甲基铝氧烷
党连生刘美玲刘少旋
（内蒙古包头医学院第一附属医院，内蒙古包头014010）
摘要目的：了解老年恶性肿瘤患者的细胞免疫功能状况，为肿瘤的及预防提供参考。方法：用流式细胞仪分别对肺癌、消化道肿瘤、乳腺癌患者及健康对照组外周血总T细胞、Th、Ts、Th/Ts细胞进行检测，用SPSS17．0软件对各组细胞的Th数值及Th/Ts比值进行统计学分析。结果：Th细胞数及Th/Ts比值在肺癌、消化道肿瘤以及乳腺癌患者均明显低于正常对照组（P＜0．05）。结论：老年恶性肿瘤患者的细胞免疫功能处于抑制状态。 王瓜根关键词老年恶性肿瘤；T细胞亚；流式细胞仪
The Detection and Significance of T lymphocyte in the Peripheral Blood
of Elderly Patients with Malignant Tumor
DANG Liansheng，LIU Meiling，LIU Shaoxuan
（Department of Geratology，the First Affiliated Hospital of Baotou Medical College，Baotou014010，China）Abstract Objective：To analyze the status of cellular immune function in elderly patients with malignant tumors so as to provide a reference for tumor therapy．Methods：Flow cytometry was used to detect peripheral blood T（TT），Th，Ts and Th/Ts cells，respectively，in patients with lung cancer，gastrointestinal cancer and breast cancer and healthy controls，with Th count and the ratio of Th/Ts in each group analyzed by SPSS17．0．Ｒesults：The count of Th cells and the ratio of Th/Ts in patients with lung cancer，gastrointestinal cancer and breast cancer were significantly lower than those in the control group（P＜0．05）．Conclusion：Cellular immune function in elderly patients with malignant tumors is in the state of suppression．Key words Malignant tumor；T－cell subsets；Flow cytometry
恶性肿瘤是影响老年人生命和健康最重要的因素之一。65岁以上人最易患癌症，对老年人的身体健康构成严重威胁［1］。综合分析导致老年恶性肿瘤的危险因素有如下几种［2，3］：（1）致癌因子的累积作用：如吸烟、饮酒、饮食、肥胖、环境污染、性别、情绪及睡眠等因素；（2）免疫功能下降；（3）组织细胞易感性的增高。本文着重探讨老年恶性肿瘤与细胞免疫的相关性，旨在了解老年恶性肿瘤患者的免疫功能状况，为肿瘤患者临床及判断预后提供科学依据。
1材料与方法
1．1研究对象60例恶性肿瘤患者均为来我院住院的病人，经临床或病理确诊为老年恶性肿瘤患者，均未接受过放化疗。其中男性34例，女性26例，年龄65 89岁，平均年龄70．6岁；肿瘤组60例中肺癌28例，消化道肿瘤21例，乳腺癌11例。同时选取来本院体检中心做体检的60例健康老年人为正常对照组，其中男性32例，女性28例，年龄65 82岁，平均年龄66．5岁。
1．2试剂与仪器SimulTESTIMK－lymphocyte试剂盒购自美国BD公司，检测仪器为美国BD公司的FACS－Calibur流式细胞仪。
1．3标本采集与检测所有研究对象抽取外周静脉血2mL，用PE荧光标记的单克隆抗体20μL，加入EDTA抗凝血100μL发生抗原抗体反应，溶血剂2mL 破坏红细胞，磷酸盐缓冲液洗涤，固定液固定后用流式细胞仪检测外周血白细胞分化抗原3（cluster differen-tiation－3，CD3）阳性T淋巴细胞、CD3和CD4双阳性的T淋巴细胞、CD3和CD8都是阳性的T淋巴细胞。1．4统计学处理计量资料以xʃs表示，采用SPSS 17．0统计学软件，用t检验进行统计学分析。
2结果
肺癌患者总（CD3）阳性T细胞低于正常组（P＜0．05），消化道肿瘤以及乳腺癌患者总T细胞与正常组比较无明显变化。但CD4+细胞、CD4+/CD8+比值在肺癌、消化道肿瘤以及乳腺癌患者中均明显低于正常对照组（P＜0．05），仅肺癌患者Ts的CD8+细胞升高（P＜0．05）。总CD3+T细胞、CD3
和CD4双阳性T淋巴细胞、CD3和CD8双阳性T淋巴细胞，
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2014年第30卷第5期Vol．30No.52014包头医学院学报Journal of Baotou Medical College
