干扰IL-1β受体信号转导的药剂的制作方法

干扰il-1β受体信号转导的药剂1.优先权2.本技术要求于2020年1月21日提交的美国临时申请第62/963,654号的优先权，该临时申请的全部内容通过引用并入本文。3.序列表4.本技术包含以ascii格式电子提交的序列表，并在此通过引用整体并入本文。所述ascii副本创建于2020年7月8日，文件名为15271_0001-00304_sl.txt，大小为54,286字节。

背景技术

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：：5.人白细胞介素1β(il-1β)是一种促炎细胞因子，在感染和炎症期间充当外周免疫应答的介质。il-1β最初以前体肽(pro-il-1β)的形式合成，在炎性体复合物中被caspase-1裂解，并分泌到细胞外空间。il-1β可以被多种细胞类型释放。6.有两种il-1受体：il-1ri和il-1rii。il-1β通过受体il-1ri对靶细胞发挥作用。il-1β活性失调是自身免疫性疾病的特征，且其可能由于细胞因子水平异常升高或il-1ri内源性拮抗剂的质量或数量的不足而发生。il-1β特别涉及几种自身炎症性疾病。7.卡那奴单抗(canakinumab)(ilaris，acz885)——由诺华公司(novartis)开发——为一种靶向白细胞介素-1β的人单克隆抗体。卡那奴单抗的作用方式是基于il-1β信号转导的中和(alten，gram等人2008)。卡那奴单抗于2009年获批用于冷吡啉相关周期性综合征(cryopyrin-associatedperiodicsyndrome)(caps)，随后于2016年获批用于另外三种罕见和严重的自身炎性疾病(gram2016)。8.吉伏组单抗(gevokizumab)(xoma052)——由xoma开发——是另一种靶向il-1β的单克隆抗体。吉伏组单抗被声称为一种调节性性抗体，其可通过降低与其il-1ri：il-1racp信号转导复合物的亲和力来调节il-1β生物活性(owyang，issafras等人2011；issafras，corbin等人2013)。9.近年来，已发现il-1β与动脉粥样硬化斑块发展中的几个步骤以及其他心血管疾病调节剂相关(mccarty和frishman2014)。假设是这些炎症性化学物质可能会阻止心脏从以前的心脏病发作的损伤中愈合。2017年，卡那奴单抗的一项iii期临床试验显示，心脏病发作、中风和心血管疾病组合的死亡人数减少了15％。该试验还显示肺癌发病率和死亡率显著降低。10.考虑到抗il-1β抗体在自身炎症性疾病、心脏病发作和肺癌中的功效，需要开发具有改进功效和药代动力学特征的其他抗il-1β抗体。技术实现要素：11.本公开提供了特异性结合并中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的至少一种活性的单克隆抗体及其抗原结合片段。可被本文公开的抗体或其片段中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的活性，包括但不限于，il-1β对其受体il-1ri的激活的中和，等等。12.本公开提供了一种针对人il-1β的小鼠单克隆抗体，命名为tavo304，其包含具有氨基酸序列seqidno.1的重链可变区序列和具有氨基酸序列seqidno.2的轻链可变区序列。13.本公开提供了包含三个互补决定区(cdr)的tavo304的重链可变区，这三个cdr命名为hcdr1、hcdr2和hcdr3，其氨基酸序列分别如seqidno.3、seqidno.4和seqidno.5所示。14.本公开提供了包含三个cdr的tavo304的轻链可变区，这三个cdr命名为lcdr1、lcdr2和lcdr3，其氨基酸序列分别如seqidno.6、seqidno.7和seqidno.8所示。15.本公开提供了tavo304的一个人源化重链可变区，命名为304vh1，其氨基酸序列如seqidno.9所示。16.本公开提供了tavo304的四个人源化轻链可变区，命名为304vl1、304vl2、304vl3和304vl4，其氨基酸序列分别如seqidno.10、seqidno.11、seqidno.12和seqidno.13所示。17.本公开提供了tavo304的第一人源化抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl1，命名为tavo7376，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.15所示的轻链序列。18.本公开提供了tavo304的第二人源化抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl2，命名为tavo7377，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.16所示的轻链序列。19.本公开提供了tavo304的第三人源化抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl3，命名为tavo7378，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.17所示的轻链序列。20.本公开提供了tavo304的第四人源化抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl4，命名为tavo7379，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.18所示的轻链序列。21.如本文所公开的抗体可以是全长igg1、igg2、igg3、igg4抗体或可以仅包含包括fab、f(ab’)2或scfv片段的抗原结合部分。可以修饰抗体骨架以影响功能，例如，消除残留的效应子功能。22.本公开还提供了一种分离的经工程改造的抗il-1βigg抗体，其与亲本野生型抗体相比具有延长的半衰期。与亲本野生型抗体相比，半衰期的延长可以通过改造抗体的ch2和ch3结构域来实现，所述抗体具有选自m252y/s254t/t256e、m428l/n434s、t250q/m428l、n434a和t307a/e380a/n434a的任何一组突变，根据欧盟索引(euindex)进行残基编号。23.本公开还提供了一种分离的经工程改造的抗il-1βigg抗体，其对由在残基222-237(eu编号)之间或在此处切割野生型抗体的蛋白酶的蛋白水解降解具有增强的抗性。与亲本野生型抗体相比，通过工程改造在铰链区具有g236缺失的e233p/l234v/l235a突变来实现对蛋白水解降解的抗性，根据欧盟索引进行残基编号。24.本公开内容还提供了一种多核苷酸，其包含编码本文公开的抗il-1β单克隆抗体和抗原结合片段的多肽序列的多核苷酸序列。25.本公开还提供了包含如本文公开的多核苷酸的载体。26.本公开还提供了包含如本文公开的载体的宿主细胞。27.本公开还提供了产生如本文所公开的抗il-1β单克隆抗体的方法，所述方法包括在抗体表达的条件下培养如本文所公开的宿主细胞并纯化抗体。28.本公开还提供了包含如本文公开的抗il-1β单克隆抗体和药学上可接受的载体的药物组合物。29.本公开还提供了检测抗il-1β单克隆抗体与il-1β结合的方法。30.本公开还提供了通过针对il-1β的抗il-1β单克隆抗体阻断il-1β与其受体il-1ri结合的方法。31.本公开还提供了通过针对il-1β的抗il-1β单克隆抗体中和il-1β对其受体il-1ri的功能活性的方法。32.本公开还提供了测量经工程改造的抗il-1β单克隆抗体的半衰期的方法。33.本公开还提供了测量经工程改造的抗il-1β单克隆抗体对蛋白水解降解的抗性的方法。34.本公开还提供了一种受试者的抗炎症性疾病的方法，所述方法包括给予有效量的抗il-1β单克隆抗体。35.本公开还提供了一种受试者心血管疾病的方法，所述方法包括给予有效量的抗il-1β单克隆抗体。36.本公开还提供了一种受试者肺癌的方法，所述方法包括给予有效量的抗il-1β单克隆抗体。37.本文所述的本公开的任何一个实施方案，除非明确否认或不适当，否则包括仅在描述本公开的特定方面的说明书的一个部分中描述的那些实施方案，以及仅在实施例或附图中描述的那些实施方案，所述实施方案可以与任何其他一个或多个实施方案组合。附图说明38.图1：小鼠单克隆抗人il-1β抗体tavo304与(a)人il-1β、(b)恒河猴il-1β和(c)小鼠il-1β结合。39.图2：在hek-blueil-1β报告基因测定中报告基因表达对人il-1β和恒河猴il-1β刺激的反应。40.图3：在hek-blue报告基因测定中通过tavo304或参考抗体refab-1(卡那奴单抗)中和(a)人il-1β或(b)恒河猴il-1β驱动的报告基因激活。41.图4：具有人源化vh和vl变体的tavo304的重链和轻链可变区的序列比对。通过将人源化vh变体(304vh1)与四种人源化vl变体(304vl1、304vl2、304vl3和304vl4)配对，可以形成四种人源化抗体。图4按出现顺序分别公开了seqidno：2、10-13、1和9。42.图5：四种人源化抗il-1βigg1抗体在(a)非还原和(b)还原条件下的sds-page分析。43.图6：四种人源化抗il-1βigg1抗体与(a)人il-1β和(b)恒河猴il-1β的结合。44.图7：在hek-blue报告基因测定中通过四种人源化抗il-1βigg1抗体中和(a)人il-1β和(b)恒河猴il-1β驱动的报告基因激活。