一种简易分光光度法利用与硝基苯胺重氮化作用和与乙酰丙酮的耦合来测定亚硝酸盐 摘要：
一个简单而敏感的分光光度测定方法描述为亚硝酸盐的水和土壤样品中的决心。 该方法是基于亚硝酸盐与对 - 硝基苯胺反应而形成的重氮离子，这是加上一个新的偶合剂，乙酰基丙酮在碱性介质中。 染料显示出最大吸收在490nm和以上的范围内，每10毫升分析物的地下城守护者2秘籍0.5至14微克亚硝酸盐服从比耳定律。显体系的摩尔吸光系数为3.2×10 4 L摩尔-1厘米-1。硅橡胶垫片 相对标准偏差为2.7％（N = 10）。 形成的染料是稳定3小时。 干扰离子对测定的作用进行说明。 该方法已被建议用于亚硝酸盐的水和土壤样品中的测定。所获得的结果标准的N-（1 - 萘基）乙二胺的方法进行了比较。 关键词：亚硝酸盐测定；分光光度法；乙酰丙酮；重氮化作用。
亚硝酸盐是一种重要的水污染物，而且也是一种在含氮的有机物质的生物降解过程中形成的重要的中间物质。在饮用水中存在微量的亚硝酸盐是可被允许的，因为它能形成高铁血红蛋白的性质和致癌亚硝酸胺的形成，对二级和三级胺类。硝酸盐被怀疑是致癌的原因。考虑
到日益增长的对自然水和污水质量以及亚硝酸盐的含量研究的兴趣，当和其他水中含氮形成物相比较时，可以作为水中有机污染的指标，那么水中亚硝酸盐的浓度就确定了。福克斯回顾了许多用分光光度方法测定亚硝酸盐的方法。被用来测定水中亚硝酸盐的含量的方法有极谱法,流动注射分析和伏安法。亚硝酸盐通常是由用各种试剂耦合作用的重氮化合物所决定的。最近，一种动力学的方法利用它对普鲁氯嗪溴酸盐的氧化作用产生的催化效应来测定亚硝酸盐。
目前的讨论介绍了一种新的联结剂，乙酰丙酮（AA），来测定水中的亚硝酸盐。在碱性条件下，这些试剂与重氮对硝基苯胺耦合形成3-（4-硝基苯基氮化物）-2,4-乙酰基丙酮的钠盐，这样就提供了一种敏锐且可再现的不需要任何严格的反应条件的测定亚硝酸含量的方法。争议可
实验
试剂饿化学药品都是分析纯试剂，并且蒸馏水是用来准备试剂溶液的。
标准的亚硝酸溶液（中学生与社会1000p pm）。在水中溶解0.150g的亚硝酸钠将其在水中稀释到100mL。工作的标准就是适当的稀释。
对硝基苯胺（0.05%在2.5M的盐酸中）。在55.3mL盐酸中溶解0.1250g的对硝基苯胺并用水把它稀释到250mL。
乙酰丙酮（AA，5%v/v）。用甲醇将5.1mL的乙酰丙酮稀释到100mL。
乙二胺四乙酸（0.2M）。将7.44g的乙二胺四乙酸溶解在100mL的水中。
碳酸钠（1%）。在100mL的蒸馏水中溶解1g的碳酸钠。
实验过程
将含有0.5-14的亚硝酸样品倒入一系列的10mL标有刻度的烧瓶中。在这种溶液中加入1mL0.05%的对硝基苯胺，并且将溶液摇晃2分钟来完成重氮化作用。接下来，1.5mL5%的乙酰丙酮和2mL的2M的氢氧化钠溶液加入，用蒸馏水稀释，混合均匀。5分钟之后颜的偶氮染料的吸光度在490nm试剂空白下被测量。
在水中亚硝酸盐的样品。4mL的水溶液样品（包含不多于14的亚硝酸盐）用0.5mL1M的NaOH和0.5mL 0.2M EDTA进行处理。溶液混合后用离心机离心来去除形成的沉淀物。离心液被转移到10mL的标有刻度的烧瓶中，与1mL 0.05%的对硝基苯胺充分混合然后放置2分钟。然后，加入1.5mL 5%的乙酰丙酮等待2分钟。2mL 2M NaOH加入并用水稀释到10mL，5分钟后测定吸收度。亚硝酸盐的浓度由曲线图来确定，这个曲线图是用在10mL标准的烧瓶0-14亚硝酸盐水溶液得到的。亚硝酸盐土壤样品。一直重量的土壤样品放入50mL的烧杯中，用5mL1%的Na2CO3萃取四次。过滤提取物并将其制成25mL的水溶液。对于亚硝酸盐的测定，4mL制成的溶液（包含不多于14的亚硝酸盐）在水溶液样品中亚硝酸盐过程描述之后被直接用来显。
