彭焱; 董爱文; 唐克华
【期刊名称】《《贵州农业科学》》
【年(卷),期】2019(047)008
英语统考
【总页数】5页(P124-128)
【关键词】白及; 密度; 生长时期; 栽培; 成分; 动态变化 【作 者】彭焱; 董爱文; 唐克华
【作者单位】吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室 湖南张家界427000; 张家界本草科技有限公司 湖南张家界427000
【正文语种】中 文
【中图分类】S567.23; R284.1
白及[Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.]为兰科(Orchidaceae)白及属(Bletilla)多年生草本植物，以干燥块茎(假鳞茎)入药。始载于汉代《神农本草经》，在我国已有两千多年药用历史，具有收敛止血、清热利湿、消肿生肌等功效[1]。现代研究表明，白及还具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、促进创面愈合、抗溃疡、美白保湿、抗氧化、延缓衰老等多种药理作用[2]。白及中含有多糖、脂类、黄酮类、多酚类、甾体、三萜、氨基酸以及少量的挥发油等活性成分[3]。糖类、蛋白质、氨基酸等初生代谢产物为植物的生存、生长、繁殖等提供必要的物质基础和能量[4]；黄酮、多酚、三萜等次生代谢产物的积累与植物胁迫的抵御、信号传导、生长发育调节等有关，且其含量受到遗传和环境等多种因素的影响[5]。 植物在生长过程中体内活性物质的含量受到外界环境、营养状况以及生理状态等诸多因素影响，表现出一定的波动规律，而且同种植物不同活性成分的动态规律可能不同，同种有效成分在不同植物中的动态规律也可能不同[6-7]。吴凤云等[8]研究指出，白及药材的品质、多糖、淀粉、蛋白质含量等与栽培年限、采收加工等有关。为探明张家界生态区白及适宜的栽培密度及采收时期，笔者等对白及药用部位(块茎)不同栽培密度、栽培年限及生长时期的多糖、淀粉、蛋白质、总酚以及总黄酮含量的变化趋势进行研究，以期为白及的栽培管理、采收及药材质量控制等提供科学指导。
1 材料与方法
1.1 试验区概况
试验于2017年5月至11月、2018年4月至10月期间，在湖南省张家界市武陵源区中湖乡进行。试验地海拔570 m，东经110°32′14″、北纬29°22′25″。试验地土壤pH 5.62，有机质31.3 g/kg，全氮1.85 g/kg，全磷0.34 g/kg，全钾20.3 g/kg，速效氮142.3 mg/kg，速效磷6.81 mg/kg，速效钾140 mg/kg。
2010广东高考数学1.2 试验材料
白及：幼苗为种子离体快繁苗，大棚驯化1年，大田栽培2 ～ 3年，栽培密度分为低密度和高密度，低密度为2万株/667 m2，高密度为4万株/667 m2。
1.3 试验方法
1.3.1 样本采集 样本的采样时间段为2017年5月至11月、2018年4月至10月，在不同栽培密度区域内按照S型路线每次随机挖取5个样点的新鲜白及，连同其须根附着的少量泥土一并带回实验室。具体采样时间见表1。
表1 白及样品的采集时间Table 1 Collection date of B.striata samples采样年份Sampling year 栽培年限Planting year采样时间/(月/日)Sampling date20172-5/16-7/98/189/21-11/13201834/15/26/17/38/49/610/7-
注：-代表此月份未采集样本。
Note:- means no collected samples in this month.
1.3.2 考察指标的测定
1) 根冠比。每批次样本挑选出大小基本一致的10～12株鲜白及单株，去除附着的泥沙，洗净、晾干表面水分，称重并记录数据，再分割单株白及的地下部与地上部，称重，计算二者比值。
根冠比
2) 折干率。每批次样本挑选出大小基本一致的10～12株鲜白及单株，去除附着的泥沙，洗净、晾干表面水分，将块茎部位65 ℃连续鼓风干燥5 d，得其干品，称重计算折干率。
折干率
3) 主要成分含量测定。主要成分含量测定的样品为折干率测定后的干燥白及块茎，粉碎，过30目筛，备用。淀粉含量采用酸水解法[9]进行测定。蛋白质含量采用考马斯亮蓝法进行测定[10]。
多糖含量的测定采用蒽酮-硫酸法[11]。精密称取105 ℃干燥至恒重的D(+)-无水葡萄糖10.0 mg，用超纯水定容至100 mL，得质量浓度为0.1 mg/mL的葡萄糖标准母液。量取0、1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL和10 mL于10 mL容量瓶中，超纯水定容至刻度，稀释成系列标准溶液。精密吸取系列标准液各1 mL于具塞试管中，加入0.2%硫酸-蒽酮溶液2.5 mL，混匀，沸水浴10 min，摇匀，迅速于冰水浴中静置冷却10 min。在625 nm处测定其吸光度。以葡萄糖质量浓度(mg/mL)为横坐标，吸光度值为纵坐标，进行线性回归，计算样品多糖含量。学缘结构
京唐港邮编总酚含量的测定采用Folin-酚比法[12]。精密称取没食子酸10.0 mg，无水乙醇溶解并定容至10 mL，取1 mL用无水乙醇稀释10倍，得质量浓度为0.1 mg/mL的没食子酸溶液。再取该稀释液0、1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL和10 mL于10 mL容量瓶中，超纯水定容
