Systematic evolution of ligands by exponential enrichment
指数式富集的配体系统进化
一种新的组合化学技术
它是应用大容量的随机寡核苷酸，并结合PCR体外扩增技术，以指数级富集与靶分子特异结合的寡核苷酸，经几轮或数轮的筛选过程，获得高亲和力，高特异性的核酸配基。 寡核苷酸配基的特点
1.靶分子广
2.高特异性，高亲和力
应用系统集成
适配子的筛选：一个文库技术；一套筛选技术。
SELEX技术的基本技术路线
1.体外合成一个单链寡核苷酸库。
2.把它与靶物质混合，形成靶物质-核酸的复合物，洗掉未与靶物质结合的核酸。分离与靶物质结合的核酸分子，以此核酸分子为模板进行PCR扩增，在进行下轮的筛选过程。
3.通过重复的筛选与扩增，一些与靶物质不结合或与靶物质有低亲和力，中亲和力的DNA或RNA分子被洗去。而称之为“适配子”的，与靶物质有高亲和力的DNA或RNA分子从非常大的随机库中分离出来，且纯度随SELEX过程的进行而增高，从pmol到nmol，有的甚至到umol，最后占据库的大多数（90%左右）。
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4.在每轮筛选的同时，设立平行的结合力检测实验，随着筛选轮数的增加，Kd值逐渐降低，即亲和力逐渐增强。当亲和力提高两个数量级时，将该轮的PCR产物克隆至载体，随机挑选十个克隆，测序。
影响SELEX技术的因素
一．文库设计
（一）文库的种类
（二）两端的固定序列
（三）中间的随机序列
二．筛选条件
（一）靶蛋白浓度
（二）循环次数
（三）配基的分离方法
（四）SELEX技术的改进
文库的种类
1.随机RNA文库
2.随机ssDNA文库
3.化学修饰库
随机单链DNA文库
1.双链DNA模板变性
2.生物素末端标记
3.不对称PCR
4.反转录法
SELEX技术的改进
1.导向SELEX
2.基因组SELEX
3.复合靶分子SELEX
4.消减SELEX
导向SELEX
是将已知占据靶分子非目的靶位的小分子渗入SELEX筛选体系中，来获得只与目的靶位结合，高度专一的配体。
用这类配体制成药物，将具有靶向专一，用药剂量小，毒副作用小等优点。
基因组SELEX
为了可以广泛筛选DNA或RNA天然配基，在经典SELEX技术的基础上，将感兴趣的生物体的基因组制备成一个寡核苷酸文库，从中筛选蛋白质，抗生素，辅因子，多糖等生物活性分子的天然识别序列。为解析细胞内基因调控，代谢调控的问题提供大量的数据材料。
复合靶分子SELEX
特点：
1.筛选的靶不是单一的纯蛋白或小分子，而是多种靶分子的混合物。
2.筛选中将各靶分子的特异配体分离后再进行PCR扩增，循环富集。
斗鱼杨博消减SELEX
是一种特殊的复合靶分子SELEX，相当于一种适当反筛选实验。即用两种不同靶分子，通过同一寡核苷酸库筛选，可获得识别两种混合体之间的差异寡核苷酸配基。
RNAi的特点：
氟化钙1.转录后水平的基因沉默
2.较高的特异性
3.承德七中高效性
4.可遗传性及远距离效应
