地氯雷他定衍生物、其制备方法及其用途与流程

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1.本技术涉及化学合成领域，更具体涉及一种地氯雷他定衍生物、其制备方法以及其用途。

背景技术：

2.氯雷他定(loratadine)是一种长效无镇静作用的三环类第二代抗组胺药。由美国先灵保雅(schering plough)公司研制开发，1988年3月在比利时首次上市。氯雷他定由于心脏毒性低、对季节性鼻炎、常年性鼻炎及慢性荨麻疹等变态反应性疾病具有较好的疗效，是目前最畅销的h1受体拮抗剂(histamine h1 receptorantagonists)。地氯雷他定(desloratadine)是一种三环长效型的第三代组织胺拮抗剂。
3.不过，虽然氯雷他定、地氯雷他定已经广泛使用，但本领域技术人员仍然在研究寻替代药物，甚至是效果更好的类似药物。

技术实现要素：

4.在一方面，本技术提供了式(a)化合物，
5.其中，所述
–
r选自
–r′
和
–y–
(ch2)
–r′
中的至少一个；所述y选自o和nh中的至少一个、且所述n选自由1、2、3、4、5、和6所组成的组中的至少一个；且所述
–r′
选自由二乙基氨基吡咯烷基哌嗪基n-吗啉基双(2-甲氧基乙基)氨基和4-甲基哌嗪基所组成的组中的至少一个。
6.在一方面，本技术提供了一种合成式(a)化合物的方法。包括：将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，得到式(b)化合物；以及将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，得到式(a)化合物，其中，x选自cl和br中的至少一个。
7.在一些实施方式中，提供了一种合成式(a)化合物的方法，包括：以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，得到式(a)化合物。
8.在一方面，本技术提供了式(b)化合物在制备式(a)化合物中的用途。
9.在一方面，本技术提供了化合物h
–
r在制备式(a)化合物中的用途。
10.在一方面，本技术提供了式(a)化合物，在制备缓解或或预防过敏及其相关症状的药物的用途。
11.本技术的一些实施例中，通过本技术的化合物及其制造方法、及其相关用途，可以得到在一方面相较于现有技术的氯雷他定药物来得更为优异的效果，例如是在药物吸收率、尤其是在经皮药物吸收率上获得了优异的技术效果，同时也为这一类型的药物提供了更多样的替代技术方案。本技术的一些实施例中，合成方法各步骤的反应条件温和，适用于上述本技术的实施例的化合物中的各种
–
r、y、n与
–r′
的选择。
附图说明
12.图1为本技术的一些实施例中，式(b2)化合物的nmr图谱。
13.图2a
–
2b为本技术的一些实施例中，式(a2)化合物的lc-ms图谱。
14.图2c为本技术的一些实施例中，式(a2)化合物的nmr图谱。
15.图3为本技术的一些实施例中，式(a6)化合物的nmr图谱。
16.图4a
–
4b为本技术的一些实施例中，式(a12)化合物的lc-ms图谱。
17.图4c为本技术的一些实施例中，式(a12)化合物的nmr图谱。
18.图5为本技术的一些实施例中，式(a18)化合物的nmr图谱。
19.图6a
–
6b为本技术的一些实施例中，式(a24)化合物的lc-ms图谱。
20.图6c为本技术的一些实施例中，式(a24)化合物的nmr图谱。
21.图7a
–
7b为本技术的一些实施例中，式(a30)化合物的lc-ms图谱。
22.图7c为本技术的一些实施例中，式(a30)化合物的nmr图谱。
23.图8a
–
8b为本技术的一些实施例中，式(a36)化合物的lc-ms图谱。
24.图8c为本技术的一些实施例中，式(a36)化合物的nmr图谱。
25.图9为本技术的一些实施例中，式(a42)化合物的nmr图谱。
26.图10a
–
10b为本技术的一些实施例中，式(a48)化合物的lc-ms图谱。
27.图10c为本技术的一些实施例中，式(a48)化合物的nmr图谱。
28.图11为本技术的一些实施例中，式(a54)化合物的nmr图谱。
29.图12a
–
12b为本技术的一些实施例中，式(a55)化合物的lc-ms图谱。
30.图12c为本技术的一些实施例中，式(a55)化合物的nmr图谱。
31.图13a
–
13b为本技术的一些实施例中，式(a60)化合物的lc-ms图谱。
32.图13c为本技术的一些实施例中，式(a60)化合物的nmr图谱。
33.图14为本技术的一些实施例中，式(a66)化合物的nmr图谱。
34.图15a
–
15b为本技术的一些实施例中，式(a72)化合物的lc-ms图谱。
35.图15c为本技术的一些实施例中，式(a72)化合物的nmr图谱。
36.图16a
–
16b为本技术的一些实施例中，式(a74)化合物的lc-ms图谱。
37.图16c为本技术的一些实施例中，式(a74)化合物的nmr图谱。
38.图17a为本技术的一些实施例中，给药后式(a2)化合物与地氯雷他定的血浆药时曲线图。
39.图17b为本技术的一些实施例中，给药后式(a2)化合物与地氯雷他定的皮肤药时曲线图。
40.图17c为本技术的一些实施例中，给药后式(a2)化合物与地氯雷他定的肌肉药时曲线图。
41.图17d为本技术的一些实施例中，给药后式(a2)化合物与地氯雷他定的骨骼药时曲线图。
42.图18为本技术的一些实施例中，式(a2)化合物的药物吸收百分比曲线图。
43.图19a
–
19n分别为本技术的一些实施例中，式(a6)化合物、式(a12)化合物、式(a18)化合物、式(a24)化合物、式(a30)化合物、式(a36)化合物、式(a42)化合物、式(a48)化合物、式(a54)化合物、式(a55)化合物、式(a60)化合物、式(a66)化合物、式(a72)化合物、式(a74)化合物的药物吸收百分比曲线图。
44.图20为本技术的一些实施例中，大鼠因为过敏反应背部出现明显蓝斑点的图。
45.图21a至图21d分别为本技术的一些实施例中，空白组、模型组、氯雷他定组、式(a2)化合物组中，小鼠背部出现或未出现蓝斑点的图。
46.图22为式(a)化合物。
具体实施方式
47.为更进一步阐述本技术为了达成预定目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对依据本技术的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如下。
48.在一些实施方式中，提供了一种化合物为式(a)化合物，
[0049][0050]
式(a)化合物如图22所示。
[0051]
在一些实施方式中，所述
–
r选自由
–y–
(ch2)
–r′
和
–r′
所组成的组的至少一个。为
–y–
(ch2)
–r′
。在一些实施方式中，所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
。在一些实施方式中，所述
–
r为
–r′
。在一些实施方式中，所述y选自由o和nh所组成的组中的至少一个。在一些实施方式中，所述n选自由1、2、3、4、5、和6所组成的组中的至少一个。
[0052]
在一些实施方式中，所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，所述y选自由o和nh所组成的组中的至少一个，且所述n选自由1、2、3、4、5、和6所组成的组中的至少一个，即所述式(a)化合物为式(a
′
)化合物，
[0053]
[0054]
在一些实施方式中，所述
–
r为
–r′
，即所述式(a)化合物为式(a
″
)化合物，
[0055][0056]
在一些实施方式中，所述
–r′
选自由二乙基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、n-吗啉基、双(2-甲氧基乙基)氨基、和4-甲基哌嗪基所组成的组中的至少一个。
[0057]
在一些实施方式中，所述y为o。在一些实施方式中，所述y为nh。在一些实施方式中，所述n为1。在一些实施方式中，所述n为2。在一些实施方式中，所述n为3。在一些实施方式中，所述n为4。在一些实施方式中，所述n为5。在一些实施方式中，所述n为6。在一些实施方式中，所述y为共价键、且所述n为0。