45.图8：在mrc-5细胞因子释放测定中，通过四种人源化抗il-1βigg1抗体或参考抗体refab-1(卡那奴单抗)中和人il-1β驱动的il-6从人肺成纤维细胞mrc-5细胞中释放。具体实施方式46.定义47.在本说明书中引用的所有出版物(包括但不限于专利和专利申请)都通过引用并入本文，就好像完全阐述一样。48.应当理解，本文使用的术语仅出于描述特定实施方案的目的，并不旨在进行限制。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。49.尽管与本文描述的那些相似或等效的任何方法和材料可用于与本公开相关的实践中，但本文描述了示例性材料和方法。50.如在本说明书和所附权利要求中使用的，单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数指示物，除非内容另有明确规定。因此，例如，提及“一个细胞”包括两个或更多个细胞的组合等。[0051]“抗体”是广义的，且包括免疫球蛋白分子，所述免疫球蛋白分子包括单克隆抗体，所述单克隆抗体包括鼠、人、人源化和嵌合单克隆抗体，抗体片段，双特异性或多特异性抗体，二聚体、四聚体或多聚体抗体，单链抗体，结构域抗体以及包含所需特异性的抗原结合位点的免疫球蛋白分子的任何其他修饰构型。[0052]“全长抗体分子”由通过二硫键相互连接的两条重链(hc)和两条轻链(lc)及其多聚体(例如，igm)组成。每条重链由重链可变区(vh)和重链恒定区(由结构域ch1、铰链、ch2和ch3组成)组成。每条轻链由轻链可变区(vl)和轻链恒定区(cl)组成。vh和vl区可以进一步细分为高变异性区域，称为互补决定区(cdr)，其间散布有框架区(fr)。每个vh和vl分别由三个cdr和四个fr区段组成，从氨基到羧基末端按以下顺序排列：fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3和fr4。[0053]“互补决定区(cdr)”是抗体中的“抗原结合位点”。cdr可以使用各种术语定义：(i)互补决定区(cdr)，vh中的三个(hcdr1、hcdr2、hcdr3)和vl中的三个(lcdr1、lcdr2、lcdr3)均基于序列变异性(wu等人(1970)jexpmed132：211-50(kabat等人，sequencesofproteinsofimmunologicalinterest，第5版publichealthservice，nationalinstitutesofhealth，bethesda，md.，1991))。(ii)“高变区”、“hvr”或“hv”、vh中的三个(h1、h2、h3)和vl中的三个(l1、l2、l3)是指如由chothia和lesk(chothia等人(1987)jmolbiol196：901-17)定义的具有高变结构的抗体可变结构域的区域。国际免疫基因学(internationalimmunogenetics)(imgt)数据库(http：//www_imgt_org)提供了抗原结合位点的标准化编号和定义。cdr、hv和imgt描述之间的对应关系记载于lefranc等人(2003)devcompimmunol27：55-77中。除非说明书中另有明确说明，否则如本文所使用的术语“cdr”、“hcdr1”、“hcdr2”、“hcdr3”、“lcdr1”、“lcdr2”和“lcdr3”包括由上文所述的任何方法、kabat、chothia或imgt定义的cdr。[0054]根据重链恒定区氨基酸序列，免疫球蛋白可分为五个主要类别：iga、igd、ige、igg和igm。iga和igg进一步细分为同种型iga1、iga2、igg1、igg2、igg3和igg4。根据其恒定区的氨基酸序列，任何脊椎动物物种的抗体轻链都可以归为两种类型中的一种，即kappa(κ)和lambda(λ)。[0055]“抗体片段”是指保留重链和/或轻链抗原结合位点的免疫球蛋白分子的一部分，例如重链互补决定区(hcdr)1、2和3，轻链互补决定区(lcdr)1、2和3，重链可变区(vh)或轻链可变区(vl)。抗体片段包括fab、f(ab’)2、fd和fv片段以及结构域抗体(dab)，例如，由一个vh结构域组成。vh和vl结构域可以通过合成接头连接在一起以形成各种类型的单链抗体设计，其中vh/vl结构域可以分子内配对，或在vh和vl结构域由单独的单链抗体构建体表达的情况下进行分子间配对以形成单价抗原结合位点，例如单链fv(scfv)或双抗体；例如记载于国际专利公开号wo1998/44001、wo1988/01649、wo1994/13804和wo1992/01047中。[0056]“单克隆抗体”是指除了可能的众所周知的改变，例如从抗体重链中除去c-末端赖氨酸以外，在每条重链和每条轻链中具有单一氨基酸组成的抗体体。单克隆抗体通常结合一个抗原表位，除了双特异性单克隆抗体结合两个不同的抗原表位。单克隆抗体在抗体体中可能具有异质糖基化。单克隆抗体可以是单特异性的或多特异性的，或者是单价的、二价的或多价的。双特异性抗体包括在术语单克隆抗体中。[0057]“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体或抗体片段。“分离的抗体”包括分离到足够纯度的抗体，例如纯度为80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的抗体。[0058]“人源化抗体”是指抗原结合位点来源于非人物种且可变区框架来源于人免疫球蛋白序列的抗体。人源化抗体可以在框架中包括置换，因此框架可能不是表达的人免疫球蛋白或人免疫球蛋白种系基因序列的精确拷贝。[0059]“人抗体”是指具有重链和轻链可变区的抗体，其中框架和抗原结合位点均来源于人源序列并且被优化以在给予人类受试者时具有最小的免疫应答。如果抗体包含恒定区或恒定区的一部分，则恒定区也来源于人源序列。[0060]除非另有明确说明，否则整个说明书中抗体恒定区中氨基酸残基的编号根据欧盟索引，如记载于kabat等人，sequencesofproteinsofimmunologicalinterest，第5版publichealthservice，nationalinstitutesofhealth，bethesda，md.(1991)。[0061]如表1所示，本文使用常规的一字母和三字母氨基酸代码。[0062]表1[0063]氨基酸三字母代码一字母代码丙氨酸(alanine)alaa精氨酸(arginine)argr天冬酰胺(asparagine)asnn天冬氨酸(aspartate)aspd半胱氨酸(cysteine)cysc谷氨酸(glutamate)glne谷氨酰胺(glutamine)gluq甘氨酸(glycine)glyg组氨酸(histidine)hish异亮氨酸(isoleucine)ilei亮氨酸(leucine)leul赖氨酸(lysine)lysk甲硫氨酸(methionine)metm苯丙氨酸(phenylalanine)phef脯氨酸(proline)prop丝氨酸(serine)sers苏氨酸(threonine)thrt氨酸(tryptophan)trpw酪氨酸(tyrosine)tyry缬氨酸(valine)valv[0064]哺乳动物igg重链的恒定区序列在序列中被命名为ch1-铰链-ch2-ch3。根据欧盟索引，igg的“铰链”、“铰链区”或“铰链结构域”通常定义为包括人igg1的glu216并在pro230处终止，但在功能上，链的柔性部分可被认为包括额外的残基(称为上部和下部铰链区)，例如从glu216到gly237，下部铰链是指fc区的残基233到239，其通常导致fcγr结合。通过放置第一个和最后一个半胱氨酸残基形成重链间s-s键，其他igg同种型的铰链区可以与igg1序列对齐。尽管边界可能略有不同，但根据欧盟索引编号，ch1结构域与免疫球蛋白重链分子的vh结构域和铰链区氨基末端相邻，并包括第一个(最氨基末端)免疫球蛋白重链的恒定区，例如来自约eu位置118-215。fc结构域从氨基酸231延伸到氨基酸447；ch2结构域是从约ala231到lys340或gly341，ch3是从约gly341或gln342到lys447。ch1区的igg重链恒定区的残基终止于lys。含有fc结构域的分子至少包含抗体恒定区的ch2和ch3结构域，因此至少包含igg重链恒定区的约ala231至lys447的区域。含有fc结构域的分子可以任选地包含铰链区的至少一部分。[0065]“表位”是指抗体特异性结合的抗原部分。表位通常由氨基酸或多糖侧链等部分的活性(例如极性、非极性或疏水性)表面组组成，并且可能具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特征。表位可由形成构象空间单位的连续和/或不连续氨基酸组成。对于不连续的表位，来自抗原线性序列不同部分的氨基酸通过抗原分子的折叠在3维空间中非常接近。抗体“表位”取决于用于识别表位的方法。[0066]如本文所使用的“前导序列”包括可被哺乳动物细胞加工的任何信号肽，包括人b2m前导。这样的序列在本领域中是众所周知的。[0067]术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，是指任何长度的氨基酸的聚合形式，包括编码和非编码氨基酸、化学或生物化学修饰或衍生的氨基酸和具有修饰肽骨架的多肽。该术语还包括具有共翻译(例如，信号肽切割)的多肽和多肽的翻译后修饰，例如二硫键的形成、糖基化、乙酰化、磷酸化、蛋白水解的切割等。