检查使用情况登记表
| 违反的条例 | 违反的条例 | 违反的条例 | 登记人及时间 |
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注明:登记时写清楚违反了上述规定中哪一条(共八条)。达到三次不予使用。
Ethovision XT 8操作手册
1.双击桌面图标“Ethovision XT 8”;按标签接通实验的摄像头通路,并接通摄像头电源。 2.建立新的实验文件:
Create a new experiment——new template experiment——apply a pre-defined template
——选择live tracking;选择摄像头通路(点击source — 右下角edit settings — 选择摄像头)——ok——选择动物种类——选择实验类型,如下 实验 | | Number of arenas |
morris water maze | 水迷宫 | 1 |
open field, rectangle | open field ,rectangle | 4(2x2) |
elevated plus maze | elevated plus maze高架十字迷宫 | 1 |
no arena template | 悬尾强迫游泳以及黑白箱 | 1 |
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——选择动物标记中心点;选择动物颜溶液聚合——记录速率recommended (mouse25,rat 15)——name,文件夹放置在data(E:)。
3.Experiment settings:
注意units:实验中所用单位,一般cm、s、deg,不用更改。
4.Trial list:
Add trials:open field一个trial四只动物;water maze四个trial一只动物;余一个图片红叉trial一只动物;
Add variable:增加动物变量参数。
5.Arena settings
Grab image from camera——grab——先定义每只动物的整个活动区,再定义区内分组——标定尺寸。(水迷宫定义arena,platform,qunrants;open field可定义arena4个、每个group又可定义四周、四角、中央区;悬尾定义水面上、水面下;)(水迷宫必须在水放
好、平台位置摆好、强迫游泳的水放好、玻璃缸位置放好后,才能grab定义分区;如果改变需要重新grab。) 6.Trial control settings(模式软件打开默认):
基本模式:Rule begin —— condition(duration≥1s) —— action(start track) —— condition(after a delay of试验时间)—— action(stop track)—— rule end (start-stop trial);
水迷宫模式:Rule begin —— action(start track)—— on platform10s(in zone) 并time condition≥2min —— operater 第一项 —— action(stop track)—— rule end (start-stop trial)。
7.Detection
依次选择:dynamic subtraction;model-based XT5招商嘉铭珑原(默认勿动);subject颜;检测动物;即开始实验。
8.Acquired trials
双击trail 1 —— playback播放,观察路径 —— 右侧窗口栏可更改标记中心点、path、filter时间。
9.Analysis profiles(主要参数,仅供参考)
黑白箱:distance moved、velocity、in zone(各区时间);
Water maze:distance moved、velocity、in zone(in quandrants)、movement等
Open field:distance moved、velocity、movement 、in zone等
强迫游泳:not movement
悬尾:
10.Analysis:自动计算结果
11.Output:数据结果与图片
12.清洁:做完实验一定要记得清洁,清洁完自己先检查下,保证没有脏水、没有排泄物、没有垫料、没有气味。最后喷杀虫剂关灯离开。
附:
Water maze实验方案(仅供参考,请根据自己实验查文献):
Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻隐藏在水中平台的一种实验,Morris水迷宫视频分析系统主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学等领域,在世界上已经得到广泛地认可,是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆研究的首选经典实验。实验中注意:1.水温恒定(25-30℃) 2、季节影响大。
【实验方案】