[0058]
在一些实施方式中，所述n为1或2。在一些实施方式中，所述n为1、2或3。在一些实施方式中，所述n为1、2、3或4。在一些实施方式中，所述n为1、2、3、4或5。在一些实施方式中，所述n选自由1至3所组成的组中的至少一个。在一些实施方式中，所述n选自由1至4所组成的组中的至少一个。在一些实施方式中，所述n选自由1至5所组成的组中的至少一个。
[0059]
在一些实施方式中，所述
–r′
为二乙基氨基。在一些实施方式中，所述
–r′
为吡咯烷基。在一些实施方式中，所述
–r′
为哌嗪基。在一些实施方式中，所述
–r′
为n-吗啉基。在一些实施方式中，所述
–r′
为双(2-甲氧基乙基)氨基。在一些实施方式中，所述
–r′
为4-甲基哌嗪基。
[0060]
在一些实施方式中，式(a)化合物选自由式(a1)化合物至式(a78)化合物所组成的组中的至少一种：
[0061]
[0062]
[0063]
[0064]
[0065][0066]
在一些实施方式中，式(a)化合物选自由式(a1)化合物至式(a72)化合物所组成的组中的至少一种。在一些实施方式中，式(a)化合物选自由式(a73)化合物至式(a78)化合物所组成的组中的至少一种。
[0067]
在一些实施方式中，提供了一种合成式(a)化合物，特别是选自由式(a1)化合物至式(a72)化合物所组成的组中的至少一种的化合物的方法，包括：将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，得到式(b)化合物；以及将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，得到式(a)化合物，
[0068][0069]
在一些实施方式中，提供了一种合成式(a)化合物的方法，其反应式如下：
[0070]
[0071]
在一些实施方式中，x选自cl和br中的至少一个。在一些实施方式中，x为cl。在一些实施方式中，x为br。
[0072]
在一些实施方式中，式(b)化合物选自由式(b1)至式(b12)化合物所组成的组中的至少一种：
[0073][0074]
在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在碱性环境下。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在n,n-二异丙基乙基胺、三乙胺和2,2,6,6-四甲基中的至少一个存在下，或在碳酸钾与碘化钾的存在下。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在n,n-二异丙基乙基胺存在下。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在碳酸钾与碘化钾存在下。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是以二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈中的至少一个作为溶剂。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是以二氯甲烷作为溶剂。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是以四氢呋喃作为溶剂。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在室温或冰浴的条件下。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在0℃至20℃的温度中。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在0℃至10℃的温度中。在一些实施方式中，将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在5℃的温度中。
[0075]
在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在碱性环境下。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在n,n-二异丙基乙基胺、三乙胺和2,2,6,6-四甲基中的至少一个存在下，或在碳酸钾与碘化钾的存在下。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在n,n-二异丙基乙基胺存在下。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在碳酸钾与碘化钾存在下。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是以二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈中的至少一个作为溶剂。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是以乙腈作为溶剂。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在室温或加热的条件下。在一些实施方式中，将式(b)
化合物与化合物h
–r′
接触，是在加热回流条件下。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在50℃至80℃的温度中。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在60℃至70℃的温度中。在一些实施方式中，将式(b)化合物与化合物h
–r′
接触，是在65℃的温度中。
[0076]
在一些实施方式中，本技术提供了式(b)化合物在制备式(a)化合物中的用途。在一些实施方式中，本技术提供了x(ch2)yc(＝o)cl在制备式(a)化合物中的用途。在一些实施方式中，本技术提供了化合物h
–r′
在制备式(a)化合物中的用途。在一些实施方式中，本技术提供了用于制备式(a)化合物的式(b)化合物。在一些实施方式中，本技术提供了用于制备式(a)化合物的x(ch2)yc(＝o)cl。在一些实施方式中，本技术提供了用于制备式(a)化合物的化合物h
–r′
。
[0077]
在一些实施方式中，提供了一种合成式(a)化合物，特别是选自由式(a1)化合物至式(a72)化合物所组成的组中的至少一种的化合物的方法，包括：以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，得到式(a)化合物。
[0078]
在一些实施方式中，所述化合物h
–
r选自由化合物h
–r′
和化合物h
–y–
(ch2)
–r′
所组成的组中的至少一个。在一些实施方式中，所述化合物h
–
r为化合物h
–y–
(ch2)
–r′
。在一些实施方式中，所述化合物h
–
r为化合物h
–y–
(ch2)
–r′
，且所述y为o。在一些实施方式中，所述化合物h
–
r为化合物h
–y–
(ch2)
–r′
，且所述y为nh。在一些实施方式中，所述n为1。在一些实施方式中，所述n为2。在一些实施方式中，所述n为3。在一些实施方式中，所述n为4。在一些实施方式中，所述n为5。在一些实施方式中，所述n为6。在一些实施方式中，所述化合物h
–
r为化合物h
–r′
。在一些实施方式中，所述
–r′
为二乙基氨基。在一些实施方式中，所述
–r′
为吡咯烷基。在一些实施方式中，所述
–r′
为哌嗪基。在一些实施方式中，所述
–r′
为n-吗啉基。在一些实施方式中，所述
–r′
为双(2-甲氧基乙基)氨基。在一些实施方式中，所述
–r′
为4-甲基哌嗪基。
[0079]
在一些实施方式中，化合物h
–
r选自由式(c1)至式(c78)化合物所组成的组中的至少一种：
[0080]
[0081][0082]
在一些实施方式中，化合物h
–
r选自由式(c1)至式(c72)化合物所组成的组中的至少一种。在一些实施方式中，化合物h
–
r选自由式(c73)至式(c78)化合物所组成的组中的至少一种。
[0083]
在一些实施方式中，所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