[0068]此外，如本文所使用的，“多肽”是指包括对天然序列的修饰的蛋白，所述修饰例如缺失、添加和取代(例如，本领域技术人员已知的本质上保守的)，只要蛋白质保持所需的活性。这些修饰可以是故意的，例如通过定点诱变，也可以是偶然的，例如通过产生蛋白质的宿主的突变，或由于pcr扩增或其他重组dna方法引起的错误。[0069]如本文所使用的，关于核酸分子的术语“重组”是指基因组、cdna、病毒、半合成和/或合成来源的多核苷酸，其凭借其来源或操作，不与其天然相关的全部或部分多核苷酸序列相关。如关于蛋白质或多肽使用的术语“重组”是指通过从重组多核苷酸表达产生的多肽。如关于宿主细胞或病毒使用的术语“重组”是指已引入重组多核苷酸的宿主细胞或病毒。重组体在本文中还用于指，就材料而言，已通过引入异源材料(例如细胞、核酸、蛋白质或载体)而使该材料改性(例如细胞、核酸、蛋白质或载体)。[0070]术语“多核苷酸”、“寡核苷酸”、“核酸”和“核酸分子”在本文中可互换使用以包括核苷酸(核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸)的聚合形式。该术语仅指分子的一级结构。[0071]“载体”是指能够在生物系统内复制或能够在此类系统之间移动的多核苷酸。载体多核苷酸通常包含元件，例如复制起点、多聚腺苷酸化信号或选择标记，它们的作用是促进这些多核苷酸在生物系统中的复制或维持，例如细胞、病毒、动物、植物和利用能够复制载体的生物成分的重组的生物系统。载体多核苷酸可以是单链或双链的dna或rna分子、cdna或它们的杂合体。[0072]“表达载体”是指可用于生物系统或重构的生物系统中以指导由存在于表达载体中的多核苷酸序列编码的多肽的翻译的载体。[0073]“价”是指分子中存在特定数量的对抗原特异的结合位点。因此，术语“单价”、“二价”、“四价”和“六价”分别是指分子中存在一个、两个、四个和六个对抗原特异的结合位点。[0074]如本文所使用的，提及核酸序列、蛋白质或多肽时使用的术语“异源”意指这些分子不是天然存在于异源核酸序列、蛋白质或多肽所源自的细胞中。例如，被插入非人细胞的细胞中的编码人多肽的核酸序列在该特定情况下是异源核酸序列。尽管异源核酸可以源自不同的生物或动物物种，但这样的核酸不需要源自不同的生物体物种以是异源的。例如，在一些情况下，合成核酸序列或由其编码的多肽可能与它所引入的细胞是异源的，因为该细胞先前不包含该合成核酸。因此，合成核酸序列或由其编码的多肽可被认为与人细胞异源，例如，即使该合成核酸序列或由其编码的多肽的一种或多种组分最初来源于人细胞。[0075]如本文所使用的，“宿主细胞”表示体内或体外真核细胞或来自作为单细胞实体培养的多细胞生物体(例如细胞系)的细胞，该真核细胞可以或已经被使用作为核酸(例如，包含编码本公开的多聚体多肽的核苷酸序列的表达载体)的受体，并且包括已经被该核酸遗传修饰的原始细胞的后代。应当理解，由于自然的、偶然的或故意的突变，单个细胞的后代在形态学或基因组或总dna互补上不一定与原始亲本完全相同。“重组宿主细胞”(也称为“遗传修饰的宿主细胞”)是其中已引入异源核酸例如表达载体的宿主细胞。例如，遗传修饰的真核宿主细胞通过以下方式而被遗传修饰：向合适的真核宿主细胞中引入异源核酸，例如，外源核酸对于真核宿主细胞而言是外源的，或在真核宿主细胞中通常不存在重组核酸。[0076]“特异结合”或“特异性结合”或“结合”是指抗体以比对其他抗原更大的亲和力结合特定抗原。通常，当结合的平衡解离常数(kd)为约1×10-8m或更小，例如约1×10-9m或更小、约1×10-10m或更小，约1×10-11m或更小，或约1×10-12m或更小时，抗体“特异性结合”，通常kd比其与非特异性抗原(例如，bsa、酪蛋白)结合的kd小至少100倍。kd可以使用标准程序测量。[0077]如本文所使用的，术语“”、“处理”等是指获得期望的药理学和/或生理学效果。就完全或部分预防疾病或其症状而言，该效果可以是预防性的；和/或就疾病的部分或完全治愈和/或归因于该疾病的副作用而言，该效果可以是性的。如本文所使用的，“”涵盖对哺乳动物例如人类疾病的任何，并且包括：(a)预防该疾病发生在可能易患该疾病但尚未被诊断为患有该疾病的人身上；(b)抑制疾病，即阻止其发展；(c)缓解疾病，即导致疾病消退。[0078]本文可互换使用的术语“个体”、“受试者”、“宿主”和“患者”是指哺乳动物，包括但不限于鼠科动物(例如大鼠、小鼠)、兔形动物(例如兔子)、非人类灵长类动物、人类、犬科动物、猫科动物、有蹄类动物(例如，马科动物、牛科动物、绵羊科动物、猪科动物、山羊科动物)等。[0079]“有效量”或“有效量”是指一种药剂的量，或两种药剂的组合量，当给予至哺乳动物或其他受试者以疾病时，其足以实现对疾病的这种。“有效量”将根据药剂、疾病及其严重程度以及待受试者的年龄、体重等而变化。[0080]应当理解，本公开不限于所描述的特定实施方案，当然，这可能会有所不同。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，并不旨在限制。[0081]本文描述了特异性结合并中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的至少一种活性，例如il-1β对其受体il-1ri的功能活性的单克隆抗体及其抗原结合片段。抗il-1β抗体和抗原结合片段可以性地给予至受试者以il-1β介导的疾病。[0082]抗il-1β抗体和抗原结合片段的组成[0083]本公开提供了一种小鼠单克隆抗体，命名为tavo304，它是从小鼠杂交瘤筛选中鉴定出来的，其特异性结合并中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰人白介素1β(il-1β)的至少一种活性。tavo304包含具有氨基酸序列seqidno.1的重链可变区序列和具有氨基酸序列seqidno.2的轻链可变区序列。tavo304的重链可变区包含三个互补决定区，分别命名为hcdr1、hcdr2和hcdr3，其氨基酸序列分别如seqidno.3、seqidno.4和seqidno.5所示。tavo304的轻链可变区包含三个互补决定区，分别命名为lcdr1、lcdr2和lcdr3，其氨基酸序列分别如seqidno.6、seqidno.7和seqidno.8所示。[0084]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的重链可变区序列(seqidno：1)[0085][0086]重链的三个cdr的序列加下划线。[0087]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的轻链可变区序列(seqidno：2)[0088][0089]轻链的三个cdr的序列加下划线。[0090]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的hcdr1序列(seqidno：3)[0091][0092]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的hcdr2序列(seqidno：4)[0093][0094]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的hcdr3序列(seqidno：5)[0095][0096]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的lcdr1序列(seqidno：6)[0097][0098]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的lcdr2序列(seqidno：7)[0099][0100]抗人il-1β小鼠单克隆抗体tavo304的lcdr3序列(seqidno：8)[0101][0102]小鼠抗人il-1β抗体tavo304可以通过将小鼠cdr移植到人种系骨架材料上来进行人源化。通过回复突变保留了一些关键的小鼠残基，以实现更高的稳定性和更好的表达，同时最大限度地降低免疫原性。对于tavo304，基于ighv3-48＊01设计了1个人源化vh变体(304vh1)，并设计了4个人源化vl变体，其中304vl1和304vl2基于igkv1-39＊01，304vl3和304vl4基于igkv2-40＊01，具有几个回复突变。[0103]基于上述，本公开提供了tavo304的一个人源化重链可变区，命名为304vh1，其氨基酸序列如seqidno.9所示。[0104]人源化重链可变区304vh1序列(seqidno：9)[0105][0106]人源化重链的三个cdr的序列加下划线。[0107]本公开提供了tavo304的四个人源化轻链可变区，命名为304vl1、304vl2、304vl3和304vl4，其氨基酸序列分别如seqidno.10、seqidno.11、seqidno.12和seqidno.13所示。[0108]人源化轻链可变区304vl1序列(seqidno：10)[0109][0110]人源化轻链的三个cdr的序列加下划线。[0111]人源化轻链可变区304vl2序列(seqidno：11)[0112][0113]人源化轻链的三个cdr的序列加下划线。[0114]人源化轻链可变区304vl3序列(seqidno：12)[0115][0116]人源化轻链的三个cdr的序列加下划线。[0117]人源化轻链可变区304vl4序列(seqidno：13)[0118][0119]人源化轻链的三个cdr的序列加下划线。[0120]通过将人源化304vh1重链与四个人源化轻链配对，可以生成tavo304的四种人源化抗体。