤中起作用。
MicroRNA-130a(miR-130a)位于染体1lql2，靠近llql3区域，具有抗炎的作用⑹。研究发现，在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中，肺组织中miR-130a-3p表达明显降低⑺。MiR-130a-3p 可减轻内皮细胞损伤和炎症反应，促进内皮细胞的增殖，迁移和血管的形成W肺泡上皮细胞损伤是否与miR-130a-3p表达降低有关，目前并不清楚。本研究主要探讨肺炎链球菌感染后肺泡上皮细胞PVT1和miR-130a-3P的表达情况，进而探究PVT1是否通过调控miR-130a-3p的表达进而影响对肺炎链球菌感染引起的肺泡上皮细胞损伤。
1材料与方法
1.1动物100只SPF级C57BL/6雄性小鼠，生产许可证号：SCXK(京)2016-0006；质量合格证号：1100111911076971，购于北京维通利华实验动物技术有限公司,8-10周龄，体重23-25g，小鼠饲养在屏障级动物房。光照和黑暗各12h o小鼠可自由进食进水，所有的程序均按照1996年修订的美国国立卫生研究院(NIH)的《实验动物的饲养和使用指南》(第80~ 23号出版物)进行。实验通过重庆市医科学校校动物伦理委员会审批。
1.2肺炎链球菌坏死性肺炎模型的建立和分组肺炎链球菌菌株购自美国ATCC公司，小鼠随机分为对照组和肺炎链球菌肺炎组(SPNP组)。SPNP组小鼠麻醉后经鼻腔滴注无菌磷酸盐缓冲液(PBS)溶解的肺炎链球菌(5x10°cfu/50口)，对照组小鼠麻醉后经鼻腔滴注等体积无菌PBS。感染3d后取肺组织检测。
1.3细胞培养及分组将肺泡上皮细胞A549培养于含有10%胎牛血清，100U/ml青霉素和100Mg/ml 链霉素的RPMI-1640中，置于37咒含有5%CO2的细胞培养箱中。将A549细胞分为6组：对照组；肺炎链球菌感染组(SP)：108CFU/ml肺炎链球菌感染A549细胞;si-PVTl阴性对照组(SP+si-con)】肺炎链球菌感染前48h,si-PVTl转染细胞；PVT1敲减组(SP+si-PVT1)：肺炎链球菌感染前48h，敲减载体si-PVTl转染细胞;anti-miR-130a-3p阴性对照组(SP+si-PVTl+ anti-miR-con)：肺炎链球菌感染前48h，敲减载体si-PVT1转染细胞，并给予50(xl无血清培养基；anti-miR-130a-3p干预组(SP+si-PVTl+anti-miR-130a-3p)：肺炎链球菌感染前48h，敲减载体si-PVTl与anti-miR-130a-3p共转染细胞，24和48h收集细胞后检测。双卡通
1.4材料肺泡上皮细胞A549购自上海生工生物公司,RPMI-1640培养基、胎牛血清、96孔板和24孔细胞培养皿,0.25%胰蛋白酶购自美国Gibco公司；RIPA细胞裂解液、青链霉素混合液购自上海碧云天生物技术有限公司；肿瘤坏死因子a(Tumor Necrosis Factor-a,TNF-a)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒均购自美国R&D公司，MTT试剂盒购自美国Sigma-Aldrich公司，鼠anti-Bax抗体、兔anti-Bcl-2抗体和鼠P-actin购自美国Abeam公司,
HRP标记山羊抗鼠lgG(H+L)和HRP标记山羊抗兔lgG(H+L)购自美国Cell Signaling Technology公司, Trizol试剂和Lipofectamine1'12000购自美国Invitrogen 公司。PVTl、miR-130a-3p和GAPDH引物序列设计、引物合成由上海赛默飞世尔科技有限公司完成。特异性靶向PVT1的敲减载体及阴性对照以及锁核酸修饰的anti-miR-130a-3p和阴性对照序列由美国Invitrogen 公司设计、合成。
1.5MTT检测细胞活力采用比MTT测定法评估