且所述y为o，且以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以化合物h
–
r(即化合物ho
–
(ch2)
–r′
)与n,n
′‑
羰基二咪唑接触，得到第一化合物；以及将第一化合物与地氯雷他定接触。
[0084]
在一些实施方式中，所述第一化合物包括式(ca)化合物或由其组成，
[0085]
在一些实施方式中，所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
且所述y为nh，且以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以化合物h
–
r(即化合物h2n
–
(ch2)
–r′
)与光气和/或三光气接触，得到第二化合物；以及将第二化合物与地氯雷他定接触。
[0086]
在一些实施方式中，所述第二化合物包括式(cb)化合物或由其组成，
[0087]
在一些实施方式中，所述
–
r为
–r′
，且以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以地氯雷他定与氯甲酸对硝基苄酯、n,n
′‑
羰基二咪唑和/或三光气接触，得到第三化合物；以及将第三化合物与化合物h
–
r(即化合物h
–r′
)接触。
[0088]
在一些实施方式中，所述第三化合物包括式(cc)化合物或由其组成，
[0089]
在一些实施方式中，提供了所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
且所述y为o的化合物h
–
r(即，化合物ho
–
(ch2)
–r′
)的制备方法，包括将化合物h
–r′
与ho(ch2)x
′
接触。在一些实施方式中，将h
–r′
与ho(ch2)x
′
接触是在碱性条件下，更特别是在碳酸钾存在下。在一些实施方式中，将h
–r′
与ho(ch2)x
′
接触是在四氢呋喃中。在一些实施方式中，x
′
为br。
[0090]
在一些实施方式中，提供了所述
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
且所述y为nh的化合物h
–
r(即，化合物h2n
–
(ch2)
–r′
)的制备方法，包括将邻苯二甲酰亚胺盐，特别是将邻苯二甲酰亚胺钾，与x
″
(ch2)x
″
接触，得到第四化合物；将第四化合物与化合物h
–r′
接触，得到第五化合物；以及将第五化合物与肼接触。在一些实施方式中，x
″
为br。
[0091]
在一些实施方式中，所述第四化合物包括式(c
″
)化合物或由其组成，
[0092]
在一些实施方式中，所述第五化合物包括式(c
′
)化合物或由其组成，
[0093]
在一些实施方式中，本技术提供了式(a)化合物，在制备缓解或或预防过敏及其相关症状的药物的用途。在一些实施方式中，本技术提供了用于缓解或或预防过敏的式(a)化合物。在一些实施方式中，本技术提供了一种缓解或或预防过敏的方法，包括施用式(a)化合物。在一些实施方式中，本技术提供了式(a)化合物在缓解或或预防过敏的用途。在一些实施方式中，所述过敏及其相关症状选自皮肤过敏反应、异位性皮肤炎、荨麻疹、湿疹、鼻炎和气喘所组成的组中的至少一种。在一些实施方式中，所述过敏及其相关症状选自慢性荨麻疹、常年性鼻炎和季节性鼻炎的至少一种。在一些实施方式中，所述过敏及其相关症状包括被动皮肤过敏反应(pca)。在一些实施方式中，所述缓解或或预防过敏及其相关症状的药物，其剂型为选自喷剂、贴剂、敷料、凝胶、软膏、乳膏、注射剂、口服药物所组成的组中的至少一种。在一些实施方式中，所述缓解或或预防过敏及其相关症状的药物，是通过喷洒、涂抹、贴、敷、注射剂、口服所组成的组中的至少一种来施用。
[0094]
在一些实施方式中，式(a)化合物为式(a2)化合物，式(b)化合物为式(b2)化合物。
[0095]
地氯雷他定衍生物(式(a)化合物)的制备
[0096]
通过合成式(b2)化合物合成式(a2)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为二乙基氨基，
n＝2，y为o)
[0097][0098]
【式(b2)化合物的制备】
[0099]
将地氯雷他定(3g，1eq)和二异丙基乙胺(1.1eq)溶解在二氯甲烷(30ml)中，冰浴冷却，5℃下滴加氯甲酸氯乙酯(1eq)。滴加完毕继续反应2小时。
[0100]
加入30ml水淬灭反应，二氯甲烷60ml萃取3遍。合并二氯甲烷，水洗，干燥，过滤，浓缩后得到产物：式(b2)化合物(4g)。
[0101]
式(b2)化合物的nmr图谱，如图1。
[0102]
【式(a2)化合物的制备】
[0103]
将式(b2)化合物(4g，0.359mmol)、二乙胺(10eq)，碘化钾(10eq)和碳酸钾(10eq)放入反应瓶中，氮气置换后，加入乙腈(30ml)。将反应体系加热到65℃反应18小时。随后继续反应10小时至反应结束。
[0104]
冷却后，加入30ml水淬灭反应，二氯甲烷60ml萃取3遍。合并二氯甲烷，水洗，干燥，过滤，浓缩后柱层析得到产品式(a2)化合物(2.1g)。
[0105]
式(a2)化合物的lc-ms图谱，如图2a、2b；其nmr图谱，如图2c。
[0106]
通过合成式(c6)化合物合成式(a6)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为二乙基氨基，n＝6，y为o)
[0107]
【式(c6)化合物的制备】
[0108][0109]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、二乙胺(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌3至6小时，薄层谱监测反应。
[0110]
反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(c6)化合物。
[0111]
【式(a6)化合物的制备】
[0112][0113]
将式(c6)化合物(1.0eq)溶于n,n,-二甲基甲醯胺(dmf)，加入n,n
′‑
羰基二咪唑(cdi)(1.0eq)，室温搅拌1小时，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。
[0114]
再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。
[0115]
反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a6)化合物。
[0116]
式(a6)化合物的nmr图谱，如图3。
[0117]
通过合成式(c12)化合物合成式(a12)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为二乙基氨基，n＝6，y为n)
[0118]
【式(c12)化合物的制备】
[0119][0120]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于5v(倍体积)的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0121]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与二乙胺(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析纯化。得到式(c12
′
)化合物。
[0122]
将式(c12
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c12)化合物。
[0123]
【式(a12)化合物的制备】
[0124][0125]
将式(c12)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩，残
余物通过硅胶柱层析纯化。得产物为式(a12)化合物。
[0126]
式(a12)化合物的lc-ms图谱，如图4a
–
4b；其nmr图谱，如图4c。
[0127]