本公开提供了一种tavo304的人源化igg1抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl1，命名为tavo7376，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.15所示的轻链序列。[0121]本公开提供了tavo304的第二人源化igg1抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl2，命名为tavo7377，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.16所示的轻链序列。[0122]本公开提供了tavo304的第三人源化igg1抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl3，命名为tavo7378，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.17所示的轻链序列。[0123]本公开提供了tavo304的第四人源化igg1抗体，其包含人源化重链可变区304vh1和人源化轻链可变区304vl4，命名为tavo7379，其包含如seqidno.14所示的重链序列和如seqidno.18所示的轻链序列。[0124]基于304vh1的抗人il-1β人源化igg1抗体重链(seqidno：14)[0125][0126][0127]重链可变结构域的序列加下划线。k409r突变加粗表示。[0128]基于304vl1的抗人il-1β人源化igg1抗体轻链(seqidno：15)[0129][0130]轻链可变结构域的序列加下划线。[0131]基于304vl2的抗人il-1β人源化igg1抗体轻链(seqidno：16)[0132][0133]轻链可变结构域的序列加下划线。[0134]基于304vl3的抗人il-1β人源化igg1抗体轻链(seqidno：17)[0135][0136]轻链可变结构域的序列加下划线。[0137]基于304vl4的抗人il-1β人源化igg1抗体轻链(seqidno：18)[0138][0139][0140]轻链可变结构域的序列加下划线。[0141]本公开还提供了双特异性抗体或多特异性抗体的制备，其可以包括通过具有fab或scfv结构域来接合任何两个、三个或四个il-1β表位，所述fab或scfv结构域包含tavo304的一个人源化重链可变区，其命名为304vh1，氨基酸序列如seqidno.9所示，以及tavo304的四个人源化轻链可变区之一，其命名为304vl1、304vl2、304vl3和304vl4，其氨基酸序列分别如seqidno.10、seqidno.11、seqidno.12和seqidno.13所示。例如，这可以是具有fab或scfv结构域304vh1与304vl1和304vh1与304vl2、304vh1与304vl1和304vh1与304vl3，304vh1与304vl1和304vh1与304vl4或可以接合两个、三个或四个表位的任何其他结构域排列的双特异性抗体。[0142]本公开的il-1β结合抗体和片段包括保留足够特异性结合il-1β的能力的抗原结合片段。如本文所使用的il-1β结合片段可以包括抗体的任何3个或更多个连续氨基酸(例如，4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、8个或更多个或甚至10个或更多个连续氨基酸)并且包括fab、fab’、f(ab’)2和f(v)片段，或单独的轻链或重链可变区或其部分。这些片段缺乏完整抗体的fc片段，从循环中清除得更快，并且与完整抗体相比，非特异性组织结合更少。这些片段可以使用众所周知的方法从完整抗体产生，例如通过用酶如木瓜蛋白酶(以产生fab片段)或胃蛋白酶(以产生f(ab’)2片段)进行蛋白水解切割。[0143]本公开的il-1β结合抗体和片段还可以包括双抗体，它们是其中vh和vl结构域在单个多肽链上表达的二价抗体，但其使用的接头太短而无法在同一链上的两个结构域之间配对，从而迫使这些结构域与另一条链的互补结构域配对并产生两个抗原结合位点。[0144]本公开的il-1β结合抗体和片段还可以包括与il-1β结合的单链抗体片段(scfv)。scfv包含与抗体轻链可变区(vl)可操作地连接的抗体重链可变区(vh)，其中重链可变区和轻链可变区一起或单独形成结合il-1β的结合位点。此类il-1β结合片段可通过本领域已知的方法制备，例如合成或通过pcr介导扩增抗体分子的重链和轻链可变部分以及由氨基酸gly和ser组成的柔性蛋白质接头。克隆得到的dna片段用于在大肠杆菌(e.coli)或哺乳动物细胞中表达。从宿主细胞中纯化表达的il-1β结合片段。[0145]本公开的il-1β结合抗体和片段包括包含两条重链和两条轻链的全长抗体。示例性的人抗体或人源化抗体包括igg、igm、ige、iga和igd抗体。本发明的抗体可以是任何类别(igg、igm、ige、igga、igd等)或同种型。例如，人抗体可以包含iggfc结构域，例如同种型igg1、igg2、igg3或igg4中的至少一种。[0146]在一些情况下，iggfc结构域包含与如seqidno：19的igg1fc序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。[0147]在一些情况下，iggfc结构域包含与如seqidno：20的igg2fc序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。[0148]在一些情况下，iggfc结构域包含与如seqidno：21的igg3fc序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。[0149]在一些情况下，iggfc结构域包含与如seqidno：22的igg4fc序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。[0150]可以将s228p突变制成igg4抗体以增强igg4稳定性。[0151]igg1fc(seqidno：19)：[0152][0153]igg2fc(seqidno：20)：[0154][0155][0156]igg3fc(seqidno：21)：[0157][0158]igg4fc(seqidno：22)[0159][0160]本发明的抗il-1β抗体可以包含修饰的fc区，其中所述修饰的fc区相对于野生型fc区包含至少一个氨基酸修饰。在一些实施方案中，本发明提供的抗il-1β抗体具有修饰的fc区，其中与亲本野生型抗体相比，修饰天然存在的fc区以延长在生物环境中的抗体半衰期，例如血清半衰期或通过体外测定法测量的半衰期。[0161]可以单独或组合产生的示例性突变是t250q、m252y、i253a、s254t、t256e、p257i、t307a、d376v、e380a、m428l、h433k、n434s、n434a、n434h、n434f、h435a和h435r突变。[0162]在某些实施方案中，半衰期的延长可以通过在igg1fc中改造m252y/s254t/t256e突变为seqidno：23(残基编号根据欧盟索引)(dall′acqua，kiener等人2006)来实现。[0163]在某些实施方案中，半衰期的延长也可以通过在igg1fc中改造m428l/n434s突变为seqidno：24(zalevsky，chamberlain等人2010)来实现。[0164]在某些实施方案中，半衰期的延长也可以通过在igg1fc中改造t250q/m428l突变为seqidno：25(hinton，xiong等人2006)来实现。[0165]在某些实施方案中，半衰期的延长也可以通过在igg1fc中改造n434a突变为seqidno：26(shields，namenuk等人2001)来实现。[0166]在某些实施方案中，半衰期的延长也可以通过在igg1fc中改造t307a/e380a/n434a突变为seqidno：27(petkova，akilesh等人2006)来实现。[0167]fc工程改造对延长抗体半衰期的影响可以在小鼠的pk研究中相对于具有天然iggfc的抗体进行评估。[0168]具有m252y/s254t/t256e突变的igg1fc(seqidno：23)[0169][0170]具有m428l/n434s突变的igg1fc(seqidno：24)[0171][0172]具有t250q/m428l突变的igg1fc(seqidno：25)[0173][0174][0175]具有n434a突变的igg1fc(seqidno：26)[0176][0177]具有t307a/e380a/n434a突变的igg1fc(seqidno：27)[0178][0179]在一些实施方案中，本发明提供的抗il-1β抗体具有修饰的fc区，其中修饰天然存在的fc区以增强抗体对蛋白酶的蛋白水解降解的抗性，所述蛋白酶在残基222-237(欧盟编号)之间或在其处切割野生型抗体。[0180]在某些实施方案中，抗蛋白水解降解可以通过在g236缺失的铰链区与亲本野生型抗体相比改造e233p/l234v/l235a突变为seqidno：28来实现，残基编号根据欧盟索引(kinder，greenplate等人2013)。