TMB底物显试剂盒(ELISA,HRP显)
简介:
3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)是非常优越的酶免试验显剂,能溶解于多种有机溶剂和双蒸水中,为稳定的无溶液,与适量过氧化脲或双氧水与缓冲液混匀后,与过氧化物酶作用产生清晰的蓝产物,极易观察。由于其灵敏度高,配制后的工作液稳定,加上无致癌特性,被广泛用于酶联免疫(ELISA)试验和尿试纸的检测反应等。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),经典的方法是采用A、B液分开配制,使用前再混合的方法,并且长期存放稳定,本试剂一般情况下为无,有时略显浅蓝或浅黄。 Leagene TMB底物显试剂盒(ELISA,HRP显)主要由TMB显液、TMB buffer、TMB氧化剂组成,其特点是:1、灵敏度高;2、稳定性好,显终止后读数稳定;3、背景低:底物溶液在450nm检测时OD值一般小于0.05。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成:
编号 名称 | IT0001 2×50ml | IT0001 2×100ml | Storage |
试剂(A): TMB显液 | 50ml | 100ml | 大村智4℃ 避光 |
试剂(B): TMB buffer | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂(C): TMB氧化剂 | 100μl | 2×100μl | RT |
使用说明书 | 1份 |
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自备材料:
1、酶标仪
2、酶标板、96孔板
3、恒温箱ka5q1265rf(备选)
4、终止液:盐酸或硫酸等
操作步骤(仅供参考):
1、用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),取试剂(A)、(B)、(C),按A:B:C= 5000:5000:4的比例混合,待达到室温后即可使用。
2、加液:加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3~5次,每孔加TMB显液100μl。 根据个人实验需要,温育10~30分钟。
3、终止:加等体积的1M盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝变为黄。
4人机界面设计、读数:终止反应后30min内在450nm处读数。
注意事项:
1、 招股说明书本试剂盒给予的TMB氧化剂多于实际使用量,请按比例使用。
2、 TMB氧化剂易挥发,请注意密闭保存,以免效率下降,一旦开封请尽快使用。
3、 TMB氧化剂有腐蚀性,请勿直接接触于人皮肤、毛发等。
4、 如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。
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5、 为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数,或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物,再次进行试验。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月内有效。
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