通过合成式(c18)化合物合成式(a18)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为哌嗪基，n＝6，y为o)
[0128]
【式(c18)化合物的制备】
[0129][0130]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、哌嗪(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌3至6小時，薄层谱监测反应。反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到1-哌嗪己醇(式(c18)化合物)。
[0131]
【式(a18)化合物的制备】
[0132][0133]
将1-哌嗪己醇(式(c18)化合物)(1.0eq)溶于dmf，加入cdi(1.0eq)，室温搅拌1小时，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a18)化合物，纯度为97.85％。
[0134]
式(a18)化合物的nmr图谱，如图5。
[0135]
通过合成式(c24)化合物合成式(a24)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为哌嗪基，n＝6，y为n)
[0136]
【式(c24)化合物的制备】
[0137][0138]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于5v的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0139]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与哌嗪(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析纯化，洗脫剂为正己烷/乙酸乙酯。得到式(c24
′
)化合物。
[0140]
将式(c24
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c24)化合物。
[0141]
【式(a24)化合物的制备】
[0142][0143]
将式(c24)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱谱纯化。得到式(a24)化合物。
[0144]
式(a24)化合物的lc-ms图谱，如图6a
–
6b；其nmr图谱，如图6c。
[0145]
通过合成式(c30)化合物合成式(a30)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为双(2-甲氧基乙基)氨基，n＝6，y为o)
[0146]
【式(c30)化合物的制备】
[0147][0148]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、双(2-甲氧基乙基)胺(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌4-6h，薄层谱监测反应。反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到6-(双(2-甲氧基乙基)氨基)己-1-醇(式(c30)化合物)。
[0149]
【式(a30)化合物的制备】
[0150][0151]
将6-(双(2-甲氧基乙基)氨基)己-1-醇(式(c30)化合物)(1.0eq)溶于dmf，加入cdi(1.0eq)，室温搅拌1小時，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。
有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a30)化合物。
[0152]
式(a30)化合物的lc-ms图谱，如图7a
–
7b；其nmr图谱，如图7c。
[0153]
通过合成式(c36)化合物合成式(a36)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为双(2-甲氧基乙基)氨基，n＝6，y为n)
[0154]
【式(c36)化合物的制备】
[0155][0156]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于适量的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯∶石油醚＝1∶40。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0157]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与双(2-甲氧基乙基)胺(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析纯化，洗脱剂为正己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝5∶5∶1。得到式(c36
′
)化合物。
[0158]
将式(c36
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c36)化合物。
[0159]
【式(a36)化合物的制备】
[0160][0161]
将式(c36)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳
酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱纯化。得到式(a36)化合物。
[0162]
式(a36)化合物的lc-ms图谱，如图8a
–
8b；其nmr图谱，如图8c。
[0163]
通过合成式(c42)化合物合成式(a42)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为吡咯烷基，n＝6，y为o)
[0164]
【式(c42)化合物的制备】
[0165][0166]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、吡咯(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌3至6小时，薄层谱监测反应。反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到6-(吡咯烷-1-基)-己-1-醇(式(c42)化合物)。
[0167]
【式(a42)化合物的制备】
[0168][0169]
将6-(吡咯烷-1-基)-己-1-醇(式(c42)化合物)(1.0eq)溶于dmf，加入cdi(1.0eq)，室温搅拌1小时，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a42)化合物。
[0170]
式(a42)化合物的nmr图谱，如图9。
[0171]
通过合成式(c48)化合物合成式(a48)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为吡咯烷基，n＝6，y为n)
[0172]
【式(c48)化合物的制备】
[0173][0174]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于适量的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0175]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与吡咯(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入
3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析化，洗脱剂为正己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝5∶5∶1。得到式(c48
′
)化合物。
[0176]
将式(c48