[0181]具有e233p/l234v/l235a突变和g236缺失的igg1fc(seqidno：28)[0182][0183]在不需要效应子功能的情况下，本公开的抗体可以进一步被工程改造以在抗体fc中引入至少一种突变，该突变减少抗体与活化fcγ受体(fcγr)的结合和/或减少fc效应子功能，例如c1q结合、补体依赖性细胞毒性(cdc)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)或吞噬作用(adcp)。[0184]可以突变以减少抗体与活化的fcγr的结合并随后减少效应子功能的fc位置是记载于例如(“xu，alegre等人2000”)、(“vafa，gilliland等人2014”)、(“bolt，routledge等人1993”)、(“chu，vostiar等人2008”)、(“shields，namenuk等人2001”)中的那些。[0185]可以单独或组合产生的示例性突变是在igg1、igg2、igg3或igg4上的k214t、e233p、l234v、l234a、g236缺失、v234a、f234a、l235a、g237a、p238a、p238s、d265a、s267e、h268a、h268q、q268a、n297a、a327q、p329a、d270a、q295a、v309l、a327s、l328f、a330s和p331s突变。[0186]可用于降低adcc的示例性组合突变是igg1上的l234a/l235a，igg2上的v234a/g237a/p238s/h268a/v309l/a330s/p331s，igg4上的f234a/l235a，igg4上的s228p/f234a/l235a，igg1、igg2、igg3或igg4上的n297a，igg2上的v234a/g237a，igg1上的k214t/e233p/l234v/l235a/g236缺失/a327g/p331a/d365e/l358m，igg2上的h268q/v309l/a330s/p331s，igg1上的s267e/l328f，igg1上的l234f/l235e/d265a，igg1上的l234a/l235a/g237a/p238s/h268a/a330s/p331s，igg4上的s228p/f234a/l235a/g237a/p238s，igg4上的s228p/f234a/l235a/g236缺失/g237a/p238s。也可以使用杂合igg2/4fc结构域，例如具有来自igg2的残基117-260和来自igg4的残基261-447的fc。[0187]在一些实施方案中，本发明提供的抗il-1β抗体具有修饰的fc区，其中修饰天然存在的fc区以促进通过fc异二聚化产生双特异性抗体。[0188]在某些实施方案中，可以通过在两个亲本抗体上工程改造f405l和k409r突变来实现fc异二聚化以及在称为fab臂交换的过程中产生双特异性抗体(labrijn，meesters等人2014)。[0189]在某些实施方案中，还可以通过fc突变实现fc异二聚化以促进knob-in-hole策略(参见例如国际公开号wo2006/028936)。具有小侧链(孔(hole))的氨基酸被引入到一个fc结构域中，具有大侧链(节(knob))的氨基酸被引入到另一个fc结构域中。在两条重链共表达后，由于带有“孔”的重链与带有“节”的重链优先相互作用而形成异二聚体(ridgway，presta等人1996)。[0190]形成节和孔的示例性fc突变对是：t366y/f405a、t366w/f405w、f405w/y407a、t394w/y407t、t394s/y407a、t366w/t394s、f405w/t394s和t366w/t366s/l368a/y407v。[0191]在某些实施方案中，还可以通过fc突变实现fc异二聚化以促进静电匹配的相互作用策略(gunasekaran，pentony等人2010)。可以对突变进行工程改造以在一个fc结构域中产生带正电的残基并在另一个fc结构域中产生带负电的残基，如在美国专利公开号us2010/0015133、美国专利公开号us2009/0182127、美国专利公开号us2010/028637或美国专利公开号us2011/0123532中所记载的。重链异二聚化可以通过两个突变fc之间的静电匹配相互作用形成。[0192]进一步包含保守修饰的本公开的抗体在本公开的范围内。[0193]“保守修饰”是指不显著影响或改变含有氨基酸序列的抗体的结合特性的氨基酸修饰。保守修饰包括氨基酸置换、添加和缺失。保守置换是其中氨基酸被具有相似侧链的氨基酸残基替换的那些。具有相似侧链的氨基酸残基家族已明确定义，且其包括具有以下侧链的氨基酸：酸性侧链(例如，天冬氨酸、谷氨酸)、碱性侧链(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、非极性侧链(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、不带电荷的极性侧链(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、氨酸)、芳香侧链(例如，苯丙氨酸、氨酸、组氨酸、酪氨酸)、脂肪族侧链(例如，甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸)、酰胺(例如，天冬酰胺、谷氨酰胺)、β-支链侧链(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和硫-含侧链(半胱氨酸、甲硫氨酸)。此外，多肽中的任何天然残基也可以被丙氨酸置换，正如先前对丙氨酸扫描诱变所记载的(maclennan，rice等人1998；sasaki和sutoh1998)。可以通过已知方法例如通过pcr诱变(美国专利号4,683,195)来对本公开的抗体进行氨基酸置换。或者，可以例如使用随机(nnk)或非随机密码子(例如dvk密码子，其编码11个氨基酸(ala、cys、asp、glu、gly、lys、asn、arg、ser、tyr、trp))产生变体文库。可以使用本文所述的测定法测试所得抗体变体的特征。[0194]本公开的抗体可以通过诸如糖基化、异构化、去糖基化或非天然存在的共价修饰(例如添加聚乙二醇部分(聚乙二醇化)和脂化)的过程进行翻译后修饰。这种修饰可以在体内或体外发生。例如，本公开的抗体可以缀合到聚乙二醇(peg化)以改善它们的药代动力学特征。可以通过本领域技术人员已知的技术进行缀合。已显示性抗体与peg的缀合可增强药效学而不干扰功能(leong，deforge等人2001，yang，basu等人2003，knight，jordan等人2004)。[0195]可以修饰本公开的抗体以提高稳定性、选择性、交叉反应性、亲和力、免疫原性或其他所需的生物学或生物物理性质，这些都在本公开的范围内。抗体的稳定性受许多因素的影响，包括(1)影响其内在稳定性的单个结构域的核心包装，(2)影响hc和lc配对的蛋白质/蛋白质界面相互作用，(3)埋藏极性和带电残基，(4)极性和带电残基的氢键网；(5)其他分子内和分子间力之间的表面电荷和极性残基分布(worn和pluckthun2001)。在某些情况下，可以基于抗体的晶体结构或通过分子建模来鉴定潜在的结构不稳定残基，并且可以通过生成和评估在所鉴定的残基中含有突变的变体来测试残基对抗体稳定性的影响。提高抗体稳定性的方法之一是提高通过差示扫描量热法(dsc)测量的热转变中点(tm)。一般而言，蛋白质tm与其稳定性相关，并且与其对在溶液中展开和变性以及依赖于蛋白质展开趋势的降解过程的易感性负相关(remmele和gombotz2000)。许多研究发现，通过dsc测量为热稳定性的制剂的物理稳定性排名与通过其他方法测量的物理稳定性之间存在相关性(maa和hsu1996，remmele，nightlinger等人1997，gupta和kaisheva2003，bedu-addo，johnson等人2004，zhang，roy等人2004)。制剂研究表明，fabtm对相应mab的长期物理稳定性有影响。[0196]本公开的抗体可以在fc区中具有氨基酸置换，从而改善制造和药物稳定性。igg1的一个实例是在铰链221-dkthtc-226(seqidno：33)(欧盟编号)中的h224s(或h224q)，其完全阻断诱导的切割(yates，gunasekaran等人2010)；对于igg4，s228p突变阻断半抗体交换(angal，king等人1993，labrijn，buijsse等人2009)。[0197]抗il-1β抗体和片段的表达和纯化[0198]本公开的抗il-1β抗体和片段可由单一核酸(例如，包含编码抗体的轻链和重链多肽的核苷酸序列的单一核酸)编码，或由两个或更多个单独的核酸编码，每一种都编码抗体或抗体片段的不同部分。[0199]作为非限制性实例，本公开提供了编码tavo7378的igg1重链序列(seqidno：14)的核酸序列seqidno：29，编码tavo7378的轻链序列(seqidno：17)的核酸序列seqidno：30。[0200]tavo7378重链核苷酸序列(seqidno：29)[0201][0202]tavo7378轻链核苷酸序列(seqidno：30)[0203][0204][0205]本文所述的核酸可插入载体，例如核酸表达载体和/或靶向载体。此类载体可以多种方式使用，例如用于在细胞或转基因动物中表达il-1β结合抗体或抗体片段。通常选择载体以在将使用该载体的宿主细胞中发挥作用。可以在原核、酵母、昆虫(杆状病毒系统)和/或真核宿主细胞中扩增/表达编码il-1β结合抗体或片段的核酸分子。宿主细胞的选择将部分取决于il-1β结合抗体或片段是否要进行翻译后修饰(例如，糖基化和/或磷酸化)。如果是这样，优选酵母、昆虫或哺乳动物的宿主细胞。