CD4+/CD8+比值在各肿瘤组之间比较无明显统计学意义（P＞0．05），见表1。
表1肿瘤患者T细胞亚与对照组比较（xʃs）
组别例数
TT
（CD3+）（%）
Th
（CD4+）（%）
Ts
（CD8+）（%）
Th/Ts
（CD4+/CD8+）
对照组6074．46ʃ11．1240．44ʃ7．2121．28ʃ5．372．08ʃ0．84
肺癌2868．07ʃ9．6*31．28ʃ6．55*32．42ʃ6．48*0．96ʃ0．33*消化道肿瘤2170．99ʃ11．4731．56ʃ5．88*23．42ʃ4．941．18ʃ0．62*
乳腺癌1172．53ʃ10．4832．45ʃ6．91*22．39ʃ5．961．25ʃ0．59* *与正常组比较，P＜0．05
3讨论
肿瘤是在各种内外致癌因素共同作用下，机体自身细胞发生恶变转化而成。肿瘤的发生、发展与人体的免疫功能密切相关，尤其是T细胞介导的细胞免疫，在肿瘤免疫中占重要地位［4］。随着对肿瘤免疫机制的了解和肿瘤免疫的应用，越来越多的细胞免疫检测指标被用来监测肿瘤的发生、发展和判断效果及预后，目前应用最多的是T细胞亚的测定。
火成岩岩石学
免疫老化是指机体自然衰老过程中出现的免疫系统增龄性老化改变。胸腺为中枢免疫器官，是产生幼稚T淋巴细胞的主要场所，对于机体的免疫功能起着决定性的作用。胸腺的慢性退化萎缩，被认为是增龄所致的免疫功能衰退的重要原因。T淋巴细胞是获得性免疫的主要组成成分，是机体介导细胞免疫的效应细胞，能对抗外源性病原微生物及内源性衰老细胞的毒害作用，维持机体内环境的稳态。T淋巴细胞在免疫老化的过程中，受自身及外界环境的影响会发生表型、功能及信号转导通路的改变，影响T淋巴细胞免疫效应功能的正常发挥，是导致老年人机体免疫功能异常和易患感染、肿瘤、自身免疫性疾病的重要原因。
T淋巴细胞在免疫调节、免疫监视及杀伤靶细胞方面具有极其重要的作用。CD3+代表成熟T淋巴细胞，即总T细胞。按其表面标志T细胞分为CD4+和CD8+两大亚，按功能不同分为辅助性T细胞（help T cell，Th）、细胞毒性T细胞（cytotoxic T cell，CTL或Tc）、抑制性T细胞（suppressor T cell，Ts）。CD4+T细胞主要是Th细胞，少数为CTL，其对抗体生成、巨噬细胞活化及CTL的活化有辅助、放大效应，并通过它们发挥作用。CD8+T细胞主要是Tc细胞。Ts能通过抑制细胞免疫功能来调节机体的免疫应答，正常状态下保持着一定的数量及活性水平，当发生肿瘤后，这类细胞数量显著增多，抑制机体对肿瘤的免疫效应，从而使肿瘤逃避机体的免疫监视，促进肿瘤的生长。近几年来国内外多项研究表明，癌症患者外周血T细胞亚有着明显的变化，表现为CD4+细胞减少，CD8+细胞（Ts和Tc）增多，CD4+/CD8+比值下降或倒置，这种变化随着肿瘤的进展愈加明显。其中的机理是肿
瘤通过表达、释放某种肿瘤抗原或其他可溶性免疫抑制因子，抑制淋巴细胞分化增殖，使得淋巴细胞表面CD4+抗原减少，CD8+细胞反应性增多，而增多的CD8+细胞可能是以抑制性T细胞为主，这反过来对CD4+细胞产生抑制作用，使得CD4+/CD8+比值下降［5］。
本研究选择未经放、化疗的初诊肿瘤患者作为研究对象，结果发现，肺癌患者细胞免疫功能发生了不同程度的异常，总T细胞、Th细胞、Th/Ts值均降低，Ts 细胞增高，提示恶性肿瘤患者存在明显的免疫抑制，也说明肿瘤患者普遍存在免疫功能低下，免疫细胞不能有效识别、排斥和杀灭肿瘤细胞，与国内研究报道一致［6］。其机理可能为肿瘤通过表达、释放某种肿瘤抗原或其他可溶性物质，诱导激活Ts细胞，从而参与机体的免疫抑制。而乳腺癌以及消化道肿瘤仅Th细胞、Th/Ts降低，总T细胞、Ts细胞差异不明显，可能与所选患者体不尽相同有关，提示Th细胞、Th/Ts可能较总T细胞、Ts细胞反应更灵敏，能更早地反映机体免疫状态。国内学者［7］研究发现肿瘤患者放、化疗或手术3周后，其外周血T、B、NK等淋巴细胞亚的数量及比值会随病情的好转而逐渐转归，完全缓解患者会逐渐升至正常水平，说明恶性肿瘤患者，外周血淋巴细胞亚的细胞数及比值的变化，对指导恶性肿瘤的和疗效观察有一定临床意义。但对于老年肿瘤患者，多数已经失去手术及放疗、化疗机会。有学者［8］报道早期（I Ⅱ期）的肿瘤患者免疫功能异常并不明显，其TT、Th、Ts、Th/Ts与正常组比较差异不明显，而晚期（Ⅲ Ⅳ期）肿瘤患者细胞免疫明显抑制，提示随着疾病进展机体免疫功能逐渐降低。在病理学分期为Ⅱ期或Ⅲ期患者，5年生存率分别为66．6%和18．2%（P＜0．05）［8］。所以，对于只能保守的老年肿瘤患者，免疫功能程度的检测对预后的价值意义更大。
本研究结果表明：恶性肿瘤患者主要存在细胞免疫功能的改变和紊乱，主要表现在T淋巴细胞亚及NK细胞活性的降低；对淋巴细胞亚的测定，可判定机体免疫功能状况，对肿瘤病人进行辅助诊断、预后及对疾病的预防等，均具有重要的临床意义。目前研究表明，由于淋巴细胞具有高度特异性的蛋白/受体蛋白的相互作用，免疫疗法能够提供高度靶向［10］。激活或改造的免疫细胞能移动到癌组织，并在其中引发
（下转第41页）
83包头医学院学报Vol．30No.52014
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）（上接第38页）
持久的抗肿瘤免疫反应。随着老龄化社会的到来，我们期待着免疫疗法给广大肿瘤患者带来福音。
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