细胞活力，将对数期A549细胞（2xl04个细胞/孔）接种在96孔板中，设置不同分组，将MTT溶液（100“1, 1mg/ml）添加到96孔板的每个孔中，并在37T下孵育4h至有紫蓝结晶析出，离心弃上清。加入100口二甲基亚砚震荡。使用酶标仪在540nm处测定每个孔的内容物的吸光度（4）值。
abs-2101.6qRT-PCR检测PVT1和miR-130a-3p表达情况
取各组小鼠肺组织和A549细胞,Trizol试剂提取细胞中RNA，用紫外分光分析和凝胶电泳检测所提取总RNA的质量和浓度。在逆转录酶（MLV）催化下合成cDNA，并进行PCR扩增。根据LncRNA PVT1和miR-130a-3p的c-DNA序列，按照引物设计原则，用Primer 5.0引物设计软件设计引物。PVT1的上游引物序列：5，-TGAGAACTGTCCTTA CGTGACC-3,，下游弓I物序列: 5,-AGAGCACCAAGACTGGCTCT-3,；miR-130a-3p的上游弓I物序列：5,-CAGTGCAATGTTAAAAGGGCAT-3,，下游弓I物序列：5，-TAGAGTGAGTGTAGCGAGCA-3，；内
参GAPDH上游引物:5，-ACAGTCAGCCGC ATCTTCTT-3，，下游弓I物：5，-GACAAGCTTCCCTT-CT CAG-3，,PCR 反应体系25p.1,10x buffer10»1，探针probe1.5pJ, dNTP0.5（xl,H,07.5p.l,Taq0.5pJ，进行PCR反应，导出实验结果，在相应的统计学软件中分析相关实验数据。
1.7流式细胞术检测A549凋亡收集各组细胞，PBS重悬细胞终浓度至少为1.0X106个/ml，离心后加入PBS缓冲液重悬细胞，加入5|xl Annexin V-FITC标记，室温避光孵育15min，上机前加入5山碘化丙咙（PI）,1h内检测。
1.8Western blot收集各组细胞，加入适量RIPA裂解液，冰上研磨裂解后提取总蛋白，使用BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度，加入上样缓冲液，沸水煮5min使蛋白变性，取30Mg蛋白电泳分离蛋白，而后将蛋白转移至PVDF膜上，5%脱脂奶粉室温封闭1h，加入Bax（1：500）、Bcl-2（1：1000）及P-actin（1：1000）一抗,4%：过夜。TBST洗膜3次，37咒二抗（1：4000）孵育1.5h,TBST洗膜3次，使用UVP凝胶成像系统，ECL化学发光显，采用Image J图像分析系统软件分析条带光密度值。
1.9双荧光素酶实验测定将24孔板中的LncRNA PVT1和miR-130a-3p与0.4mg萤火虫荧光素酶报告载体pGL3-Basic和0.1mg含有海肾萤光素酶的pRL-TK 对照载体共转染，根据siPORTneoFX使用方法操作，转染48h后制备裂解物。使用双荧光素酶报告基因测定系统（Promega），转染24h后检测荧光素
酶活性。1.10细胞水平PVT1干扰si-PVTl和si-con由Invitrogen公司设计合成。将细胞种于6孔板中，细胞融合度达70%-80%用于转染。取10pl脂质体稀释于250|xl的0PTI-MEMI中混匀。室温孵育5min。取100pmol si-PVTl和si-con分别稀释于250|xl OPTI-MEMI中混匀。将孵育好的脂质体与si-PVTl和si-con稀释液混匀，室温孵育20min。将上述混合物混合均匀滴入事先加好1.5ml OPTI-MEMI的6孔培养板中，轻轻混匀，37V,5%CO，培养箱中培养。
1.11ELISA检测TNF-a和IL-6按照TNF-a和IL-6的双抗夹心法ELISA检测试剂盒的操作步骤，分别检测各组细胞裂解液中TNF-a和IL-6的A值，各组标本每一个指标设3个复孔，取平均A值、根据标准线计算出各组因子浓度。