表达载体通常包含以下一种或多种成分：启动子、一种或多种增强子序列、复制起点、转录终止序列、包含供体和受体剪接位点的完整内含子序列、用于分泌的前导序列、核糖体结合位点、多聚腺苷酸化序列、用于插入编码待表达多肽的核酸的多接头区和选择性标记元件。[0206]在大多数情况下，前导序列或信号序列在抗il-1β抗体或片段的n末端进行工程改造，以指导其分泌。抗il-1β抗体或片段从宿主细胞分泌将导致从抗体或片段中除去信号肽。因此，成熟的抗体或片段将缺少任何前导序列或信号序列。在某些情况下，例如在真核宿主细胞表达系统需要糖基化的情况下，可以操纵各种前序列以提高糖基化或产量。例如，可以改变信号肽的肽酶切割位点，或添加原序列，这也可能影响糖基化。[0207]本公开进一步提供了包含本公开的核酸或载体的细胞(例如，分离的或纯化的细胞)。细胞可以是能够用本公开的核酸或载体转化以产生由其编码的多肽的任何类型的细胞。为了表达il-1β结合抗体或片段，将如本文所述获得的编码部分或全长轻链和重链的dna插入表达载体中，使得基因可操作地连接到转录和翻译控制序列。[0208]将核酸和载体引入分离的细胞以及体外培养和选择转化的宿主细胞的方法是本领域已知的并且包括使用氯化钙介导的转化、转导、接合、三亲交配、deae、葡聚糖介导的转染、感染、与脂质体的膜融合、用dna包被的微粒高速轰击、直接显微注射到单细胞中和电穿孔。[0209]在将本公开的核酸或载体引入细胞后，在适合于编码序列表达的条件下培养细胞。然后可以从细胞中分离抗体、抗原结合片段或抗体的部分。[0210]在某些实施方案中，可以将一起编码il-1β结合抗体或其抗原结合片段的两种或更多种载体引入细胞中。[0211]纯化已经分泌到细胞培养基中的il-1β结合抗体或片段可以使用多种技术来完成，所述技术包括亲和、免疫亲和或离子交换谱、分子筛谱、制备型凝胶电泳或等电聚焦、谱聚焦和高压液相谱法。例如，包含fc区的抗体可以通过与蛋白a的亲和层析来纯化，其中所述蛋白a选择性结合fc区。[0212]抗体或抗原结合片段的修饰形式可以用在其羧基或氨基末端处的亲和标签制备，例如六组氨酸(seqidno：34)或其他小肽例如flag(eastmankodakco.，newhaven，conn.)或myc(invitrogen)并通过一步(one-step)亲和柱纯化。例如，多组氨酸与镍的结合具有很高的亲和力和特异性，因此镍的亲和柱(例如镍柱)可用于纯化多组氨酸标记的选择性结合剂。在一些情况下，可以采用不止一个纯化步骤。[0213]抗il-1β抗体和片段与il-1β的结合和活性[0214]本公开包括选择性结合il-1β的抗il-1β抗体和片段，因为它们以比其他抗原更大的亲和力结合il-1β。抗il-1β抗体和片段可以选择性地结合人il-1β，但也可检测地结合非人il-1β。替代地或另外地，抗体或片段可结合人il-1β和其他哺乳动物的il-1β。例如，抗体或片段可以结合啮齿动物il-1β、灵长类动物il-1β、狗il-1β和兔il-1β或豚鼠il-1β中的一种或多种。替代地或另外地，il-1β结合抗体或il-1β结合片段可以具有相同或基本相同的抗重组人il-1β和内源性人il-1β的效力。[0215]在本领域中充分记载了体外和基于细胞的测定法，用于确定il-1β与il-1受体i型(il-1r1)的结合。例如，il-1β与il-1受体i型的结合可以通过以下方式来确定：固定il-1β结合抗体，用固定化的抗体分离il-1β并确定il-1β是否与抗体结合，以及将可溶形式的il-1ri与结合的il-1β/抗体复合物接触，并确定可溶性il-1ri是否与该复合物结合。该方案还可以包括在与il-1β接触之前将可溶性il-1ri与固定化抗体接触，以确认可溶性il-1ri不与固定化抗体结合。该方案可以使用仪器执行，用于结合相互作用的动力学分析。这种方案还可用于确定抗体或其他分子是否允许或阻断il-1β与il-1受体i型的结合。[0216]对于其他il-1β/il-1ri结合测定，可以通过比较在存在或不存在il-1β抗体或其il-1β结合片段的情况下il-1β与il-1ri的结合来确定il-1β与il-1受体i型结合的允许或阻断。在测定读数中将阻断鉴定为，与含有相应的缓冲液或稀释剂但不含il-1β抗体或其il-1β结合片段的对照样品相比，在抗il-1β抗体或其il-1β结合片段存在下il-1β与il-1受体i型结合的指定的减少。测定读数可以定性地视为指示存在或不存在阻断，或可以定量地视为指示由于抗体或片段的存在而导致的结合减少百分比或倍数。当il-1β结合抗体或il-1β结合片段基本上阻断il-1β与il-1ri结合时，与在没有抗体或片段的情况下相同浓度的il-1β和il-1ri的结合相比，il-1β与il-1ri结合减少至少10倍，或者至少约20倍，或者至少约50倍，或者至少约100倍，或者至少约1000倍，或者至少约10000倍或更多。[0217]可以使用肽阵列，例如pepspottm肽阵列(jptpeptidetechnologies，berlin，germany)来确定与本公开中描述的il-1β结合抗体或片段结合的关键氨基酸残基(表位)，其中直接在膜上合成12个氨基酸肽的扫描(跨越整个il-1β氨基酸序列，每个肽与前一个肽重叠11个氨基酸)。替代地或另外，可以进行抗体竞争实验并且这样的测定是本领域众所周知的。[0218]根据本公开使用的优选的il-1β抗体或抗体片段通常以高亲和力(例如，如用biacore测定的)结合人il-1β，例如，对于il-1β的平衡结合解离常数(kd)为约10nm或更小，约5nm或更小，约1nm或更小，约500pm或更小，或更优选约250pm或更小，约100pm或更小，约50pm或更小，约25pm或更少，约10pm或更小，约5pm或更小，约3pm或更小，约1pm或更小，约0.75pm或更小，约0.5pm或更小，或约0.3pm或更小。[0219]本公开的抗体或片段可以例如以约10nm或更小，约5nm或更小，约2nm或更小，约1nm或更小，约0.75nm或更小，约0.5nm或更小，约0.4nm或更小，约0.3nm或更小，或约0.2nm或更小的ec50结合il-1β，如通过酶联免疫吸附测定(elisa)测定的。[0220]优选地，本公开的抗体或抗体片段不与除il-1β之外的任何靶标交叉反应。例如，本发明的抗体和片段可以结合il-1β，但不能可检测地结合il-1α，或相对于其与il-1α的结合，其结合il-1β的选择性至少高出约100倍(例如，至少约150倍，至少约200倍，或甚至至少约250倍)。[0221]本公开还包括与il-1β结合以中和il-1β的生物活性的中和抗体或其中和片段。il-1β的生物活性的中和可以通过测定il-1β生物活性的一种或多种指标来评估，例如在报告基因测定中il-1β刺激的报告基因表达，il-1β刺激il-6从人成纤维细胞或其他细胞中释放，il-1β，或者il-1β诱导的t辅助细胞增殖。il-1β的生物活性的中和也可以通过小鼠关节炎模型在体内进行评估。优选地，本公开的il-1β结合抗体和片段中和与il-1β结合的il-1受体i型(il-1ri)的信号转导功能相关的il-1β的生物学活性。[0222]在一个实施方案中，本公开的抗体或其片段可以通过与直接参与il-1β靶向活性的il-1β表位结合来中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的活性。在另一个实施方案中，本公开的抗体或其片段可以通过与不直接参与il-1β靶向活性的il-1β表位结合来中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的活性，但与其结合的抗体或片段在空间或构象上抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的靶向活性。在又一个实施方案中，本公开的抗体或其片段结合至不直接参与il-1β的靶向活性的il-1β的表位(即，非阻断抗体)，但与其结合的抗体或片段导致il-1β的清除增强。[0223]一般而言，本公开的抗体和片段可以中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的生物活性，而不论il-1β与il1受体i型的结合是否被阻断。更优选地，il-1β结合抗体或il-1β结合片段通过与il-1β结合来中和il-1β的生物学活性，而基本上不阻止结合的il-1β与il-1受体i型的结合。这种抗体和片段的潜在优势是它们可以结合和中和il-1β，同时仍然允许il-1β与il-1ri结合。这可以导致il-1α生物活性以及il-1β生物活性的有效降低，因为用于与il-1α结合的未结合的il-1ri位点较少。因此，本公开的il-1β结合抗体和片段可用于希望在体外和体内中和il-1生物活性的方法中。[0224]本发明的抗体或片段可以是特异性结合影响il-1β生物活性的il-1β表位的中和抗体或片段。本发明的抗体或片段可以结合il-1β的中和敏感性表位。当il-1β的中和敏感性表位被本发明的抗体或片段之一结合时，结果是失去含有该表位的il-1β的生物活性。[0225]药物组合物[0226]根据本公开使用的il-1β结合抗体和抗体片段可以配制成组合物，尤其是药物组合物，用于本文的方法中。此类组合物包含或预防有效量的本公开的il-1β结合抗体或抗体片段，其与合适的载体例如药学上可接受的试剂混合。通常，本公开的il-1β结合抗体和抗体片段被充分纯化以在配制成药物组合物之前给予动物。[0227]药学上可接受的试剂包括载体、赋形剂、稀释液、抗氧化剂、防腐剂、着剂、调味剂和稀释剂、乳化剂、助悬剂、溶剂、填充剂、膨胀剂、缓冲液、递送载体、张度剂、助溶剂、润湿剂、络合剂、缓冲剂、抗菌剂和表面活性剂。