1.目的
验证培养基是否满足培养性能的要求。
2.原理
培养基根据其用途主要分为两种：选择性培养基和非选择性培养基。选择性培养基包含能够抑制某些微生物生长的抗生素或化学试剂，非选择性培养基则不含抑制微生物生长的物质能够促进大多数微生物的生长。无论商品化培养基还是自配培养基都需要在使用前对培养基性能进行验证。 3.验证菌株：
标准菌株、能力验证/室间质评活动使用的菌株、从临床病人标本分离的具有稳定表型的菌株，均可用做验证菌株，实验室对其生化特征及鉴定结果应做好相关记录。
4.操作步骤
4.1. 直接接种法
4.1.1.根据SOP不同的标本类型选择不同培养基直接进行接种，置不同的环境下培养。观察细菌生长情况。注意：接种菌量过多或过少都将掩盖培养基的促进或抑制生长的特性，如果使用直接接种法时出现验证不合格，则改用标准化菌悬液进行验证。
4.2.标准化菌悬液法
4.2.1.较高浓度的菌悬液能够较好测试选择性培养基抑制特定微生物的生长能力。较低浓度的菌悬液则能够验证非选择性培养基充分支持细菌生长的能力。
4.3.菌悬液的准备
4.3.1.直接菌落法：使用培养18到24个小时的菌落，在0.85%无菌生理盐水中制成菌悬液，使其浊度达0.5麦氏浊度。 4.3.2.生长法：从24h培养物中接种3到5个菌落至无菌肉汤以制备菌悬液。孵育数小时使其浊度达0.5麦氏浊度。
4.4.接种
4.4.1.验证非选择性培养基：用无菌肉汤或生理盐水将0.5麦氏单位菌悬液进行1:100稀释，每个测试平板接种0.01ml悬浮液，均匀涂布。如果菌落过密，则可将菌液稀释1000倍后再接种。
4.4.2.验证选择性培养基：用无菌肉汤或生理盐水将0.5麦氏单位菌悬液进行1:10稀释，每个测试平板接种0.01ml悬浮液。如果菌落过密，则可将菌液稀释100倍后再接种。
4.5.验证培养管：用0.01ml未稀释的0.5麦氏单位菌悬液进行接种。
4.6.电炉软件培养温度、气体条件和培养时间按SOP规定执行。
5.验证结果
5.1.观察细菌生长情况（菌落种类、分区划线以及各区生长情况等）。
5.2.在选择培养基上菌株长势良好、菌落大小与预期相符、菌落形态典型，并且能够抑制特定微生物的生长，可判断性能符合要求，验证合格。
5.3.在非选择性培养基上菌株长势良好、菌落大小与预期相符、菌落形态典型，血培养基上的溶血类型符合，可判断非选择性培养基验证合格。
6.毒株支持文件
6.1.周庭银、王华梁.临床微生物检验标准化操作规程.1版.上海.上海科学技术出版社:2019。
6.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02-A005：医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2018。
6.3.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL028：临床微生物检验程序验证指南.2018
血平板验证标准操作程序
1.目的
规范血琼脂培养基的验收程序，保证培养基质量。
2.性能验证与质量控制
2.1.培养基外观良好（平滑、水分适宜、无污染、适当颜和厚度）
2.2.无菌试验：＜100块抽检5%，>100块随机取10块，35℃培养24～48h。
2.3.生长/生长抑制试验：（操作步骤详见《培养基验证程序》）
2.3.1.生长试验：
肺炎链球菌 | ATCC6305 | α溶血 |
| 中华虎凤蝶 金黄葡萄球菌 | ATCC25923 | β溶血 |
大肠埃希菌 | ATCC25922 | 生长良好 |
| | |
3.注意事项
填写《培养基配制及验收记录表》，验收合格方能投入使用。
4.荷电用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
5.支持文件
5.1.周庭银、王华梁.临床微生物检验标准化操作规程.1版.上海.上海科学技术出版社:2019。
5.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02-A005：医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2018。
mtp
巧克力平板验证标准操作程序
1.目的
规范巧克力琼脂培养基的验收程序，保证培养基质量。
2.性能验证与质量控制
2.1.新疆自贸区培养基外观良好（平滑、水分适宜、无污染、适当颜和厚度）
2.2.无菌试验：＜100块抽检5%，>100块随机取10块，35℃培养24～48h。
2.3.生长/生长抑制试验：（操作步骤详见《培养基验证程序》）
2.3.1.生长试验：流感嗜血杆菌ATCC49247。
2.3.2.生长抑制试验：金黄葡萄球菌ATCC25923不生长
3.注意事项
填写《培养基配制及验收记录表》，验收合格方能投入使用。
4.用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
5.支持文件
5.1.周庭银、王华梁.临床微生物检验标准化操作规程.1版.上海.上海科学技术出版社:2019。
5.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02-A005：医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2018。
