福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10
【安全事项】本实验所用的福林酚试剂（或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂）有严重的腐蚀性。
【测定方法与操作流程图】
【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Flos Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460
(1)0.25mol/L 福林酚试剂的配制世界上最贵的一顿饭：取原装的福林酚试剂（浓度为2mol/L） 2毫升，加蒸馏水14毫升，充分混合，得0.25mol/L的福林酚试剂,共16 毫升。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10 H2O溶3.公司债权转
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0 克，溶于20毫升水中，混匀即得。 (3)连苯三酚标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10毫克．用甲醇溶解并定容到50毫升，得0.2毫克/毫升的连苯三酚标准液。 (4)样品液的的配制：精确称取待测样品10毫克．用甲醇溶解并定容到10毫升，得1毫克/毫升的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】
| 0.2毫克/毫升样品液加 样 量(x 毫升) | 酸甘化阴甲醇 (05-x代数学) | A760值 | A760平均值 | SD |
0.000 | 0 | 0.50 | 0.03 | 0.038667 | 0.017442 |
0 | 0.50 | 0.023 |
0 | 0.50 | 0.063 |
0.004 | 0.01 | 0.49 | 0.15 | 0.166667 | 0.015861 |
0.01 | 0.49 | 0.162 |
0.01 | 0.49 | 0.188 |
0.008 | 0.02 | 0.48 | 0.29 | 0.294667 | 0.003682 |
0.02 | 0.48 | 0.299 |
0.02 | 0.48 | 0.295 |
0.02 | 0.05 | 0.45 | 0.749 | 0.729 | 0.016753 |
0.05 | 0.45 | 0.708 |
0.05 | 0.45 | 0.73 |
0.032 | 0.08 | 0.42 | 1.088 | 1.092 | 0.00432 |
0.08 | 0.42 | 1.09 |
黑帮中的女人0.08 | 0.42 | 1.098 |
0.04 | 0.1 | 0.4 | 1.393 | 自摆乌龙1.394333 | 0.031857 |
0.1 | 0.4 | 1.356 |
0.1 | 0.4 | 1.434 |
0.048 | 0.12 | 0.38 | 1.747 | 1.636 | 0.092307 |
0.12 | 0.38 | 1.521 |
0.12 | 0.38 | 1.64 |
| | | | | |
0.06 | 0.15 | 0.35 | 1.983 | 1.927667 | 0.041516 |
0.15 | 0.35 | 1.883 |
0.15 | 0.35 | 1.917 |
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图 Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）
（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06毫克/毫升，A值在0.039-1.928之间）。
【说明】
(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；
(2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L。也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 毫升蒸馏水，50 毫升 85%磷酸及100 毫升浓盐酸装入带回流装置的2000毫升圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 毫升蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000毫升，过滤。滤液呈微绿。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵)