1、morris泳池注水,放置逃生平台(水面下约1cm,某象限正中央),小鼠小泳池,大鼠大泳池。 2、根据实验需要,用奶粉将泳池水变成白,鼠头部染成黑,实验关灯关门。实验中必须对动物动作轻柔。实验池上我已经用红标签纸标明四个象限、四个放鼠的位置。请不要随意移动大鼠池子的位置。实验前可以打开暖气保证房间温度;实验每天结束后请打开冷气(尤其夏天,冬天是情况定),以免味道发散;实验彻底结束后,池子放水到最后,
必须得人工用拖把抹布弄干,务必保证人离开时,池子是干的、干净的,否则可能生锈。
3、实验方案:
定位航行(固定逃生平台)
李忠瑞种子
1)、 第一天(获得性训练):将动物(大鼠或小鼠)头朝池壁在象限弧度1/2处轻柔放入水中(入水即开始实验),放入位置随机取四个象限起始位置之一。记录动物到水下平台的时间(s)。在训练中,如果这个时间超过60s,则引导动物到平台。让动物在平台上停留10s. 每只动物入水一次,将动物移开、擦干,必要时将动物(尤其是大鼠)放在150W的白炽灯下烤5min,放回笼内(可以在走廊烘干做过trial的鼠)。每只动物两次入水时间间隔qibozi15-20min。每只动物每天训练4次(即四个象限),可一个象限做完一批动物后,再开始下个象限。如此,连续训练4天。系统自动记录逃避潜伏期(入水至登陆平台的时间)。
2)、 第五天(探查训练probe trial):获得性训练结束后的第二天(即24h后),将平台撤除,开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象
限(原先放置平台的象限)所花的时间和进入该象限的次数,以此作为空间记忆的检测指标.(第一天让动物知道有平台存在,只分析第二天至第六天的数据)。也有文献每次入水训练2min,可根据实验选择。
定位航行(移动逃生平台第一种方案)——考查学习记忆的灵活性、工作记忆
3)、 测定动物的工作记忆(working memory-spatial reversal)。探查训练结束后的第二天,开始维持4天的对位训练。将平台放在原先平台所在象限的对侧象限,方法与获得性训练相同。每天训练4次。每次记录到平台的时间和游泳距离以及游泳速度,也可观察在原先平台象限的轨迹数据。
4)、测定动物的工作记忆的探查训练(working memory-spatial reversal):接下来的一天,将平台撤除,开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限(原先放置平台的象限)所花的时间和进入该象限的次数。
定位航行(移动逃生平台第二种方案)——考查学习记忆的灵活性、工作记忆
每天变换平台的象限(剩余三个),每只动物从2个或2个以上的象限放入水中训练,一个
象限训练一天,一共三天。
注意:固定逃生平台为最基础训练,推荐使用。移动逃生平台使用渐渐普遍。
黑白箱
黑白箱实验系统利用动物避暗特性(趋黑箱)和探索特性(趋白箱)进行动物行为起源、精神药理学、行为毒物学研究。啮齿类动物天生具有不喜欢明亮照明区域和自发探索新环境的倾向,使得黑白箱成为易于使用的测试仪器,无需事先训练动物。黑白箱试验有助于预测抗焦虑类药物或促焦虑生成药物对小鼠或大鼠行为的影响。已表明,与无焦虑特质的动物相比,焦虑动物会迅速转移到更黑的一面,并且极少离开黑暗的一面。 因此,更多时间在明亮端时,表示忧虑减轻。
【实验方案】:无需训练,直接放入白笼,开始记录5min。推荐:稳定性实验可连续做三天后统计结果,退行性实验课相应延长天数。每只动物做完必须清理现场以免影响下次测验。
Open field
观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。
旷场实验(open field test)是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在新奇环境之中某些行为的发生频率和持续时间等,反应实验动物在陌生环境中的自主行为与探究行为,以尿便次数反应其紧张度。
【实验方法与步骤】
实验在安静的环境下进行。将动物轻柔放入箱内底面中心,同时进行摄像和计时。观察15min(观察时间可根据实验拟定)后停止摄像。清洗方箱内壁及底面,以免上次动物余留的信息(如动物的大、小便、气味)影响下次测试结果。更换动物,继续实验。为了保证数据的可靠性,实验可连续进行三天(每天同一时段)。
【观察指标】
根据实验选择,如总位移、速度、在某区域如中央区、四周、四角区内的位移、速度、时间等,动的时间,不动的时间等等,具体分析。
高架十字迷宫
高架十字迷宫(High plus maze)是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧形成矛盾冲突行为来考察动物的焦虑状态。高架十字迷宫具有一对开臂和一对闭臂,啮齿类动物由于嗜暗性会倾向于在闭臂中活动,但出于好奇心和探究性又会在开臂中活动,在面对新奇刺激时,动物同时产生探究的冲动与恐惧,这就造成了探究与回避的冲突行为,从而产生焦虑心理。而抗焦虑药物能明显增加进入开臂的次数与时间,十字迷宫距离地面较高,相当于人站在峭壁上,使实验对象产生恐惧和不安心理。高架十字迷宫被广泛应用于新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心 理学及行为生物学等多个学科的科学-研究和计算机辅助教学等领域,是开展行为学研究尤其是焦虑抑郁研究的经典实验。
【实验方法】