邱艳北京市红十字血液中心
一、血液成分的制备(一)血液成分的制备原理人体血液经过抗凝处理后 称为全血,全血离心后主要分为三层,自上而下依次为血浆层、白膜层和红细 胞层。 血浆层主要包含血浆、水、蛋白质、盐类和各种离子等;白膜层主要包括 富含血小板区、富含淋巴细胞区、富含单核细胞区和富含粒细胞区,这些有形 细胞比重接近,因此聚集在白膜层;红细胞层可简单分为年轻红细胞和正常红 细胞,由于二者处于红细胞的不同生长时期,因此比重略有差别。 根据全血离心后分层的原理,可以将各层中不同的血液成分分离、制备成 成分血,这样就可以合理利用血液资源,满足患者对不同成分血的需求,提高 效果。
(二)血液成分的分离策略目前血液成分的分离策略主要有离机血液成分 分离和联机血液成分分离。
离机分离策略在血液成分的制备过程中不需要献血者同步参与,先将从献 血者身上采集到的全血放入无菌袋,然后再进一步离心、分离为成分血;而联 机分离策略要求献血者必须配合医务工作者,同步参与血液成分制备,即一边 采集献血者的全血,一边分离成分血。
(三)血液成分的分离方法
1、离机血液成分分离有两种方法,一种是将采集到的全血放入无菌多连袋 中,离心后用手工方法将其分为不同的成分血。
其优点是比较经济,操作简单。
但也有下列缺点:
(1)重复性较差;(2)去血小板血浆(PPP、富含血小板的血浆
(PRP和浓缩血小板(PC制品中易污染其他细胞;(3)必须配备血袋封口
1/ 7 机;( 4)对血液成分的重量无法设立对照和记录;( 5)制备浓缩血小板较为 困难;( 6)无法进行标准化和条行码识别处理。
另一种方法是将采集到的血液放入无菌多连袋,离心后用自动血液分离机 将其分离并装入别的无菌袋中。
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其优点如下:
(1)可以进行条形码识别、数据记录和血液分离过程中的信息传递,对整 个分离过程进行控制;( 2)可以自动封闭血袋;( 3)高性能的光学传感器保 证了分离的重复性;(4)离心后确保高纯度成分制备;(5) PPR PRP和PC 中细胞污染少;( 6)制备快速。
但其需要预先的资金投入,而且在制备过程中,要根据不同机构使用的血 袋和采血量,制定离心曲线,以保证符合自动血液分离机在血液分离过程中的 需要。
2、联机血液成分分离也有两种方法,一种是在血液分离过程中,献血者与 单采血浆机始终相连,机器将收集到的献血者的血液离心并抽提出需要的血液 成分,把它装入其他无菌血袋,同时将不需要的血液成分回输给献血者。
其优点为:
(1)可以收集到血浆、PC和红细胞(RBQ (特别是存在同种异体免疫风 险时),而且血液成分质量较高;( 2)如果有额外的液体回输作为补偿,每个 献血者一次最多可以提供 600ml 血浆;( 3)一位献血者可以为一位患者输入足 够的血小板。
其缺点为:
( 1 )需要专门耗材的复杂仪器和专业人员进行操作;( 2)血液收集过程 需要 30分钟到 2 小时(制备浓缩血小板);( 3)大量带有抗凝剂的血液回输 给献血者,使献血者存在休克危险;( 4)耗材成本高;( 5)单采血浆机不能 排除对供血者的副作用和危险,由于处理过程长(长达 2 小时),献血者会感 觉寒冷和神经紧张,长时间存在体外循环,献血者会出现皮肤潮红、口干、对
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抗凝剂反应的危险以及塑料消耗品引起输血反应的危险;( 6)招募献血者更困
难。
另一种方法是利用细胞分离机将采集的血液离心、分离为不同的血液成分 并装入其他无菌血袋。
(四)血液成分的制备策略血液成分制备有四种不同的策略。
第一种策略是先将采集到的全血过滤,2900〜4000g重度离心10〜20分 钟,分别得到少白细胞的浓缩红细胞和新鲜冷冻血浆( FFP)。
浓缩红细胞经过进一步处理,可以制备成悬浮红细胞、洗涤红细胞和辐照 红细胞。
新鲜冰冻血浆可以进一步制备成普通液体血浆、冷沉淀凝血因子和缺乏 忸
因子的血浆。
第二种策略是全血不经过过滤,直接重度离心后,将分离到的浓缩红细胞 制备成红细胞添加液、洗涤红细胞和辐照红细胞。
其他同第一种策略。
第三种策略是全血不经过过滤,直接重度离心,制备成部分少白细胞的红 细胞(可进一步制备成悬浮红细胞、洗涤红细胞和辐照红细胞)、缺乏血小板 的血浆(可制备成新鲜冰冻血浆,并进一步制备成普通液体血浆、冷沉淀物、 缺乏忸因子的血浆和凝固因子)和白膜层。