1.12统计学方法应用SPSS21.0统计学软件分析数据，计量资料均符合正态分布，两组间比较采用/检验，数据均以均数士标准差G±s）表示，P<0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1PVT1在肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织和正常肺组织中的表达情况qRT-PCR检测结果显示，与正常肺组织相比，肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织中PVT1表达量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），如表1所示。
表1qRT-PCR检测PVT1在肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织
氨基酸配方粉和正常肺组织中的表达情况（壬土s）
分组PVT1表达量
对照组 1.00±0.34
SPNP组 2.05±0.67*
t9.882
P<0.05
注：与对照组比较,*P<0.05；n=50。
2.2PVT1对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞A549增殖及炎性因子表达的影响如表2所示，与对照组A549相比，肺炎链球菌诱导的A549细胞PVT1表达明显升高，细胞活力明显降低，炎症因子TGF-p和IL-6表达明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。敲减PVT1后，与SP+si-con组相比,SP+si-PVTl组PVT1表达明显降低，细胞活力明显升高，炎症因子TGF-p和IL-6表达明显降低，差异有统计学意义（P<0.05），而SP组与SP+si-con组各指标差异无统计学意义（P>0.05），表明PVT1表达下调可促进肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞A549增殖及抑制炎性因
子表达G
表2敲减PVT1对肺炎链球菌诱导的A549细胞增殖
及炎性因子表达的影响（攵土$）
注：与对照组比较,* P<0. 05；与SP+si-con 组比较,*P<0. 05；n = 9
分组
PVT1表达量
细胞存活率
（%）
TGF-P
(pg/ml)IL-6
(pg/ml)对照组l.00±0. 13l00.00±l0. 23587.37±48.96
376.58±34.21
SP 3. 29±0. 25 *45.27±4. 13*
936. 15±67.32 *671.34±48. 35 *
SP+si-con
3.42±0. 29
47. 06±5. 26921.48±60. 39654. 27±42. 18SP+si-PVTl l.43±0. 18*
87. 39±& 50*
654. 26±56. 18*
449. 32±41.53*
2.3 PVT1对肺炎链球菌诱导的A549细胞凋亡的影 响本研究进一步探究肺炎链球菌感染对A549细胞
A
八
I0410410；-
103凋亡的影响。如图1和表3所示，与对照组相比，肺炎 链球菌诱导的A549细胞凋亡率和凋亡相关蛋白Bax 表达明显增加，差异有统计学意义（P<0. 05），而凋亡
相关蛋白Bcl-2表达明显降低，差异有统计学意义 （P<0. 05 ）o 敲减 P VT1 后，与 SP +si-con 组相比，SP + si-PVTl 组A549细胞凋亡率和Bax 表达明显降低，
Bcl-2表达明显升高，差异有统计学意义（P<0. 05 ）o 而SP 组与SP+si-con 组凋亡率以及凋亡相关蛋白Bax
和Bcl-2的表达差异无统计学意义（P>0. 05），表明肺
炎链球菌可能通过增加PVT1的表达促进A549细胞
的凋亡。
B
10?,10'-I02
10?,10'
102
'io 0 io 1 io 2 ioMb'^io
0 io 1 io 2 io J io 4->
Annexin V-FITC
图1 沉默PVT1对肺炎链球菌诱导的A549细胞凋亡的影响
