赵珊;张聪;冯俊彦;李曦;雷欣宇;仲伶俐;周虹;黄世;罗玲;谭文芳
【摘 要】This study aimed to establish methods for determining polysaccharide content in sweet potato and compare the possibility and difference by that of phenol-sulfuric acid method and anthrone-sulfuric acid method.The content of polysaccharides in leaf,petiole and stem of 15 vegetable-used sweet potatoes and 2 ordinary sweet potatoes were determined,which provided the theoretical basis for breeding.The extraction condition of polysaccharides from sweet potato leaf,petiole and stem was optimized,and the best boiling water bath was 2 hours.Chromogenic conditions and the methodology of phenol-sulfuric acid method and anthrone-sulfurie acid method on the determination of polysaccharides from sweet potato leaf,petiole and stem were studied.The detection wavelengths of phenol-sulfuric acid method and anthrone-sulfuric acid were 486,625 nm,respectively.The results showed that the phenol-sulfuric acid method was better than the anthrone-sulfuric acid method of stability and accuracy.The results of polysaccharide content from sweet potato le
af,petiole and stem by phenol-sulfuric acid method were 3.00％-4.69％,2.34％-4.21％,and 1.98％-3.63％,respectively,and that of anthrone-sulfuric acid were leaf 1.11％-2.52％,petiole 1.37％-2.85％,stem 1.26％-2.69％.Comparing with the results of previous studies,it is speculated that the anthrone-sulfuric acid method is more suitable for the purified sample on determination of polysaccharides from sweet potato.%利用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法对15份菜用甘薯和2份鲜食甘薯材料的叶片、叶柄和茎的多糖含量进行测定,并对2种方法进行了比较,进一步优化了甘薯茎叶多糖的提取方法,确定了最佳沸水浴时间为2h,同时通过显条件和方法学研究,确定了苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法的最适检测波长分别为486,625 nm.结果表明,苯酚-硫酸法在稳定性和准确性上均优于蒽酮-硫酸法;采用苯酚-硫酸法对17份甘薯多糖含量测定结果为:叶片3.00％～ 4.69％,叶柄2.34％～4.21％,茎1.98％～3.63％;采用蒽酮-硫酸法测定结果为:叶片1.11％～2.52％,叶柄1.37％～2.85％,茎1.26％～2.69％.与前人的研究结果进行比较分析,推测蒽酮-硫酸法测定甘薯茎叶多糖更适用于提纯去除杂质后的样品.
【年(卷),期】2018(046)002
【总页数】6页(P182-186,206)
【关键词】甘薯;多糖;苯酚-硫酸法;蒽酮-硫酸法
【作 者】赵珊;张聪;冯俊彦;李曦;雷欣宇;仲伶俐;周虹;黄世;罗玲;谭文芳
【作者单位】四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院生物技术核技术研究所,四川成都610061;四川省农业科学院生物技术核技术研究所,四川成都610061;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院分析测试中心,四川成都610066;四川省农业科学院作物研究所,四川成都610066 【正文语种】中 文
【中图分类】S531
多糖又称多聚糖，是由10个以上结构相同或不同的单糖以糖苷键结合而成的高分子化合物，
广泛存在于高等植物、藻类、微生物及动物体内。随着近年来对多糖及其复合物研究的不断深入，其具有的抗肿瘤、消炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗衰老、抗凝血、免疫调节等方面的活性功能逐渐被发现[1-5]。
