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盐溶液
pH 改革开放四十周年论文 | 4. 5 | 7 | 5. 5 | 3. 5 | 4. 5 | 5-6 | 罗辑课7 | 7 |
盐的溶
解度酷派n68/ g
( 20 ℃) | 75. 4 | 8. 6 | 25. 5 | 22. 3 | 192 | | | |
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（注：硫酸铵中常含有少量的重金属离子，对蛋白质巯基有敏感作用，使用前必须用H2S处理：将硫酸铵配成浓溶液，通入H2S饱和，放置过夜，用滤纸除去重金属离子，浓缩结晶，100℃烘干后使用。另外，高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH） 1.使蛋白质盐析还与溶液酸碱度有关,即在蛋白质盐析时加一定量的酸或碱溶液可能会对盐析有促进作用 。 涡流纺
2.磷酸不是强酸,并且分子较大,又能与一些氨基酸分子中的羟基结合为酯,因此磷酸不会使蛋白质变性。所以磷酸可以作为蛋白质盐析时的酸性试剂（蛋白液pH ≤ 3.5）。配置4M的磷酸。
3.加热凝固。将接近于等电点附近的蛋白质溶液加热，可使蛋白质发生凝固(coagulation)而沉淀。加热首先是加热使蛋白质变性，有规则的肽链结构被打开呈松散状不规则的结构，分子的不对称性增加，疏水基团暴露，进而凝聚成凝胶状的蛋白块。 盐析影响因素
1． 蛋白质的浓度：
中性盐沉淀蛋白质时，溶液中蛋白质的实际浓度对分离的效果有较大的影响。通常高浓度的蛋白质用稍低的硫酸铵饱和度即可将其沉淀下来，但若蛋白质浓度过高，则易产生各种蛋白质的共沉淀作用，除杂蛋白的效果会明显下降。对低浓度的蛋白质，要使用更大的硫酸铵饱和度，但共沉淀作用小，分离纯化效果较好，但回收率会降低。通常认为比较适中的蛋白质浓度是2.5％～3.0％，相当于25 mg/mL～30mg/mL。
2． 离子强度:
各种蛋白质的沉淀要求不同的离子强度。
3． 盐的性质：
最有效的盐是多电荷阴离子。
4． PH值：
一般说来，蛋白质所带净电荷越多，它的溶解度就越大。改变pH值可改变蛋白质的带电性质，因而就改变了蛋白质的溶解度。远离等电点处溶解度大，在等电点处溶解度小，因此用中性盐沉淀蛋白质时，pH值常选在该蛋白质的等电点附近。
5． 温度：
除对温度敏感的蛋白质在低温（4度）操作外，一般可在室温中进行。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质（如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白）在较高的温度（25度）比0度时溶解度低，更容易盐析。
6． 蛋白质沉淀后宜在4℃放3小时以上或过夜，以形成较大沉淀而易于分离。盐析时，分子量较小的蛋白质逐步沉淀下来可能就值得怀疑。具体的蛋白需要具体的摸索，当然，对肽来说，结论也是一样的。
