【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Flos Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460
(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制:取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。 (2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
(3)连苯三酚标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10mg.用甲醇溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。 (4)样品液的的配制:精确称取待测样品10mg.用甲醇溶解并定容到10mL,得1mg/mL的样品液。
【测定方法与操作流程图】
【连苯三酚标准曲线的绘制】
| 0.2mg/mL样品液加 样 量(x mL) | 对外经贸实务甲醇 (05-x痤疮王) | A760值 | A760平均值 | SD |
0.000 | 0 | 0.50 | 0.03 | 0.038667 | 0.017442 |
0 | 0.50 | 0.023 |
0 | 0.50 | 0.063 |
0.004 | 0.01 | 0.49 | 0.15 | 0.166667 | 0.015861 |
0.01 | 过氧化氢酶活性测定0.49 | 0.162 |
0.01 | 0.49 | 0.188 |
0.008 | 0.02 | 0.48 | 0.29 | 0.294667 | 0.003682 |
0.02 | 0.48 | 0.299 |
0.02 | 0.48 | 0.295 |
0.02 | 0.05 | 0.45 | 0.749 | 0.729 | 0.016753 |
0.05 | 0.45 | 0.708 |
0.05 | 0.45 | 0.73 |
0.032 | 0.08 | 0.42 | 1.088 | 1.092 | 0.00432 |
0.08 | 0.42 | 1.09 |
0.08 | 0.42 | 1.098 |
0.04 | 0.1 | 0.4 | 1.393 | 1.394333 | 0.031857 |
0.1 | 0.4 | 1.356 |
0.1 | 0.4 | 1.434 |
0.048 | 0.12 | 0.38 | 1.747 | 1.636 | 0.092307 |
0.12 | 0.38 | 1.521 |
0.12 | 0.38 | 1.64 |
0.06 | 0.15 | 0.35 | 1.983 | 论钢琴表演艺术1.927667 | 0.041516 |
0.15 | 0.35 | 1.883 |
0.15 | 0.35 | 1.917 |
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图 Folin黄奇帆背景酚法测定多酚含量的标准曲线(以连苯三酚为例,平行测三次)
(以连苯三酚为例,A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998,线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间)。
【多酚含量的计算】 依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】
(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;
(2)Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 mol/L。也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,adc发泡剂在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。滤液呈微绿。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。(钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂,都比较贵)