胰酶消化细胞的原理-纪录片 华尔街胰酶是一种蛋白酶。通过在特定位置上降解蛋白，使细胞间结合处蛋白降解，这时细胞由于自身内部细胞骨架的张力作用下成为球形，从而使细胞分开。 不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。 学术术语来源2012年浙江高考作文--- 改良简易法获取人退变椎间盘髓核细胞及生物学特点 文章亮点： 1 传统胰酶-胶原酶复合消化法不能添加血清或培养基，在数小时的消化过程中易损害消化下来的细胞，所获的细胞后续生物学性能差。 2 简易法通过去掉胰酶，单独运用胶原酶延长消化时间，克服了传统方法的缺点，但也带来了新的问题，如消化时间延长，获取的细胞数量率下降。 3 实验通过对简易法进行稍微改进，低速摇匀髓核组织使其充分与胶原酶接触充分，动态状态下有利于细胞从髓核组织游出，这样将消化时间缩短至传统方法的水平，而低速摇荡并不影响细胞的活性，获取的细胞数和细胞生长状态没有变化。 4 该方法简单易行，减少了操作工序，减少了实验操作的污染机会，并能达到要求的细胞数量，细胞活力良好，与常见的方法无差异。 勒纳指数关键词： 组织构建；软骨组织构建；髓核细胞；改良简易法；椎间盘；腰椎间盘突出症；细胞培养；细胞增殖；形态学；生物学性能；Ⅱ型胶原酶；细胞生长曲线；国家自然科学基金 摘要 背景：目前较常应用的原代髓核细胞培养方法，多应用Ⅱ型胶原酶联合胰酶消化法、单纯Ⅱ型胶原酶消化法等，但这些方法获取细胞数量偏少存在一定的缺限。 目的：利用改良简易传统的方法从人退变椎间盘获取髓核细胞。 方法：分离培养髓核细胞，每日倒置相差显微镜下观察髓核细胞形态，取原代和传代细胞培养悬液进行锥虫蓝细胞活性检测，分别于第1，3，5网站，7，9，11，13天采用MTT法测细胞生长情况，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。 结果与结论：成功分离出髓核细胞，成功传至P3代。原代细胞生长为梭形，P1及P2传代细胞形态多呈三角形或多角形，类似成纤维细胞形态，接近融合时呈铺路石样外观。锥虫蓝染细胞活力测定原代分离时活力为99%，第3代细胞活力稍下降为93%-95%。髓核细胞随着传代的次数的增加，增殖活性逐渐降低，刘彭芝P2代和P3代在对数生长期相对P1代也逐渐趋于平缓。激光共聚焦显微镜观察细胞形态与相差显微镜观察的结果相似。结果提示，改良简易法相对于传统方法能可靠地获取人退变椎间盘多种细胞且所获细胞表现出了良好的生物学性能。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程 | 