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c48)化合物。
[0177]
【式(a48)化合物的制备】
[0178][0179]
将式(c48)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱纯化。得到式(a48)化合物。
[0180]
式(a48)化合物的lc-ms图谱，如图10a
–
10b；其nmr图谱，如图10c。
[0181]
通过合成式(c54)化合物合成式(a54)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为n-吗啉基，n＝6，y为o)
[0182]
【式(c54)化合物的制备】
[0183][0184]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、吗啉(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌3至6小时，薄层谱监测反应。反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到6-(吗啉基)-己-1-醇(式(c54)化合物)。
[0185]
【式(a54)化合物的制备】
[0186][0187]
将6-(吗啉基)-己-1-醇(式(c54)化合物)(1.0eq)溶于dmf，加入cdi(1.0eq)，室温
搅拌1小时，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a54)化合物。
[0188]
式(a54)化合物的nmr图谱，如图11。
[0189]
通过合成式(c55)化合物合成式(a55)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为n-吗啉基，n＝1，y为n)
[0190]
【式(c55)化合物的制备】
[0191][0192]
将原料溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物(式(c55)化合物)，直接用于下一步。
[0193]
【式(a55)化合物的制备】
[0194][0195]
将式(c55)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱纯化。得到式(a55)化合物。
[0196]
式(a55)化合物的lc-ms图谱，如图12a
–
12b；其nmr图谱，如图12c。
[0197]
通过合成式(c60)化合物合成式(a60)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为n-吗啉基，n＝6，y为n)
[0198]
【式(c60)化合物的制备】
[0199]
[0200]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于适量的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0201]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与吗啉(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析纯化，洗脫剂为正己烷/乙酸乙酯。得到式(c60
′
)化合物。
[0202]
将式(c60
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c60)化合物。
[0203]
【式(a60)化合物的制备】
[0204][0205]
将式(c60)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱纯化。得到式(a60)化合物。
[0206]
式(a60)化合物的lc-ms图谱，如图13a
–
13b；其nmr图谱，如图13c。
[0207]
通过合成式(c66)化合物合成式(a66)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为4-甲基哌嗪基，n＝6，y为o)
[0208]
【式(c66)化合物的制备】
[0209][0210]
在室温下将溴代己醇(1.0eq)、n-甲基吗啉(1.5eq)溶于适量的四氢呋喃，向体系中加入碳酸钾(3.0eq)，室温搅拌3至6小时，薄层谱监测反应。反应完后加入水淬灭反应，用适量的乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，减压蒸干得到粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到6-(4-甲基哌嗪-1-基)己-1-醇(式(c66)化合物)。
[0211]
【式(a66)化合物的制备】
[0212][0213]
将6-(4-甲基哌嗪-1-基)己-1-醇(1.0eq)溶于dmf，加入cdi(1.0eq)，室温搅拌1小时，薄层谱监测确保cdi基本反应完全。再向反应中加入地氯雷他定，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a66)化合物。
[0214]
式(a55)化合物的nmr图谱，如图14。
[0215]
通过合成式(c72)化合物合成式(a72)化合物(
–
r为
–y–
(ch2)
–r′
，
–r′
为4-甲基哌嗪基，n＝6，y为n)
[0216]
【式(c72)化合物的制备】
[0217][0218]
将邻苯二甲酰亚胺钾(1.0eq)、1,6-二溴己烷(5.0eq)溶于适量的dmf中，在100℃下搅拌反应约12小时。之后减压蒸馏，除去过量的1,6-二溴己烷和dmf。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚。得到n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺。
[0219]
将n-(6-溴己基)邻苯二甲酰亚胺(1.0eq)与n-甲基哌嗪(4.0eq)溶解于50v乙腈中，加入3.0eq碳酸钾，搅拌约24小时。减压浓缩除去溶剂得到残余物。将残留物溶解在25v的碳酸氢钠溶液中。用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干。通过柱层析纯化，洗脫剂为正己烷/乙酸乙酯。得到式(c72
′
)化合物。
[0220]
将式(c72
′
)化合物溶解在甲醇中，滴加肼一水合物(0.8ml，16mmol)。将混合物回流约4小时。将反应混合物冷却至室温，滤出不溶的邻苯二甲酰肼，减压蒸发滤液。将获得的油状物溶解在氯仿中并过滤以除去多余的邻苯二甲酰肼。将滤液浓缩，得到产物即式(c72)化合物。
[0221]
【式(a72)化合物的制备】
[0222][0223]
将式(c72)化合物(1.0eq)和二异丙基乙胺(2.0eq)溶解在50v二氯甲烷中，搅拌下加入三光气(0.3eq)的二氯甲烷溶液。将所得混合物在0℃搅拌约3小时，然后加入地氯雷他定(1.0eq)。反应混合物升至室温过夜。然后减压除去溶剂后，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢盐溶液之间分液。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩成残余物，将其通过硅胶柱纯化。得到式(a72)化合物。
[0224]
式(a72)化合物的lc-ms图谱，如图15a
–
15b；其nmr图谱，如图15c。
[0225]
合成式(a74)化合物(
–
r为
–r′
，
–r′
为哌嗪基)
[0226][0227]
将地氯雷他定(1.0eq)溶于dmf，加入氯甲酸对硝基苄酯(1.2eq)，室温搅拌约3至4小时，薄层谱监测确保原料基本反应完全。
[0228]
再向反应中加入哌嗪，加热到80℃反应过夜。反应完后加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得到油状粗产物。粗产物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/二氯甲烷。得到式(a74)化合物。