甘薯（Ipomoea batatas（L.）Lam.）是我国重要的粮食、饲料、工业原料和生物质能源作物，是世界第七大粮食作物[6]。菜用甘薯是指以甘薯嫩梢或叶柄作为食用部位的一种蔬菜专用型甘薯新品种，其茎尖中富含蛋白质、膳食纤维、多糖、黄酮、多酚类物质、多种维生素以及矿物质，保健功效显著[7]。甘薯多糖目前研究主要集中在多糖的提取、组分分析和生物活性等方面。甘薯多糖是甘薯中重要的活性物质，具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、调节免疫、降血压等生物活性[8]。
目前，常用的多糖含量测定方法有苯酚-硫酸法[9-14]和蒽酮-硫酸法[15-17]。本试验比较了苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法在甘薯茎叶多糖测定中的测定效果，为建立准确、可靠、重现性好的甘薯茎叶多糖含量测定方法提供依据；同时比较了15份菜用甘薯和2份鲜食甘薯材料中叶片、叶柄和茎的多糖含量，旨在为多糖的提取应用和甘薯育种提供理论依据。聚丙烯管材
1 材料和方法
1.1 材料和试剂
供试15份菜用甘薯品种和2份鲜食甘薯品种分别由四川省农业科学院作物研究所和四川省农业科学院生物技术核技术研究所提供。材料栽种于2017年4月，采集于2017年7月。具体材料选育和来源信息如表1所示。
葡萄糖（≥98%，sigma），无水乙醇、蒽酮、苯酚、浓硫酸均为国产分析纯。
表1 材料名称及来源信息编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 11 12 13 14 15 16 17材料（品种）名称广菜薯2号广菜薯3号广菜薯5号广菜薯6号福菜薯18号福菜薯22号福菜薯23号福薯7-6台农71泉薯830川菜薯211渝菜1号遂宁菜薯5号菜薯2-190川薯294坦桑尼亚材料来源广东省农业科学院广东省农业科学院广东省农业科学院广东省农业科学院福建省农业科学院福建省农业科学院福建省农业科学院福建省农业科学院台湾农科所福建省泉州市农业科学研究所四川省农业科学院重庆市甘薯研究中心四川收集四川收集四川收集四川省农业科学院坦桑尼亚
1.2 仪器与设备
紫外-可见分光光度计（UV2550，日本岛津）；超声提取器；水浴锅；电热鼓风干燥箱；十万分之一电子天平；实验室纯水仪。
1.3 试验方法
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1.3.1 样品的提取 将新鲜的甘薯地上部分茎叶按叶、叶柄、茎分别取下，在50℃下烘干后粉碎过20 mm筛备用。称取0.50 g样品于50 mL具塞离心管中，用5 mL水浸润样品，再缓慢加入20 mL无水乙醇，同时使用涡旋振荡器混合均匀，置于超声提取器中超声30 min，提取后离心去掉上清液。不溶物用10 mL 80%乙醇再洗涤一次，用50 mL蒸馏水将上述不溶物转移到250 mL具塞三角瓶中，于沸水浴中提取2 h。之后冷却至室温，转移至100 mL容量瓶中并用蒸馏水定容。过滤后的滤液为样品测定液。
1.3.2 标准溶液的配制 称取0.100 0 g 105℃干燥4 h的葡萄糖于100 mL烧杯中，加水溶解定容至1 000 mL，即配成100 mg/L的标准葡萄糖储备溶液。
美国柯达公司1.3.3 苯酚-硫酸法显反应
1.3.3.1 标准曲线 分别吸取0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL标准葡萄糖储备液于10
mL比管中，用蒸馏水补至1.0 mL。加入1.0 mL5%苯酚溶液，然后快速加入5.0 mL硫酸，充分混匀后于30℃水浴中反应20 min，在486 nm处测定吸光度，以葡萄糖质量浓度为横坐标、吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
1.3.3.2 样品测定 吸取0.20 mL样品溶液于10 mL比管中，用蒸馏水补至1.0 mL。加入1.0 mL5%苯酚溶液，然后快速加入5.0 mL硫酸，充分混匀后于30℃水浴中反应20 min，在486 nm处测定吸光度。
1.3.4 蒽酮-硫酸法显反应
健康之路杂志
给据邮件1.3.4.1 蒽酮试剂配制 称取0.10 g蒽酮，用100 mL 80%浓硫酸溶解，现配现用。
还我至尊1.3.4.2 标准曲线 分别吸取0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL标准葡萄糖储备液于10 mL比管中，用蒸馏水补至1.0mL。立即加入蒽酮试剂6.0mL，振荡混匀后置于沸水浴中加热15 min，然后迅速置于冰水浴中冷却15 min，在625 nm处测定吸光度，以葡萄糖质量浓度为横坐标、吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
1.3.4.3 样品测定 吸取0.20 mL样品溶液于10 mL比管中，用蒸馏水补至1.0 mL。立即加
入蒽酮试剂6.0 mL，振荡混匀后置于沸水浴中加热15 min，然后迅速置于冰水浴中冷却15 min，在625 nm处测定吸光度。
2 结果与分析
2.1 甘薯茎叶沸水浴时间的确定
选取甘薯叶在沸水浴时，分别做4组样品，每组3 个平行，4 组沸水浴时间分别为 0.5，1，2，3 h。提取的甘薯叶多糖用苯酚-硫酸法测定平均含量分别为2.23%，2.67%，3.39%和3.30%（图1）。从图1可以看出，沸水浴时间2 h时，甘薯叶多糖的含量最高。
