退火温度:这与你要PCR的模板DNA有关，不同的模板有不同的最适退火温度。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55C到70C。退火温度一般设定比引物的Tm低5'C。. 一.所用试剂
1.0.01MPBS缓冲液,PH7.4;高压灭菌，40C保存。临用前-200C放置30分钟，确保冰冷。 英德市卫生局2.焦碳酸:二乙酯(DEPC):sigma公司，40C保存。
option603.0.1%DEPC处理的灭菌去离子水:100ml去离子水中加入0.1mIDEPC,剧烈振荡混匀，让DEPC充分进入溶液中，370C放置过夜，高压燕汽灭菌30分钟除去DEPC.40C保存。 4.单相细胞裂解试剂TRizoL:Invitrogen生命技术公司，40C保存。临用前-200C放置30分钟，确保冰冷。
5.氯仿:用新开封的，10ml分装，40C保存。临用前一200C放置30分钟，确保冰冷。
6.异丙醇:用新开封的，20ml分装，40C保存。临用前一200C放置30分钟，确保冰冷。
7.0.1%DEPC处理的75%乙醉:无水乙醇75ml加0.1%DEPC处理的灭菌去离子水至100ml,4C保存。临用前一200C放置30分钟，确保冰冷。
8.cDNA反转录试剂盒:MBI公司，-200C保存。
9.2xPCR试剂:MBI公司，-200C保存。
宁夏大学图书馆10.5xTBE RNA电泳缓冲液:因为Tris碱可与DEPC发生反应并使之失活，所以含Tris碱的电泳缓冲液可用DEPC处理的灭菌去离子水配制，0.22um滤器过滤除菌。室温保存，临用前用DEPC处理的灭菌去离子水10倍稀释。使用本室RNA专用电泳槽，每次需配制0.5x电泳缓冲液500ml.
g革命>太阳影子定位11.50xTAE DNA电泳缓冲液:室温保存，临用前用去离子水50倍稀释。使用本室DNA专用电泳槽。每次需配制1x电泳缓冲液1000ml.
游离雌三醇