表3敲减PVT1对肺炎链球菌诱导的A549细胞 凋亡的影响（i±i ）
注：与对照组比较，* P<0. 05；与SP+si-co n 组比较，"P<0.05；n = 9。
分组凋亡率（％）凋亡相关蛋白
Bax Bcl-2对照组
4. 32±O. 62
0. 28±0. 040. 90±0. 09SP
32. 51±2. 32*0. 93±0. 08*0. 24±0. 04*SP+si-con 30. 14±2. 010. 90±0. 070. 27±0. 03SP+si-PVTl
9. 27±1.35*
0. 47 ±0. 05*
0. 73±O. 08*
2.4 PVT1靶向负调控miR-130a-3p 表达 如图2所
示，通过Lncbase 网站课题组预测PVT1和miR-130a-3p 有互补序列，结合的可能性很高。双荧光素酶报告基
因检测结果（表4）显示,LncRNA PVT1可明显抑制 miR-130a-3p 的荧光素酶活性（P < 0. 05 ） , LncRNA
PVT1可与miR-130a-3p 的3，UTR 特异性结合，并可调 控其表达活性。
PVT1-WT 5' ...3'
IIIIIII
miR-130a-3p
3' UACGGGAAAAUUGUAACGUGAC 5'
PVT1-MUT 5' ...GGGAAUAACGCUGGUGGAACCA ACGUGAC ... 3'
图2 PVT1与miR-130a-3p 的结合位点
qRT-PCR 检测PVT1的敲减对A549细胞中 miR-130a-3p 表达的影响。如表5所ZK，与SP + si-con
表4 A549细胞中PVT1与miR-130a-3p 的靶向关系的
双荧光素酶活性分析（x 士s,n = 9）
分组PVT1( WT)PVT1( MUT)miR-con
0. 96±0. 16 1.01±0. 14
miR-130a-3p 0. 39±0. 07 1. 04 ±0. 17t
9. 791
0. 4087
P <0. 0010.6882
表5 qRT-PCR 检测PVT1的敲减对A549细胞中
miR-130a-3p 表达的影响（x±s ,n = 9）分组miR-130a-3p 的表达量
si-con
I. 04±0. 11si-PVTl
无机颜料分散剂
2. 81±0. 24
t 20. 11P
<0. 001
组相比，SP+si-PVTl 组 A549 细胞中 miR-130a-3p 的 表达明显升高（P<0.05）。说明PVT1可靶向负调控
miR-130a-3p 表达。
2.5 PVT1通过下调miR-130a-3p 的表达影响肺炎链 球菌诱导的A549细胞的增殖、炎症因子的表达及凋亡 随后，课题组探究PVT1是否通过抑制miR-130a-3p 的表达进而抑制肺炎链球菌诱导的A549细胞的增
殖，促进A549细胞炎症因子的表达和凋亡（图3、表6
和表7）。如表6所示，与SP + si-con 组相比,SP+si- PVTl 组miR-130a-3p 的表达明显升高（P<0. 05），细 胞存活明显升高（P<0. 05），炎症因子TGF-p 和IL-6 表达明显降低（P < 0. 05 ）。锁核酸修饰的anti-miR- 130a-3p 共转染细胞后，与 SP + si-PVTl + anti-miR-con 组相比，SP +si-PVTl +anti-miR -130a-3p 组 miR-130a-3p
的表达明显降低（P<0. 05 ），细胞增殖明显降低（P< 0. 05），炎症因子TGF-P 和IL-6表达明显升高（P<
0. 05）o 流式细胞术和Western blot 检测结果（图3和
表7）显示，与SP+si-con 组相比,SP+si-PVTl 组凋亡 率和Bax 的表达明显降低（P<0.05） ,Bcl-2的表达明
显升高（P<0.05）。与 SP+si-PVTl+anti-miR-con 组相 比,SP + si-PVTl +anti-miR-130a-3p 组凋亡率和 Bax 的 表达明显升高（P<0. 05） ,Bcl-2的表达明显降低（P<