至刻度，配制成系列标准溶液，分别吸取配制好的系列标准液各0.1 mL于具塞试管中，加入0.5 mL的folin-酚试剂(1 mol/L)，黑暗条件下放置10 min，然后加入1 mol/L的Na2CO3 溶液2 mL，充分混匀。50℃水浴10 min，冷却后在770 nm处测定吸光度。以标准品没食子酸的质量浓度(mg/mL)为横坐标，吸光度为纵坐标，进行线性回归，计算样品总酚含量。
总黄酮含量的测定，采用NaNO2-AlNO3显法[13]。精确称取芦丁标准品10.0 mg，无水乙醇溶解并定容至10 mL，得质量浓度为1 mg/mL标准品母液。分别准确吸取标准液母液0、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL于10 mL容量瓶中，超纯水定容至刻度，配制成系列标准溶液。精密吸取系列标准溶液0.2 mL于具塞试管中，加5% NaNO2溶液0.2 mL，放置6 min。加10% AlNO3 溶液0.2 mL，混匀后放置6 min。加入4% NaOH溶液4 mL，混匀，放置10 min后，在508 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，标准品芦丁的质量浓度(mg/mL)为横坐标进行线性回归，计算样品总黄酮含量。
1.4 数据处理
采用Excel 2010进行数据处理，Origin9.1绘制图表。
2 结果与分析
2.1 不同生长时间及栽培密度白及的根冠比
白及的营养器官包括地上部的包茎叶与地下部的块茎及须根。每年4～7月为植株生长旺盛期，至每年的7月下旬之后，地上部的生长减缓，形态变化较小；在每年8月下旬后，植株开始倒苗，直到当年10月完全倒苗[14]。从图1可看出，白及根冠比具有周年变化规律性，不同栽培密度和年限下的白及根冠比周年变化趋势基本一致，即在4—10月的采样时间段内均呈快速增大趋势。包茎叶、块茎、须根构成了白及营养生长的整体功能系统，可通过控肥、控水等措施调控白及根茎叶的生长状态。
图1 不同栽培密度及栽培年限白及的根冠比
Fig.1 Root/shoot ratio of B.striata with different cultivation years under different cultivation density
2.2 不同生长时间及栽培密度白及的折干率
从图2可知，低密度和高密度栽培2年的白及鲜品折干率均在5月最低，分别为14.56%和11.9%，在11月最高，分别为36.21%和33.03%。
图2 不同栽培密度及栽培年限白及的折干率
Fig.2 Drying rate of B.striata with different cultivation years under different cultivation density
低密度和高密度栽培3年的白及鲜品折干率均在4月最低，分别为10.87%和12.76%，10月最高，分别为35.28%和34.79%。在相同采收时段，栽培3年的折干率整体稍高于栽培2年的。两种密度栽培的白及，其鲜品折干率在每年的周年变化趋势基本一致，都是在夏秋季时维持较高水平，反映白及在这个时间段的干物质积累较多，说明在秋季之初开始采收白及是合理的。
2.3 不同生长时间及栽培密度白及的主要成分含量
从表2可知多糖、淀粉、蛋白质、总酚及总黄酮的标样曲线及线性范围。5种成分标样回归方程的R值均大于0.999 0，在其测定的线性范围内测定结果真实可靠。
铁布衫表2 白及5种主要成分的标样曲线方程及线性范围Table 2 Sample curve equation and linear range of five main components in B.striata对照品CK测定成分Determined component 回归方程Regression equationR值R value线性范围/mgLinearity rangeD(+)-无水葡萄糖 D(+)-Anhydrous glucose多糖y=9.435 3x-0.004 30.999 6 0.01～0.1D(+)-无水葡萄糖 D(+)-Anhydrous glucose淀粉y=2.014x-0.033 0.999 5 0.1～0.5牛血清蛋白 Bovine serum albumin 蛋白质y=0.725 7x-0.031 40.999 50.1～1没食子酸 Gallic acid总酚y=5.864 3x-0.008 30.999 4 0.04～0.14芦丁 Rutin 总黄酮y=0.552 6x-0.003 70.999 7 0.01～0.1
2.3.1 淀粉含量 由图3-a可知，低密度和高密度栽培2年白及的淀粉含量均在11月最低，分别为29.64%和31.11%；在8月和9月最高，分别为59.25%和56.01%。低密度和高密度栽培3年白及的淀粉含量均在4月最低，分别是23.27%和24.34%；在9月和8月最高，分别为55.59%，和49.25%。2种密度栽培下的白及淀粉含量差异较小；2种不同栽培年限的白及淀粉含量有较大差异，栽培2年的白及淀粉含量要高于栽培3年的。
avalon总线2.3.2 蛋白质含量 由图3-b可知，低密度和高密度栽培2年白及的蛋白质含量均在7月最低，分别为1.47%和1.11%；在9月最高，分别为3.56%和3.24%。低密度和高密度栽培3年的白及蛋白质含量均在6月最低，分别为1.14%和0.54%；在4月最高，分别为6.47%和4.24%。
