帕⾦森病（Parkinson’s disease,PD）是发⽣于⽼年⼈的中枢神经系统变性性疾病，临床上以震颤、肌强直、运动迟缓为主要特征，并伴随脑内⿊质多巴胺能神经元变性死亡、纹状体多巴胺神经递质含量降低。本项⽬以MPTP诱导建⽴PD 模型⼩⿏，通过特定药物，观察药物对PD模型⼩⿏⾏为学、脑⿊质尼⽒⼩体表达、酪氨酸羟化酶（TH）表达的影响。并在实验终点，取脑部⿊质、纹状体等组织进⾏基因组学的后续检测。 实验内容：
SPF级C57／BL6雄性⼩⿏，⿏龄7-8周，体重20g左右；动物随机分为三组 正常组、PD模型组、PD模型+药物组
起死回生术
PD模型建模⽅法：pearson相关分析
腹腔注射MPTP 20mg／kg／d，连续注射14天。对照组使⽤等体积⽣理盐⽔进⾏腹腔注射，操作及注意事项相同。MPTP给药结束后，模型建⽴成功。福建江夏学院学报
药物给以相应的药物处理；正常组、PD模型组使⽤等体积PBS进⾏腹腔注射，操作及注意事项相同。
检测项⽬：
smi
1.⾏为学检测：
转棒实验：使⽤⼩⿏转棒仪检测⼩⿏的运动协调能⼒。
将⼩⿏置于直径为75px的旋转杆上，转速调整为30r/min，每次同时测定5只⼩⿏，每个隔室中1只。记录⼩⿏从转棒开始转动⾄掉落转棒所经历的时间，测定时间为1min，每次中间休息1min，连续5 次，记录1min 内掉落次数。 旷场实验：即⾃发活动，是检测MPTP损伤后少动的常⽤指标。
旷场实验所⽤实验箱为尺⼨：500×500×300mm旷场，周壁的颜⾊为⿊⾊，旷场底⾯被平均分为16个4×4 个⼩⽅格。正上⽅架摄像头，视野覆盖整个旷场。将动物放置在正中央格，同时进⾏摄像和计时，时间为5 min。通过计算机⽰踪分析系统来分析动物在⼀定时间内的活动状态。实验室保持安静，室温为20 ℃左右，光线充⾜。观察指标：⽅格间穿⾏次数（动物的四肢从⼀个格进⼊另⼀个格为穿⾏⼀次）、直⽴次数（动物双前肢同时离地，或者双前肢放在墙壁上算作直⽴⼀次）、中央格停留时间、穿过中央格的次数。恐怖主义产生的原因
爬杆实验：是评价⼩⿏运动协调能⼒的经典⽅法。通过记录⼩⿏由杆的顶端往下爬到底部（双前⽖着
地）所需时间，⽐较其运动能⼒。本实验将⼩⿏放置于⼀个⽊制的粗糙的⼩球上，其下端接有⼀个表⾯粗糙、截⾯为圆形的⽊棒，⽊棒下端放置于⿏笼⾥，当⼩⿏头朝下⽅从⽊球爬⾄⽊棒上，⽤秒表记录此刻的时间为A，当其爬⾄⽊棒最下端时，记录此刻的时间为B，那么⼩⿏爬完整个⽊棒所⽤的时间为C，C=A-B，每只⼩⿏测试俩次，将俩次爬杆的平均时间作为统计指标。
2. 脑组织尼⽒体染⾊湖北大学学报
取各组⼩⿏脑组织，经固定液固定、⽯蜡包埋、切⽚后，进⾏尼⽒⼩体染⾊。观察各组动物脑组织中尼⽒⼩体的数量。
3. 免疫组化检测脑⿊质TH表达
取各组⼩⿏脑组织切⽚，修⽚⾄脑⿊质部位，进⾏免疫组化染⾊酪氨酸羟化酶的表达。
4.电镜观察脑部线粒体：电镜下观察⼩⿏脑部多巴胺能神经元细胞超微结构。低倍视野有基本完整的细胞结构，⾼倍视野中要有线粒体线粒体特写， MPP组可见铁死亡线粒体：⼤⼩变⼩，双层膜密度增⾼，外膜断裂，脊减少或消失。
实验结果：
尼⽒染⾊
免疫组化染⾊TH：TH免疫染⾊可来评估MPTP对⼩⿏⿊质多巴胺能神经元的毒性损伤作⽤。模型组⼩⿏脑组织切⽚ＴＨ阳性神经元的数⽬较对照组明显减少。
