在专门的引物设计软件中,“Oligo”是最著名的。Oligo功能很强⼤，它的使⽤并不⼗分复杂，我们可以⽤Oligo对设计的引物进⾏评价，下⾯介绍⼀下使⽤⽅法：操作步骤 安装oligo
打开oligo软件
打开要设计引物的序列
灯影组
出现三个窗⼝，分别是△G、Tm和Frq
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点击下⾯的最右边按钮输⼊上游引物起始位置
点击OK，再点击upper，注意不要拖动拉条点击change，填⼊引物长度，同样不要拖动窗⼝，点击upper
针对lower进⾏同样操作。点击选择引物
给出了Tm值、△G值和3’端的△G值，其中3’端的△G值的绝对值不能⼤于9，⾼于9会形成双链结构。
中国早期政治制度的特点
点击⼆聚体情况，可以选择上下游引物⾃⾝间及两者间的聚合情况，避免形成⼆聚体，结合碱基不要超过3个，△G的绝对值不要⼤于4.5kcal/mol
可见是合格的
分析第三项发卡结构，同样结合碱基不要超过3个，△G的绝对值不要⼤于4.5kcal/mol
也是合格的
分析Tm值
GC含量要在40-60%间，第三个Tm值要在50-70℃
288uu分析错配位点
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正确位点引发效率最好在400以上，错配位点最好要低于100。 Positive strand（红⾊的）就是错配位点，negative strand（蓝⾊的）就是正确位点。
分析pcr
给出了退⽕温度的范围，假如没有不良的评价，则可以⽤
强度理论
可以打印评价的结果
好了，以上就是使⽤Oligo对设计的引物进⾏评价的操作，希望对你有所帮助。如果操作有什么问题欢迎评论区留⾔讨论。