[0229]
式(a74)化合物的lc-ms图谱，如图16a
–
16b；其nmr图谱，如图16c。
[0230]
药代动力学研究
[0231]
本实验考察大鼠皮肤给予各式(a)化合物后，评价各式(a)化合物及其代谢物的皮肤、血浆暴露量和各式(a)化合物皮肤剩余载药量，初步研究大鼠透皮给药的吸收效率。
[0232]
实验选用32只体重相近的雄性sd大鼠，给予剂量为1mg/只，皮肤涂抹单次给药。各组动物给药后在不同时间点采集血液及给药部位皮肤、肌肉、骨骼。采用lc-ms/ms分析方法检测血浆和皮肤、肌肉、骨骼组织中各式(a)化合物、地氯雷他定及3-oh地氯雷他定的含量。
[0233]
统计血浆浓度数据，利用非房室模型法(nca)计算药代参数。
[0234]
实验表明，皮肤给予sd大鼠式(a)化合物水剂后，药代行为均符合基本药代动力学行为趋势。
[0235]
供试品配制
[0236]
配置终浓度为16.7mg/ml各式(a)化合物的水溶液。最终制剂呈澄清溶液。
[0237]
实验动物与给药
[0238]
选用36只雄性sd大鼠进行实验。给药前禁食过夜，至少禁食16小时，4小时点后恢复饲料供应。给药时周龄6
–
8周。给药前测定动物体重，选择体重相近的健康动物纳入实验，体重186
–
207g，其中32只为给药组，4只为空白组。
[0239]
每只实验动物单次给药1mg/只的供试品(16.7mg/ml式(a)化合物水溶液)。给药途径为皮肤涂抹，近颈部的背部皮肤去除被毛，200μl移液器吸取式(a)化合物水剂，给药面积大约为1.5
×
1.5cm2(剃毛面积2
×
2cm2)。给药后，动物代谢笼单笼饲养。
[0240]
实验动物样品采集与配制
[0241]
将给药组32只小鼠均分为八组，在给药后0.5小时、1小时、2小时、3小时、5小时、8小时、12小时、24小时，静脉或其他方式采集血样8ml，并安乐死。安乐死后，采集给药部位皮肤及给药部位肌肉、骨骼。
[0242]
血样采集后，放入含有肝素钠(抗凝剂)的ep管中，立即置于碎冰中，之后在4500rpm低温(4℃)的条件下离心5min，取上清血浆，并置于干冰中，尽快转入超低温冰箱冷冻。给药部位皮肤及给药部位肌肉、骨骼采集后，取样后皮肤和肌肉、骨骼组织立即放入匀浆管中，并置于干冰中，尽快转入超低温冰箱冷冻。
[0243]
标准曲线及质控样品配制
[0244]
以80％甲醇水溶液为稀释溶剂，配制式(a)化合物、地氯雷他定及3-oh地氯雷他定的标准曲线工作溶液和质控工作溶液。
[0245]
取工作溶液5μl与45μl空白血浆混合，配制成血浆标准曲线和质控样品。取工作溶液5μl与45μl空白匀浆液(组织∶匀浆液＝1g∶5ml甲醇)混合，配制成组织标准曲线和质控样品。
[0246]
液相谱－质谱分析样品配制
[0247]
【式(a2)化合物、地氯雷他定】
[0248]
实验动物血浆样品、血浆标准曲线和质控样品，在室温解冻后，取50μl，加入400μl的内标工作液(10ng/ml的特非那定的乙腈溶液)，涡旋混匀1min后，4℃，15400g条件下离心10min。取上清液进样分析。
[0249]
实验动物组织样品、组织标准曲线和质控样品，在室温解冻后，取50μl，加入400μl/500μl的内标工作液(10ng/ml的特非那定的乙腈溶液)，涡旋混匀1min后，4℃，15400g条件下离心10min。取上清液进样分析。
[0250]
【式(a6)化合物、式(a12)化合物、式(a18)化合物、式(a24)化合物、式(a30)化合物、式(a36)化合物、式(a42)化合物、式(a48)化合物、式(a54)化合物、式(a55)化合物、式(a60)化合物、式(a66)化合物、式(a72)化合物、式(a74)化合物】
[0251]
取100μl样品(血浆样品、血浆标准曲线或质控样品，或组织样品、组织标准曲线或质控样品)，加入1500μl甲醇，混合均匀。从其中取20μl，加入1500μl内标工作液(200ng/ml特非那定+10μg/ml橙皮素+5μg/ml甲苯磺丁脲的乙腈溶液)，涡旋混匀1min后，4℃，15400g条件下离心10min。取上清液进样分析。
[0252]
液相谱条件及质谱条件
[0253]
【式(a2)化合物、地氯雷他定】hplc：lc-20a,shimadzu；液相泵：lc-20ad
xr
；柱温箱：cto-20ac；自动进样器：sil-20ac
xr
；控制器：cbm-20a；脱气机：dgu-20a
5r
；谱柱：zorbax eclipse plus c182.1*50mm，3.5μm,agilent；预柱：security guard cartridges c184*
2.00mm,phenomenex；柱温：室温；自动进样器洗针液：80％乙腈水；自动进样器洗针程序：rinse mode:before and after aspiration；自动进样器温度：4℃。
[0254]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为2μl。对于检测式(a2)化合物，流动相梯度在0.30min时为80％a相+20％b相，在0.80min时为20％a相+80％b相，在1.60min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为80％a相+20％b相，至2.50min运行停止。对于检测地氯雷他定、3-oh地氯雷他定，流动相梯度在0.30min时为80％a相+20％b相，在0.80min时为20％a相+80％b相，在1.60min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为80％a相+20％b相，至2.50min运行停止。
[0255]
质谱采用带有esi源的shimadzu api 4000质谱，采用正离子mrm扫描。离子源为turbo spray。
[0256]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0257]
化合物参数如表1a。
[0258]
表1a
[0259][0260]
【式(a6)化合物、式(a18)化合物】
[0261]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0262]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为70％a相+30％b相，在0.90min时为20％a相+80％b相，在1.70min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为70％a相+30％b相，至2.50min运行停止。
[0263]
质谱采用带有esi源的shimadzuapi 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0264]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0265]
化合物参数如表1b。
[0266]
表1b
[0267][0268]
【式(a42)化合物、式(a54)化合物、式(a66)化合物】
[0269]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0270]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为70％a相+30％b相，在0.90min时为20％a
相+80％b相，在1.70min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为70％a相+30％b相，至2.50min运行停止。
[0271]
质谱采用带有esi源的shimadzuapi 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0272]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0273]
化合物参数如表1c。
[0274]
表1c
[0275][0276]
【式(a12)化合物、式(a60)化合物】