欧洲人的白膜层加入部分血浆,1000〜1300g离心6韦寿增〜10分钟或275g离心 3〜5 分钟,可制备部分缺少白细胞的血小板。
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第四种策略是全血经过1000〜1300g轻度离心6〜10分钟,制备成部分少 白细胞的红细胞和PRP(美国人)。
前者可进一步制备成红细胞添加液、洗涤红细胞和辐照红细胞,后者经 2900〜 盂兰盆节4000g 重度离心 10〜 20 分钟,可制备浓缩血小板,去血小板血浆可进 步制备成普通液体血浆、冷沉淀凝血因子和缺乏 忸因子的血浆。
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二、血液成分的临床应用(一)血液成分的分类
1、 美国血库协会血液标准成分种类美国血库协会( AABB血液标准中的血 液成分共有 26 种,分别如下:
出版管理条例
( 1 )全血( whole blood )( 2)辐照全血( whole blood irradiated )( 糖基化修饰3) 红细胞( red blood cells)( 4)辐照红细胞( RBCs irradiated)( 5)冰冻解冻去 甘油红细胞( RBCs frozen and deglycerolized ( 6)少白细胞红细胞( RBCs leukocytes reduced)( 7)复壮红细胞( RBCs rejuvenated)( 8)冰冻解冻去甘 油复壮红细胞( RBCs rejuvenated frozen and deglycerolized ( 9)洗涤红细胞 (RBCs washed ( 10)单采红细胞( RBCs pheresis ( 1 1 )单采少白细胞红细 胞(RBCs leukocytes reduced pheresjs (12)血小板(platelets) (13)辐照血 小板( platelets irradiated )( 15)混合血小板( platelets pools)( 16)单采血小 板( platelets aphaeresis)( 17)辐照单采血小板( platelets aphaeresis irradiated )( 18)单采少白细胞血小板( platelets apheresis leukocytes reduced)
( 19)单采粒细胞( Granulocytes apheresis)( 20)辐照粒细胞( Granulocytes irradiated )( 21)冷沉淀凝血因子( antihemophilic factor cryoprecipitated )
( 22)新鲜冰冻血浆( fresh frozen plasma)( 23)冷沉淀后冰冻血浆( plasma cryoprecipitated
reduced)( 24)冰冻血浆( plasma frozen)( 25)液体血浆
( Liquid plasma)( 26)病毒灭活血浆( Solvent/detergent-treated pooled plasma)其中,(1)~( 11)主要是红细胞类制品,(12)~( 18)主要是血 小板类制品,( 26)主要是血浆类制品。
21)~(
2、 我国血液制品种类按照我国《全血成分血质量要求》,我国的血液产品 可分为血液制剂、造血干细胞和血液制品。
临床供应的血液制剂主要是全血和成分血,成分血包括红细胞类成分血、 病原体灭活血浆、浓缩血小板、新鲜冰冻血浆、泠沉淀凝血因子、辐照成分血 和单采成分。
其中,红细胞类成分血包括浓缩红细胞、悬浮红细胞、浓缩少白细胞红细 胞、悬浮少白细胞红细胞、洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞。
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单采成分血包括单采血小板、单采少白细胞血小板、单采粒细胞、单采新 鲜冰冻血浆和单
采红细胞。
(二)血液成分的临床应用
1、洗涤红细胞不同国家的洗涤红细胞制备标准也不同,美国的制备标准要 求血容量为250〜350ml (450ml全血制备),血细胞比容为
0.60~
0.80,白细胞v 5X 106单位,强调洗涤红细胞的目的是除去血浆部分。
我国的制备标准要求血容量为 125ml士 1%( 200ml全血制备)、
250ml ± 1% (400ml全血制备),红细胞回收率 > 7%,白细胞清除率> 8规, 血浆蛋白清除率> 9%。