实验科目：海洋生物学实验实验题目：微藻形态结构观察与玻片制作 实验时间：周日3-4节上课时间：周日3-4节
一、实验目的
1.通过对硅藻、甲藻、裸藻等微藻代表种的实验观察，掌握各门的主要特征。 2.学习硅藻玻片制作技术。
3.了解微藻的分离纯化技术。
二、实验原理
各种微藻不同的形态，结构特征。
三、实验材料，用品，方法
（一）、硅藻，甲藻及甲藻代表种的观察
1. 实验材料：裸藻、硅藻的小环藻、舟形藻、扁形藻、羽纹藻及直链藻装片；活体或试剂固定样品。
二苯甲酰基甲烷
2. 实验内容：高倍显微镜下观察并照相。
（二）、硅藻玻片的制作
1. 实验材料：采集的新鲜海水及表层底质样品，福尔马林溶液，碘-碘化钾
2. 实验内容：
(1).用吸管吸取少量样品置于载玻片中央，盖上盖玻片，在显微镜下观察。
(2).硅藻永久片的制作学习：冲洗、离心，去除上层液，收集藻类与管底，三尖杉酯碱
加H
2SO
图闻天下4
或洗涤剂处理以去除细胞内有机物，清洗使成为白硅藻粉末。取含白 硅藻粉末的液体一滴滴在盖玻片上，烘干后，有藻的一面向下覆盖在载玻片上，制成玻片，以pleurax封片，或用硅藻胶处理制成硅藻永久装片。
(3).光学显微镜下观察拍照。
（三）、微藻的分离纯化
1. 实验材料：采集的新鲜海水及表层底质样品：F/2海水培养液及培养基
2. 实验内容：
(1).稀释分离法：应用24孔板/离心管，倍数法稀释样品液3-5次，取最后3-5次稀释液滴入溶解的琼脂培养基中，充分混匀，一起凝固，待单藻落出现，直到得到单一种；或镜检最后稀释液吸取单胞藻至液体培养基中培养。
(2).平板分离法：取样品液，均匀涂布在平板培养基表面，封口培养，单藻落出现时分离，得均匀种。
(3).毛细管吸取分离法
(4).密度梯度离心分离法
(5).抗生素或其他生物抑制剂分离法
五、实验结果
1. 螺旋藻属Spirulina
主要特征：藻体为单细胞或多细胞组成的圆柱形
螺旋状的丝状体，单生或集聚生，螺旋数2-7个。
藻体可以颤动和旋转运动，常像围绕着一个纵轴似地
很快旋转，向前爬行。细胞内含物均匀，无真正的细
胞核。藻体为单列细胞组成的不分枝丝状体，胶质鞘无或只有极薄的鞘，并有规则螺旋状，以形成藻殖段繁殖。无异形胞和后壁孢子。有纤弱的横隔壁。属原核生物的简单繁殖方式，可直接分裂。
2. 丝藻属Ulothrix
主要特征：藻体为由圆筒状细胞相连而成的单
列、不分枝的丝状体。藻体分化为直立或匍匐部分，
大多数种类细胞壁由完整的一片构成，正面观为H
型，素体周生。单核，叶绿体环带状或筒状，含
三一学校
有一至多个淀粉核。基部为一个无细胞形成固着
孢子和配子。
3. 直链藻属Melosira
主要特征：细胞圆球形、圆柱形或圆桶形。壳面
圆形，偶有呈椭圆形的。常相连成长直链，故称直链
藻。壳周无射出刺，但有的有刺刺入邻胞，与链轴平
行，是分种特征之一。壳面有射出状排列的孔纹或点
纹。壳外套常发达。壳环或有环纹。细胞内有很多小
片状的或几个树叶状的素体。产生休止孢子进行无
性生殖、有性生殖产生复大孢子。
头孢他啶4. 微囊藻属Microcystis
主要特征：体为球形、长圆形，形状不规则
网状或窗格状，微观或肉眼可见。体具无、柔
软而有溶解性的胶被。细胞球形或长圆形，多数排
列紧密；细胞淡蓝绿或橄榄绿，往往有气泡（假
空胞）。大量繁殖时引起湖靛，并产生毒素，有害于
水产养殖。
5. 盘星藻属Pediastrum
主要特征：植物体多数是由8、16、32个细胞
构成的定形体，细胞排列在一个平面上，大体呈
星盘状；每个细胞内常有一个周位的盘状的素体
和一个蛋白核，有一个细胞核；细胞壁光滑，或具典当管理办法
各种突出物，有的还具各种花纹。繁殖方式为无性
繁殖。
6. 栅藻属Scenedesmus
主要特征：通常是由2、4、8或16个、罕为32个细胞构成的定形体；细胞椭圆、卵圆、长筒、纺锤、新月形等等；每个细胞内有一个周位的、片状的叶绿体，一个蛋白核，一个细胞核；细胞壁光滑或有突起、各种刺、刺毛、颗粒、纵肋等。无性生殖时每个细胞都可以产生似亲孢子，经过排列成为似亲体；偶尔产生动孢子和同形配子。
7. 球藻属Chroococcus
主要特征：细胞球形，近球形，刚分裂后呈半球形；一般由2、4、8、16或更多的细胞组成的体，细胞内的原生质体为同质的，或含小颗粒体；原生质体呈各种颜，灰蓝、淡蓝、蓝绿、橄榄绿、黄、橘黄、红或紫红；每个细胞外都有均质的或有层理的胶鞘；坚固或柔弱而透明。细胞分裂面有3个。
8. 小环藻属Cyclotella
主要特征：细胞圆盘形，很少呈椭圆形。壳面构造分成两圈：外圈有向中心的带条纹或条状纹，有时有小刺；内圈即中央部分，平滑无纹，或有向心排列的点纹，或有排列不规则的花纹。壳面平或有起伏，特别在中央部分。素体多，小盘形。有复大孢子。细胞单独生活，或2—3个相连在一起，或包埋于自身分泌的胶质管内。
9. 刚毛藻属Cladophora
主要特征：植物体为多细胞分枝的丝状体，
附着生长在基质上；基部细胞有假根、或呈假根状、其他细胞柱状；有的老年个体因脱离附着物
而漂浮；一年生或多年生。每个细胞有一个大的
中央液泡，幼时素体为一个，周位网状，老时
可分散成为多数的颗粒状，蛋白核多数，细胞核
多数，都位于周位的细胞质中及素体以内。细胞壁极厚，常有层次，表面的角质层含有70%的蛋白质，常粗糙，以至其上常有许多藻类附生。丝状体的片断，基细胞的假根都可以进行营养繁殖。无性生殖时发育形成动孢子或产生厚壁孢子。有性生殖时产生双鞭毛的同形配子，有些种类有世代交替。
10. 菱形藻Nitzschia
主要特征：菱形藻细胞菱形、宽叶形或线形，
中部膨大，或收缩。细胞单独生活，少数连成
体。末端一般较尖。从壳面观管壳缝常在一侧，
亦有接近中线的。管壳缝常不易看到，只能看到
船骨点。花纹左右排列。无中央节和端节。素
体两个或多个。复大孢子由互换相等的配子形成。