[0228]该组合物可以是液体形式或冻干(lyophilized或freeze-dried)形式，并且可以包括一种或多种冻干保护剂、赋形剂、表面活性剂、高分子量结构添加剂和/或膨胀剂。[0229]组合物可适用于肠胃外给药。示例性组合物适合通过技术人员可获得的任何途径注射或输注到动物体内，例如关节内、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内、脑内(实质内)、脑室内、肌肉内、眼内、动脉内、病灶内、直肠内、经皮、口服和吸入途径。[0230]本文所述的药物组合物可以被配制用于以在特定局部环境中提供产品的局部浓度(例如，推注、贮库效应)、持续释放和/或增加的稳定性或半衰期的方式控制或持续递送。[0231]使用方法[0232]本发明的抗体和片段可用于预防和il-1β介导的疾病或医学病症，例如炎症病症、过敏症和过敏病症、超敏反应、自身免疫疾病、严重感染和器官或组织移植排斥。[0233]特别地，本公开的抗体可用于、预防或改善自身免疫性疾病和炎症性病症，特别是具有包括自身免疫组分病因的炎症性病症如关节炎(例如类风湿性关节炎、慢性进展性(progrediente)关节炎和关节炎畸形)和风湿性疾病，包括炎症性病症和风湿性疾病包括骨质疏松、炎症性疼痛、超敏反应(包括气道超敏反应和皮肤超敏反应)和过敏症。[0234]可以使用本公开的抗体的特定自身免疫性疾病包括自身免疫性血液病(包括例如溶血性贫血、再生障碍性贫血、纯红细胞性贫血和特发性血小板减少症)、全身性红斑狼疮、多软骨炎、sclerodoma、韦格纳(wegener)肉芽肿、皮肌炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、牛皮癣、史蒂文-约翰逊(steven-johnson)综合征、特发性腹泻、自身免疫性炎症性肠病(包括例如溃疡性结肠炎、克罗恩(crohn)病和肠易激综合征)、内分泌性眼病、格雷夫斯(graves)病、结节病、多发性硬化、原发性胆汁性肝硬化、青少年糖尿病(i型糖尿病)、葡萄膜炎(前部和后部)、干燥性角结膜炎和春季角结膜炎、间质性肺纤维化、银屑病关节炎和肾小球肾炎(伴有或不伴有肾病综合征，例如，包括特发性肾病综合征或微小病变肾病)。[0235]本公开的抗体还可用于、预防或改善哮喘、支气管炎、尘肺、肺气肿和气道的其他阻塞性或炎症性疾病。[0236]本发明的抗体和片段也考虑用于心脏、肺、心肺联合、肝脏、肾脏、胰腺、皮肤或角膜移植的接受者，包括同种异体移植排斥或异种移植排斥，或用于预防移植物抗宿主疾病，例如骨髓移植后，或器官移植相关的动脉硬化。[0237]特别地，本公开的抗体可用于骨代谢疾病，包括骨关节炎、骨质疏松症和其他炎症性关节炎，以及一般的骨质疏松，包括与年龄相关的骨质疏松，特别是牙周病。[0238]本公开的抗体也可用于减少、预防或心血管事件和/或心血管疾病，包括心肌梗塞、中风、心血管死亡、充血性心力衰竭、心脏骤停、急性冠状动脉综合征、心绞痛或血运重建手术。[0239]本公开的抗体也可用于预防或癌症，包括肺癌、胰腺癌和乳腺癌。在一个实施方案中，本文公开的抗il-1β抗体或其片段可以有效量用于和/或预防肺癌。在另一个实施方案中，本文公开的抗il-1β抗体或其片段可以有效量用于和/或预防胰腺癌。在另一个实施方案中，本文公开的抗il-1β抗体或其片段可以有效量用于和/或预防乳腺癌。[0240]有效量的抗il-1β抗体可以在本公开中用于和/或预防1型糖尿病、2型糖尿病、肥胖症、高血糖症、高胰岛素血症、胰岛素抵抗和以胰岛素抵抗为特征的疾病状态和病症。此类方法可用于患有2型糖尿病、1型糖尿病、肥胖症、高血糖症、高胰岛素血症、胰岛素抵抗和以胰岛素抵抗为特征的疾病状态和病症的哺乳动物受试者(例如，人)，或在处于风险中的受试者中预防前述疾病发生。在一个实施方案中，本文公开的抗il-1β抗体或其片段可以有效量用于和/或预防2型糖尿病。[0241]除了用途之外，本发明的抗体和片段还可以用于诊断方法以检测il-1β(例如，在生物样品中，例如血清或血浆)，所述诊断方法使用免疫测定法，例如酶联免疫吸附测定法(elisa)、放射免疫测定法(ria)或组织免疫组织化学。[0242]用于检测生物样品中的il-1β的方法可以包含使生物样品与一种或多种本发明的抗体或片段接触并检测与il-1β结合的抗体或片段或未结合的抗体或片段的步骤，从而检测生物样品中的il-1β。抗体或片段可以用可检测物质直接或间接标记，以促进结合或未结合抗体的检测。合适的可检测物质包括各种酶、辅基、荧光材料、发光材料和放射性材料。[0243]实施例[0244]提供以下实施例以更详细地描述本公开。它们旨在说明而非限制本公开。[0245]实施例1：小鼠抗il-1β抗体tavo304的il-1β结合亲和力[0246]通过杂交瘤筛选，tavo304被鉴定为小鼠抗人il-1β抗体。采用基于elisa的结合测定来评估tavo304与重组人il-1β的结合。在该测定中，将1μg/ml重组人il-1β(r&d系统)包被在elisa板上。将增加浓度的tavo304抗体应用到板上，并通过hrp缀合的抗小鼠二抗检测它们与重组人il-1β的结合。观察到tavo304剂量依赖性地结合重组人il-1β，ec50为3.6ng/ml(图1)。[0247]tavo304与小鼠和恒河猴il-1β的结合也在类似的elisa测定中通过分别用小鼠和恒河猴il-1β包被板来评估。tavo304对小鼠il-1β没有显示出显著的结合亲和力(图1)。相比之下，它对恒河猴il-1β表现出良好的结合亲和力，ec50为12.2ng/ml。[0248]实施例2：tavo304对il-1β中和的体外测定[0249]开发了hek-blueil-1β报告基因测定以评估il-1β的功能活性。在该测定中，hek-blueil-1β细胞(invivogen)表达il-1β受体il-1r，并且分泌的胚胎碱性磷酸酶(seap)报告基因在ifn-β最小启动子的控制下融合到五个nf-κb和五个ap-1结合位点上。il-1β与hek-blueil-1β细胞表面上的受体il-1r的结合触发信号级联反应，导致nf-κb的激活，并随后产生seap(图2)。[0250]使用该测定评估hek-blueil-1β报告细胞系对il-1β的反应。观察到人il-1β和恒河猴il-1β都可以剂量依赖性地诱导报告基因表达，ec50分别为1.14ng/ml和0.16ng/ml(图2)。[0251]然后使用hek-blueil-1β报告基因测定来评估tavo304在阻断人il-1β驱动的报告基因表达方面的作用。将量逐渐增加的抗体与10ng/ml人il-1β一起应用于hek-blueil-1β报告细胞。过夜孵育后，定量seap报告基因的表达。观察到tavo304剂量依赖性地中和il-1β介导的报告基因表达，ic50为0.12μg/ml(图3)，在il-1β抑制方面比参考抗体refab-1有效得多(＞6倍)。[0252]还采用相同的测定来评估tavo304在阻断恒河猴il-1β驱动的报告基因表达方面的作用。将量逐渐增加的抗体与0.25ng/ml恒河猴il-1β一起应用于hek-blueil-1β报告细胞。观察到tavo304剂量依赖性地中和恒河猴il-1β介导的报告基因表达，ic50为3.6ng/ml(图3)。[0253]实施例3：小鼠抗人il-1β抗体tavo304的人源化[0254]通过将小鼠cdr移植到人种系支架材料上，将小鼠抗人il-1β抗体tavo304人源化。通过回复突变保留了一些关键的小鼠残基，以实现更高的稳定性和更好的表达，同时最大限度地降低免疫原性。对于tavo304，基于ighv3-48＊01设计了1个人源化vh变体(304vh1)，并设计了4个人源化vl变体，其中304vl1和304vl2基于igkv1-39＊01，304vl3和304vl4基于igkv2-40＊01，含有几个回复突变(图4)。通过人源化vh变体与四种人源化vl变体的组合，产生了四种带有igg1fc的人源化tavo304抗体，命名为tavo7376、tavo7377、tavo7378、tavo7379，其中304vh1变体分别与304vl1、304vl2、304vl3和304vl4配对(图4)。[0255]实施例4：人源化tavo304的表达和纯化[0256]按照转染试剂盒说明(thermoscientiflc)将编码tavo7376、tavo7377、tavo7378、tavo7379的重链和轻链的质粒共转染到expi293f细胞中。转染后5天将细胞离心，上清液通过0.2μm过滤器。通过蛋白a琼脂糖柱(gehealthcarelifesciences)上的亲和层析对上清液中表达的抗体进行纯化。通过透析将纯化的抗体缓冲液交换到ph7.2的dpbs中，并通过280nm处的紫外吸光度测定蛋白质浓度。[0257]对纯化的tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379进行sds-page分析(图5)。在还原条件下，所有四种抗体都具有预期分子量的重链和轻链。在非还原条件下，所有四种抗体均以分子量约150kda的主要蛋白质条带形式迁移。[0258]实施例5：人源化tavo304与il-1β结合[0259]采用基于elisa的结合测定来评估人源化tavo304与重组人il-1β的结合。在该测定中，将1μg/ml重组人il-1β(r&d系统)包被在elisa板上。将浓度逐渐增加的人源化tavo304抗体应用到板上，并通过hrp缀合的抗小鼠二抗检测它们与重组人il-1β的结合。