总酚超声波法提取

阅读：评论：0

总酚超声波法提取：

取蓝莓叶片研磨成细粉待用，55%乙醇作为萃取液，料液比为1:25(g/ml)，超声时间1.5 h，超声功率400 W超声2次，温度在60℃以下。然后4500 r/min离心10 min，取上清液，得含总多酚的提取液，置4℃冰箱待用。

Folin-Ciocateu法进行蓝莓叶多酚含量的测定：

制备400 μg/ml没食子酸标准品溶液：准确称量没食子酸标准品200 mg，加入适量70%乙醇使其溶解，再用70%乙醇定容至100 ml，摇匀，静置。移液器移取20 mL，然后用70%乙醇定容至100 ml，摇匀，待用。

表1

组别	1	2	3	4	5	6	7
没食子酸溶液(ml)	0.00	0.05	0.10	0.15	0.20	0.25	0.35
蒸馏水 (ml)	2.00	1.95	1.90	1.85	1.80	1.75	1.65
福林-酚试剂(ml)	0.25	0.25	0.25	0.25	0.25	0.25	0.25
20％碳酸氢钠溶液(ml)	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
					cntn

按表中准确吸取没食子酸标准品溶液和蒸馏水体积共2ml，每支试管中再分别加0.25 ml福林-酚试剂后摇匀。约3分钟后加入1 ml的饱和Na2CO3溶液，振荡摇匀，用蒸馏水7.75ml定容至10ml，混匀后静置反应2h。反应结束，在波长725nm处下读取吸光值。

总多酚含量的计算：

取100 μl多酚提取液，加入2ml蒸馏水与20 μl的福林-酚试剂，再加入900 μl20％碳酸氢钠溶液混匀，避光放置反应2 h。在725 nm处测定吸光度。计算多酚的含量。

多酚总抗氧化能力的测定:

用pH 6.60磷酸缓冲液，以400 μg/ml的没食子酸标准品溶液为标准绘制标准曲线，方法如下：

雾凇大桥

组别	1	2	3	4	5	6	7	8	钠长石9	10
磷酸缓冲液(ml)	2.50	2.50 总抗氧化能力	贵州大学选课系统2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50
没食子酸溶液(ml)	0.00	0.10	0.20	0.30	0.40	0.50	0.60	0.70	0.80	0.90
双蒸水 (ml)	4.00	3.90	3.80	3.70	3.60	3.50	3.40	3.30	3.20	3.10
10%铁(ml)	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
10%三(ml)	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50	2.50

表2

东吴农村商业银行

离心3500 rpm/min分离10 min，取上清液2.5 ml，加2.5 ml双蒸水，再加0.5 ml 1%氯化铁混合均匀混匀后静置10 min。波长700 nm条件下测吸光度，吸光度越大，则样品还原性越强。提取液的抗氧化能力测定，取离心后提取液1 ml，按照上述方法，依次加入试剂。以试剂空白做对照，在700 nm波长下测吸光度A值，比较抗氧化活性。

实验结果：

图1 没食子酸含量测定标准曲线

由标准曲线方程，代入数据得总多酚的浓度为40.756μg/ml，蓝莓叶中总多酚含量为101.75mg/100g，是孟宪军在蓝莓果中提取到的总多酚(339.5mg/100g)的三分之一。说明蓝莓叶中含有大量的多酚类物质，若把蓝莓叶做成保健茶可以起到抗炎，抗肿瘤，改善记忆力等保健作用。

图2 没食子酸抗氧化力测定标准曲线

本文发布于:2023-07-07 11:42:32，感谢您对本站的认可！

本文链接：https://patent.en369.cn/xueshu/182708.html

上一篇：果蔬总酚测定方法

下一篇：紫外分光光度法测定水中总酚的含量