[0277]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0278]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为70％a相+30％b相，在0.90min时为20％a相+80％b相，在1.70min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为70％a相+30％b相，至2.50min运行停止。
[0279]
质谱采用带有esi源的shimadzuapi 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0280]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0281]
化合物参数如表1d。
[0282]
表1d
[0283][0284]
【式(a36)化合物、式(a72)化合物】
[0285]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0286]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为75％a相+25％b相，在1.20min时为20％a相+80％b相，在1.70min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为75％a相+25％b相，至2.50min运行停止。
[0287]
质谱采用带有esi源的shimadzu api 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0288]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0289]
化合物参数如表1e。
[0290]
表1e
[0291][0292]
【式(a24)化合物、式(a30)化合物、式(a48)化合物】
[0293]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0294]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为75％a相+25％b相，在1.20min时为20％a相+80％b相，在1.70min时为20％a相+80％b相，在1.90min时为75％a相+25％b相，至2.50min运行停止。
[0295]
质谱采用带有esi源的shimadzuapi 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0296]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0297]
化合物参数如表1f。
[0298]
表1f
[0299][0300]
【式(a55)化合物、式(a74)化合物】
[0301]
hplc：shimadzu lc0a；谱柱：br-c182.1*50mm,3μm,sepax；柱温：室温。
[0302]
流动相中，a相为甲酸0.1％、乙酸铵5mm的水溶液，b相为乙腈。流速为0.70ml/min，样品进样体积为0.5μl。流动相梯度在0.30min时为80％a相+20％b相，在0.80min时为15％a相+85％b相，在1.60min时为16％a相+85％b相，在1.70min时为80％a相+20％b相，至2.50min运行停止。
[0303]
质谱采用带有esi源的shimadzuapi 4000质谱，采用正离子mrm扫描。
[0304]
源参数：cad＝10psi；cur＝30psi；gas1＝55psi；gas2＝55psi；is＝5500v；tem＝550℃。
[0305]
化合物参数如表1g。
[0306]
表1g
[0307]
[0308]
结果
[0309]
给药后，式(a2)化合物与地氯雷他定的，血浆、皮肤、肌肉、骨骼药时曲线图见图17a、17b、17c、17d。3-oh地氯雷他定在各组中均无有效检出的平均浓度或载药量。
[0310]
式(a2)化合物的药物吸收百分比曲线图见图18。sd大鼠体内的主要药代动力学参数(血浆)，如表2a。
[0311]
表2a
[0312][0313]
式(a6)化合物、式(a12)化合物、式(a18)化合物、式(a24)化合物、式(a30)化合物、式(a36)化合物、式(a42)化合物、式(a48)化合物、式(a54)化合物、式(a55)化合物、式(a60)化合物、式(a66)化合物、式(a72)化合物、式(a74)化合物的经皮药物吸收百分比曲线图见图19a
–
19n以及表2b。
[0314]
表2b
[0315][0316]
综合图17a
–
17d、图18、图19a
–
19n可以看到，除了式(a60)化合物，其余化合物在24小时之后的药物吸收率都远高于地氯雷他定。其中特别是在y为-nh-，且所述
–r′
选自n-吗啉基的情况，虽然n＝6的式(a60)化合物尚未远高于地氯雷他定，但在对应的n＝1的情况下，即式(a55)化合物，24小时的经皮药物吸收率则高达83.0％。式(a55)化合物的经皮药物吸收率也明显高于
–r′
选自其他基团的n＝6的式(a)化合物。与此同时，式(a2)化合物的经皮药物吸收率一定程度上高于式(a6)化合物的经皮药物吸收率。
[0317]
初步来看，在实施例中，n选自1至5，特别是n为1或2，或y为-o-的化合物，在经皮药物吸收率上获得了优异的效果；而即使是在n＝6，也在绝大多数的
–r′
，例如二乙基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、双(2-甲氧基乙基)氨基或4-甲基哌嗪基，在药物吸收率，例如是经皮药物
吸收率上获得了优异的效果。
[0318]
药效作用研究
[0319]
采用单次涂抹给药方式考察式(a2)化合物对sd大鼠被动皮肤过敏反应(pca)的影响。
[0320]
药物制备
[0321]
卵白蛋白和弗氏完全佐剂混合乳液：准确称取250mg卵白蛋白粉末于容量瓶中，定容至25ml的无菌水搅拌溶解，再加入25ml完全弗氏佐剂涡旋至乳液状。
[0322]
伊文思蓝染料和卵白蛋白混合液：准确称取250mg卵白蛋白粉末于容量瓶中，定容至25ml的无菌水搅拌溶解，再加入25ml的1％伊文思蓝染料涡旋混匀。
[0323]
氯雷他定药物(阳)配制：精密称取氯雷他定7mg，加入生理盐水14ml，稀释至终浓度为0.5mg/ml。
[0324]
式(a2)化合物药物(供试品)配制：精密称取式(a2)化合物7mg，加入生理盐水7ml，稀释至终浓度为1mg/ml。
[0325]
致敏血清制备
[0326]
13只雄性sd适应期结束后，隔日腹腔注射给予卵白蛋白和弗氏完全佐剂混合乳液，每只5.0mg卵白蛋白，给药体积为每只1ml(含卵白蛋白0.5ml，弗氏完全佐剂0.5ml)，共致敏3次。于末次致敏后12天采血制备致敏血清。
[0327]
大鼠被动皮肤过敏反应预实验
[0328]
取6只雄性sd大鼠进行预实验，背部剔除毛发后分别皮内注射梯度稀释(1倍、1/4倍和1/16倍)的致敏血清0.1ml。0.5小时和1小时后静脉注射给予与致敏剂量相同的卵白蛋白(5.0mg)加等体积的1％伊文思蓝染料共1ml。激发注射30分钟后安乐处死大鼠，取测量皮肤的蓝斑点，直径》5mm者为阳性。
[0329]
结果如图20所示，大鼠经皮下分别注射浓度为1倍(图20中“1∶0”)、1/4倍(图20中“1∶4”)和1/16倍(图20中“1∶16”)的致敏血清0.5小时和1小时后再尾注射卵白蛋白和1％伊文思蓝染料0.5小时后，背部出现明显蓝斑点，与对照组相比，1∶16浓度致敏血清刺激下的蓝斑点直径小于5mm，而1倍和1/4倍浓度致敏血清刺激下的蓝斑点直径均大于5mm，分别为9.92
±
0.32mm和7.33
±
0.44mm；此外，致敏血清致敏0.5小时和1小时，蓝斑点直径无显著差异。
[0330]
在正式实验中，选取1倍和1/4倍浓度致敏血清对sd大鼠进行致敏刺激0.5小时后注射卵白蛋白和1％伊文思蓝溶液1ml，构建大鼠被动皮肤过敏模型。
[0331]
式(a2)化合物对大鼠被动皮肤过敏反应的影响
[0332]
取24只雄性sd大鼠，随机分为4组，分别为空白组、模型组、氯雷他定组(阳组)和式(a2)化合物组(供试品组)，如表3所示。
[0333]
表3