0. 05），提示PVT1可靶向负调控miR-130a-3p，进而减
轻肺炎链球菌诱导的A549细胞的损伤:'
10' IO? 103 104 SP+si-PVTl +SP+si-PVTl
*
----1---丄--1
anti-miR-130a-3p
*
Annexin V-FITC
图3 PVT1通过下调miR-130a-3p 的表达促进肺炎链球菌诱导的A549细胞的凋亡
表6 PVT1通过下调miR-130a-3p 的表达抑制肺炎链球菌诱导的A549细胞增殖及炎性因子的表达（斤士s ）
分组
miR-130a-3p 表达量细胞存活率（％）TGF-P ( pg/inl )IL-6( pg/ml )SP + si-con 1. 00 土 0. 16100. 00±10. 53934. 56±67. 43
673. 51±48. 62SP+si-PVTl
2. 93±0. 21 *196. 37±15. 36*632. 8I±5
3. 20*427. 30±43. 15*SP+si-PVTl+anti-miR-con 2. 76±0. 25
192. 91 ±22. 14
646. 57±59. 42448. 15±46. 34
SP+si-PVTl +anti-miR-130a-3p
1. 37±0. 18*135.62±14. 07*85
fe光模块2. 84±76. 39*
618. 62±56. 63*
注：与 SP+si-con 组比较，* P<0. 05；与 SP+si-PVTl+anti-miR-con 组比较,*P<0. 05；n = 9o
表7 PVT1通过下调miR-130a-3p 的表达促进肺炎链球菌
诱导的A549细胞的凋亡（x±5）
分组
凋亡率（％）
凋亡相关蛋白Bax Bcl-2SP+si-con 33.67±2. 510. 93±0. 080. 25±0. 04SP+si-PVTl
9.05±0. 92*
0. 40±0. 05 *
0. 86±0. 08*
SP+si-PVTl +anti-miR-con 9.62±1.030. 43±0. 040. 83±0. 06SP+si-PVTl +anti-miR-130a-3p
26. 49±2. 16"
0. 87±0. 09*
0. 34±0. 05*
注：与 SP+si-con 组比较，*P<0. 05；与 SP+si-PVTl+anti-miR-con 组比较，S<
0. 05 ； n = 9
3讨论
肺炎是一种肺部炎症疾病，可由细菌、病毒和真菌 等微生物感染引起，具有高发病率和高死亡率⑴。肺
炎链球菌是一种革兰阳性菌，具有超过90种血清型， 是肺部感染最常见的病原体。肺炎链球菌感染后可导 致呼吸道炎症失调，破坏呼吸道结构®⑵。研究表明，
肺炎链球菌可分泌过氧化氢导致人肺泡上皮细胞 DNA 损伤和肺细胞凋亡W 肺炎链球菌感染还可促
进支气管上皮细胞分泌IL-6和1L-8的分泌，增加气道 炎症W 本研究发现肺炎链球菌感染可促进肺泡上 皮细胞的凋亡，减少肺泡上皮细胞的增殖，促进炎症因
子IL-6和TGF-p 的分泌。表明肺炎链球菌感染可诱
导肺泡上皮的损伤。
研究表明，PVT1在多种肿瘤中表达上调1，5-'61O Cui 等I ⑴发现肝细胞癌组织中人PVT1上调，而具有
较高PVT1表达的患者临床预后较差。此外，PVT1
可通过稳定NOP2蛋白来促进肝癌细胞的细胞增殖，
细胞周期和干细胞样特性的获得'阖。在小鼠腹主动
脉瘤模型中敲低PVT1可抑制血管平滑肌细胞凋亡和 细胞外基质破坏⑴）。PVT1还可调节炎症反应。在脓
毒症诱导的急性肾损伤中，PVT1可通过调节肾小管 上皮细胞JNK/NF-k B 途径增加的TNFa 的产生呦。
敲除PVT1可抑制IL-lp 诱导的软骨细胞损伤2"。本
研究从在动物水平和细胞水平发现肺炎链球菌感染可
增加PVT1的表达，
进一步细胞实验发现肺炎链球菌
