孕酮
1包被缓冲液,
(1)碳酸盐缓冲液(PH9.6 +0.2 0.05M)《激素酶免疫测定技术》⽯⽼师编著 Na2CO3 1.59g
NaHCO3 2.93g
加蒸馏⽔⾄1000ml。
(2)tris缓冲液(0.05mol/L)50ml 0.1mol/L
(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加⽔稀释⾄100ml 《酶免疫测定技术》杨⽴国等编著各种pH值的Tris缓冲液的配制
所需pH值(25℃)0.1mol/L HCl的体积
7.1 45.7
7.2 44.7
7.3 43.4
7.4 42.0
7.5 40.3
7.6 38.5
7.7 36.6
7.8 34.5
7.9 32.0
铅球场地画法8.0 29.2
8. 1 26.2
8.2 22.9
8.3 19.9
8.4 17.2
格兰杰因果关系
8.5 14.7
8.6 12.4
8.7 10.3
8.8 8.5
8.9 7.0
某⼀特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液
3)0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)
磷酸⼆氢钾0.2g
磷酸氢⼆钠 2.90g
氯化钠8g
加去离⼦⽔定容到1000ml。
2洗涤缓冲液(pH7.4 0.15mol/L)《激素酶免疫测定技术》⽯⽼师编著
0.05%Tween-20 0.5ml
加在PBS缓冲液1000ml中。
PBS缓冲液:
KH2PO40.2g
Na2HPO4·12H2O 2.9g
NaCl8.0g
KCl0.2g
加蒸馏⽔⾄1000ml。
3测定缓冲液(Ph7.0 含0.87﹪NaCl 和0.1﹪BSA的0.1M磷酸缓冲液)⽤于标
软交换技术
准孕酮,孕酮酶标物及奶样的稀释。《激素酶免疫测定技术》⽯⽼师编著Na2HPO4·12H2O 21.85g
NaH2PO4·2H2O 6.08g
NaCl 8.70g
BSA 1.00g
溶于1000mL蒸馏⽔中
4封闭缓冲液
⽜⾎清⽩蛋⽩(BSA)2% 2g
(或5%脱脂奶粉)加洗涤缓冲液100 ml。
0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA
2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量⾄100ml
0.2M Na2HPO4(⽆⽔28.4g/L,带12结晶⽔71.7g/L) 取25.7ml
0.1M 柠檬酸(⽆⽔19.2g/L,带1结晶⽔21.01g/L) 取24.3ml
加蒸馏⽔⾄100ml。
或
柠檬酸(C6H8O7·H2O)0.47g
Na2HPO4·12H2O 2.00g
6(1)TMB(四甲基联苯胺)显⾊液(蓝⾊)
A液(3,3’,5,5’-四甲基联苯胺,TMB):称取TMB20mg溶于10ml⽆⽔⼄
醇中,完全溶解后,加双蒸⽔⾄100ml。
B液(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢⼆钠缓冲液,pH5.0-5.4):称取Na2HPO4·12H2O14.34g,柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸⽔,加0.75%过氧化氢尿素1.28ml,定容⾄200ml,调pH⾄5.0-5.4。 倾听生命行走的声音将A液和B液按1:l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应⽤液
或
TMB(2mg/ml⽔)0.05ml
底物缓冲液0.95ml总参谋部信息化部
30% H2O20.001ml
总体积1ml。
(2)OPD(邻苯⼆胺)显⾊液(黄棕⾊)(现配避光)
OPD(⼲粉)0.004g
底物缓冲液10ml
威特金大学30% H2O2 0.015ml
总体积10ml。
(3)TMBS底物液(⽤于显⾊)《激素酶免疫测定技术》⽯⽼师编著10mg四甲基联苯胺硫酸盐(TMBS)的⼆甲基亚砜溶液,⽤底物缓冲液配成0.2mg/ml的TMBS底物液。⽤前加H2O2溶液30﹪左右。
7 终⽌液2mol/LH2SO4 ⽤于终⽌反应
在178.3ml⽔中,逐滴加⼊浓硫酸(18M,约98%)21.7ml,边加边摇。(浓H2SO4:蒸馏⽔=1:9)