[0334]
[0335]
其中氯雷他定组于激发前2小时灌胃给予5mg/kg氯雷他定，式(a2)化合物组于激发前2小时局部涂抹给予1.0mg/只式(a2)化合物。背部剔除毛发后分别皮内注射梯度稀释(1倍和1/4倍)的致敏血清0.1ml。0.5小时后静脉注射给予与致敏剂量相同的卵白蛋白(5.0mg)加等体积的1％伊文思蓝染料共1ml。激发注射0.5小时后测量皮肤的蓝斑点，
[0336]
计算各组蓝斑点直径。比较式(a2)化合物组和模型组是否存在统计学的显著性差异。
[0337]
图21a至图21d分别示出空白组、模型组、氯雷他定组、式(a2)化合物组中，小鼠背部出现或未出现蓝斑点的图。
[0338]
如图21a所示，空白组sd大鼠背部皮下并未出现蓝斑点。
[0339]
如图21b所示，sd大鼠背部皮下分别注射浓度为1倍和1/4倍的致敏血清0.5小时后再尾静脉注射卵白蛋白和1％伊文思蓝染料0.5小时后背部出现明显蓝斑点，直径分别为9.92
±
0.32mm和7.33
±
0.44mm，表明大鼠被动皮肤过敏模型构建成功。
[0340]
如图21c所示，氯雷他定经致敏前2小时灌胃给药后造模，蓝斑点直径分别为8.83
±
0.44mm和7.09
±
0.64mm，与模型组比较，氯雷他定组1倍浓度致敏血清刺激下的蓝斑点直径呈显著减少(p《0.01)，而氯雷他定组1/4倍浓度致敏血清刺激下的蓝斑点直径虽然也减少，但无统计学的显著性差异。
[0341]
如图21d所示，式(a2)化合物经致敏前2小时局部涂抹给药后造模，蓝斑点直径分别为7.61
±
0.63mm和6.45
±
0.70mm，与模型组比较，1倍和1/4倍的致敏血清刺激下的蓝斑点直径均显著减少(p《0.01、p《0.01)。此外，式(a2)化合物组在1倍浓度血清致敏下的蓝斑点直径显著低于氯雷他定组。
[0342]
各组大鼠单次给药背部致敏后蓝斑点直径如表4。
[0343]
表4
[0344][0345]
##
p《0.01vs.空白组；
*
p《0.05vs.模型组，
**
p《0.01vs.模型组；氯雷他定组：5mg/kg
[0346]
结论：于致敏血清刺激sd大鼠前2h灌胃给予剂量5mg/kg氯雷他定可明显改善大鼠被动皮肤过敏反应；式(a2)化合物于致敏血清刺激前2h局部涂抹给药可显著改善大鼠被动皮肤过敏反应，且效果优于氯雷他定。
[0347]
上述实施方式仅为本技术的优选实施方式，不能以此来限定本技术保护的范围，本领域的技术人员在本技术的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本技术所要求保护的范围。

技术特征：

1.一种化合物，其特征在于，为式(a)化合物，其中，所述
–
r选自由
–
r
′
和
–
y
–
(ch2)
–
r
′
所组成的组中的至少一个；所述y选自由o和nh所组成的组中的至少一个，且所述n选自由1、2、3、4、5、和6所组成的组中的至少一个；且所述
–
r
′
选自由二乙基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、n-吗啉基、双(2-甲氧基乙基)氨基、和4-甲基哌嗪基所组成的组中的至少一个。2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述
–
r为
–
y
–
(ch2)
–
r
′
；优选地，所述式(a)化合物选自由式(a1)至式(a72)化合物所组成的组中的至少一种：
优选地，所述n选自1至5；优选地，所述n选自1至4；优选地，所述n选自1至3；优选地，所述n为1或2；优选地，所述y为o；优选地，所述y为nh；优选地，所述
–
r
′
为二乙基氨基；优选地，所述
–
r
′
为吡咯烷基；优选地，所述
–
r
′
为哌嗪基；优选地，所述
–
r
′
为n-吗啉基；优选地，所述
–
r
′
为双(2-甲氧基乙基)氨基；优选地，所述
–
r
′
为4-甲基哌嗪基。3.如权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，所述y为o；且/或
所述n选自1至5，优选地选自1至4，优选地选自1至3，优选地为1或2；且/或所述
–
r
′
选自由二乙基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、双(2-甲氧基乙基)氨基、和4-甲基哌嗪基所组成的组中的至少一个。4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述
–
r为所述
–
r
′
；优选地，所述式(a)化合物选自由式(a73)至式(a78)化合物所组成的组中的至少一种，优选地，所述
–
r
′
为二乙基氨基；优选地，所述
–
r
′
为吡咯烷基；优选地，所述
–
r
′
为哌嗪基；优选地，所述
–
r
′
为n-吗啉基；优选地，所述
–
r
′
为双(2-甲氧基乙基)氨基；优选地，所述
–
r
′
为4-甲基哌嗪基。5.一种合成权利要求1至4中任一所述的化合物的方法，其特征在于，包括：将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，得到式(b)化合物；以及将式(b)化合物与化合物h
–
r
′
接触，其中，所述x选自cl和br中的至少一个；优选地，所述的将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在碱性环境下；优选地，所述的将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在n,n-二异丙基乙基胺、三乙胺和2,2,6,6-四甲基中的至少一个存在下；
优选地，所述的将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是以二氯甲烷作为溶剂；优选地，所述的将地氯雷他定与x(ch2)yc(＝o)cl接触，是在0℃至20℃的温度中；优选地，所述的将式(b)化合物与化合物h
–
r
′
接触，是在碱性环境下；优选地，所述的将式(b)化合物与化合物h
–
r
′
接触，是在碳酸钾与碘化钾的存在下；优选地，所述的将式(b)化合物与化合物h
–
r
′
接触，是以乙腈作为溶剂；优选地，所述的将式(b)化合物与化合物h
–
r
′
接触，是在50℃至80℃的温度中。6.一种合成权利要求1至4中任一所述的化合物的方法，其特征在于，包括：以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，得到式(a)化合物；优选地，所述
–
r为
–
y
–
(ch2)
–
r
′
且所述y为o，且所述的以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以化合物h
–
r与n,n
′‑
羰基二咪唑接触，得到第一化合物；以及将所述第一化合物与地氯雷他定接触，优选地，所述第一化合物包括式(ca)化合物或由其组成，优选地，所述
–
r为
–
y
–
(ch2)
–
r
′
且所述y为nh，且所述的以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以化合物h
–
r与光气和/或三光气接触，得到第二化合物；以及将所述第二化合物与地氯雷他定接触，优选地，所述第二化合物包括式(cb)化合物或由其组成，优选地，所述
–
r为
–
r
′
，且所述的以化合物h
–
r和地氯雷他定为反应物反应，包括：以地氯雷他定与氯甲酸对硝基苄酯、n,n
′‑
羰基二咪唑和/或三光气接触，得到第三化合物；以及将第三化合物与化合物h
–
r接触，优选地，所述第三化合物包括式(cc)化合物或由其组成，7.如权利要求1至4中任一所述的化合物，其特征在于，由权利要求5至6中任一所述的方法所制备而成。8.式(b)化合物或化合物h
–
r在制备权利要求1至4中任一所述的化合物中的用途。9.如权利要求1至4中任一所述的化合物在制备缓解或或预防过敏及其相关症状的药物的用途。10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述过敏选自皮肤过敏反应、异位性皮肤炎、荨麻疹、湿疹、鼻炎和气喘所组成的组中的至少一种；且/或所述药物的剂型为选自喷剂、贴剂、敷料、凝胶、注射剂、口服药物所组成的组中的至少
一种。