结果与讨论
这种方法涉及到了在碱性媒介下用AA使亚硝酸盐与对硝基苯胺发生重氮耦合作用，来给出在490nm最大吸收下一种红耦氮染料。图1呈现的是燃料的吸收光谱。产生有颜染料的过程分为两步。第一步，在酸性介质中亚硝酸盐用对硝基苯胺处理，经历了从重氮化作用到重氮氯离子。第二步，在碱性介质中重氮氯离子与活跃的乙酰丙酮亚甲基耦合形成偶氮染料，并且它再3中国梦想秀2012小时内保持稳定。表格1描述的就是这个过程。
重氮化合物的选择
许多初级芳香胺包括对硝基苯胺，对氨基苯乙酮，对氨基苯甲酸，磺胺酸，邻硝基苯胺被测试。在这些中，只有对硝基苯胺给出了满意的结果。另外，它在磺胺酸中很容易溶解和重氮化，给出了在确定条件下一种可水溶的偶氮染料，这样就消除了提取的需要。
中氮化作用的酸性影响
在酸性范围0.1-0.5M的HCL中，我们得到重氮化作用的不断的吸收光度值。在上边这个范围内，吸收不断减小。重氮化作用最少的时间是2分钟。重氮化作用在室温下进行，重氮氯化物形成的最优酸性是0.25M。其他的无机酸也被试了但都不满意。
试剂浓度的影响
对硝基苯胺。我们发现要完成重氮化作用需要1mL of 0.05%的对硝基苯胺溶液。高浓度的吸收并没有改变，然而，在低浓度下，吸收有所下降。
乙酰丙酮。我们发现在完成耦合作用时需要在甲醇中的1.5mL of a 5%事业单位登记管理暂行条例的试剂
。
在低浓度时吸收降低，然而在高浓度时吸收没有变化。
氢氧化钠。我们研究了氢氧化钠浓度对吸收的影响，从0.5-3mL的氢氧化钠被测定。实验显示1-3mL时给出了最大的吸收，我们就选择2mL。其他的碱性溶液也被尝试过，但是最好的是用氢氧化钠最为基座。
分析数据
在0.05到1.4 mg/ml范围内的亚硝酸盐遵从比尔定律，对颜系统摩尔吸收光系数（ε）和桑德尔灵敏度分别是3.2×104Lmol-1和0.0014cm-2。方法的可重复性可由连续9天内对对标准的亚硝酸溶液重复分析来确定。平均吸收光谱，标准差和相对标准差（n=10)分别是0.60，±0.01和2.7%。检测极限，定量限度和相关系数分别是0.035/mL，0.105/mL和0.999。
干扰的影响
因为这种方法是对水溶液样品的分析，那么就应该研究水中通常存在的外来离子的影响。在碱性介质中形成氢氧化物的金属离子有可能对其有所干扰，但是定量的这些离子用EDTA
而被遮蔽。Cu(II),Fe(III),Co(II)和Hg(II)引起一系列的干扰。表1显示的允许的外来离子的极限数量是在固定量亚硝酸盐的测定中不能引起吸收多余±2%的改变。
应用
该文的方法被应用来测定水样品和土壤样品中亚硝酸盐的含量。水样品的收集于不同的资源，并且在分析之前过滤。那些可利用的样品不包含亚硝酸盐，合成的样品是由加入已知量的亚硝酸盐来制备的，接着根据该文中测定水样品中亚硝酸盐浓度的过程对其进行分析，其结果与标准的磺胺-NEDA方法相比较（表2）。
即便土壤样品中不包含亚硝酸盐，我们也通过加入已知量的亚硝酸盐利用该文的方法来测定土壤样品中亚硝酸盐的含量。根据该文中对土壤样品中亚硝酸盐的测定过程以及标准的磺胺-NEDA方法，我们也可以对土壤样品进行分析（表3）。
对加入标准水和土壤样品的亚硝酸盐含量的测定。F 和t-test结果的统计分析在准确与精密性上没有重要意义的区别（表2和表3）。
结论
作为一种新的测定亚硝酸的耦合溶液，乙酰丙酮的引入提供了一种高灵敏度和广泛应用性的方法，这种方法对水溶液和土壤样品的简单而又快速的测定亚硝酸的含量是非常后的。快速的颜变化，良好的重现性，对PH值影响和温度变化的独立性使这种方法变得万能并且很有用。试剂便宜且很容易买到。校准图是从0.05-1.4/mL直线增加。变化的颜在3小时内保持稳定。该文方法的优点就在于对大量外来离子有很高的允许范围和提取步骤的消除。