观察到所有四种人源化抗体tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379均剂量依赖性地结合重组人il-1β，它们具有相似的效力并且与小鼠抗体tavo304相当(图6)。[0260]四种人源化抗体对恒河猴il-1β的结合也在类似的elisa测定中通过用恒河猴il-1β包被板来评估。所有四种人源化抗体tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379以相似的效力剂量依赖性地结合重组恒河猴il-1β(图6)。[0261]为了评估结合特异性，在基于elisa的结合测定中，使用纯化的重组蛋白，评估了与il-1β同源的细胞因子如il-1α与人源化抗体的结合。在基于elisa的结合测定中，所有四种人源化抗体tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379在1μg/ml下均未显示与人il-1α的显著结合，表明人源化抗体结合il-1β的特异性。[0262]为了进一步测量人源化抗体与固定化重组il-1β的结合，将使用biacore进行表面等离子共振(spr)结合测定。该测定不仅可以测量结合亲和力，还可以测量结合的动力学速率常数和热力学。[0263]实施例6：人源化tavo304中和il-1β的体外报告基因测定[0264]采用hek-blueil-1β报告基因测定来评估tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379在阻断人il-1β驱动的报告基因表达方面的作用。将量逐渐增加的抗体与10ng/ml人il-1β一起应用于hek-blueil-1β报告细胞。过夜孵育后，定量seap报告基因的表达。观察到所有四种人源化抗体剂量依赖性地中和il-1β介导的报告基因表达，它们具有相似的效力(ic50为约0.09μg/ml，图7)。它们中和人il-1β的效力与tavo304相似，并且比参考抗体refab-1有效得多。[0265]还采用相同的测定来评估四种人源化抗体在阻断恒河猴il-1β驱动的报告基因表达方面的作用。将量逐渐增加的抗体与0.25ng/ml恒河猴il-1β一起应用于hek-blueil-1β报告细胞。观察到tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379抗体剂量依赖性地中和恒河猴il-1β介导的报告基因表达，它们具有相似的效力(ic50为约0.018μg/ml，图7)。[0266]实施例7：人源化tavo304中和il-1β的体外基于mrc-5细胞的细胞因子释放测定[0267]il-1β可以驱动人肺成纤维细胞系mrc-5的活化并刺激il-6的释放。建立体外测定以测量人源化tavo304抗体在中和il-1β介导的mrc-5细胞活化中的作用。将量逐渐增加的抗体与1ng/ml人il-1β一起应用于mrc-5细胞(atcc)24小时，诱导细胞释放的il-6可以通过il-6检测试剂盒(r&dsystems)定量。观察到tavo7376、tavo7377、tavo7378和tavo7379抗体剂量依赖性地阻断人il-1β介导的从mrc-5细胞中释放il-6，它们具有相似的效力(ic50为约50ng/ml，图8)，并且在il-1β抑制方面比参考抗体refab-1更有效。[0268]实施例8：人源化抗体的fc工程改造以延长半衰期、降低效应子功能并抵抗蛋白水解降解的[0269]为了改善人源化抗体的pk特征，可以将fc突变引入igg1抗体以延长抗体半衰期。具体而言，已证明m428l/n434s突变可通过增加fcrn结合亲和力来延长抗体半衰期(booth，ramakrishnan等人2018)。此外，l234a/l235afc突变可以消除igg1抗体的adcc和cdc效应子功能(hezareh，hessell等人2001)。因此，产生了基于304vh1具有l234a/l235a/m428l/n434s(aals)突变的人源化igg1重链，其包含如seqidno.31所示的序列。通过将该fc工程改造的304vh1重链与如seqidno.17所示的人源化304vl3轻链配对，产生了具有延长的半衰期和降低的效应子功能的人源化tavo304抗体并命名为tavo11878。[0270]具有aals突变的304vh1重链(seqidno：31)[0271][0272]重链可变结构域的序列加下划线。aals突变加粗。[0273]为了研究fc工程改造的抗体是否具有改善的fcrn结合亲和力，在基于elisa的结合测定中评估了tavo11878和tavo7378与小鼠fcrn的结合。将1μg/ml重组小鼠fcrn(r&d系统)包被在elisa板上。将浓度逐渐增加的tavo11878和tavo7378抗体应用到板上，并通过hrp缀合的抗小鼠二抗检测将它们在ph6.0下与重组fcrn的结合。[0274]为了研究fc工程改造的抗il-1β抗体的pk特征，对tavo11878和tavo7378进行食蟹猴pk模型。相对于具有天然igg1fc的抗体，评价了fc工程改造对改善的pk特征的任何影响。[0275]为了提高人源化抗体的体内稳定性，可以将进一步的fc突变引入igg1抗体以增强抗体对蛋白水解降解的抗性。许多蛋白酶可以在残基222-237(欧盟编号)之间或在该处切割野生型igg抗体。对蛋白水解降解的抗性可以通过改造e233p突变以及g236缺失来实现，残基编号根据欧盟索引。因此，产生了基于304vh1、g236缺失、具有e233p、l234a、l235a、m428l、n434s突变的人源化igg1重链，并且包含如seqidno.32所示的序列。通过将该fc工程改造的304vh1重链与如seqidno.17所示的人源化304vl3轻链配对，产生了具有抗蛋白水解降解、延长的半衰期和降低的效应子功能的人源化tavo304抗体并命名为tavo18378。[0276]g236缺失、具有e233p、l234a、l235a、m428l、n434s突变的304vh1重链(seqidno：32)processconditions.″pharm.res.21：1353-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技术特征：

1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合il-1β并中和、抑制、阻断、消除、降低或干扰il-1β的活性。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或片段是具有如seq id no：1所示的重链可变区和如seq id no：2所示的轻链可变区的小鼠单克隆抗体或抗体片段。3.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段包含重链的互补决定区(cdr)序列hcdr1、hcdr2、hcdr3，所述序列分别如seq id no：3、seq id no：4和seq id no：5所示。4.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段包含轻链的互补决定区(cdr)序列lcdr1、lcdr2、lcdr3，所述序列分别如seq id no：6、seq id no：7和seq id no：8所示。5.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段是人源化抗体或抗体片段。6.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：9所示的重链可变区。7.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：10所示的轻链可变区。8.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：11所示的轻链可变区。9.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：12所示的轻链可变区。10.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：13所示的轻链可变区。11.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：14所示的人igg1重链序列。12.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：15所示的人轻链序列。13.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：16所示的人轻链序列。14.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq idno：17所示的人轻链序列。15.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：18所示的人轻链序列。16.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体是igg1、igg2、igg3或igg4同种型。17.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体具有与亲本野生型抗体相比延长工程改造的抗体的半衰期的一个或多个f
c
突变。18.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体具有与亲本野生型抗体相比增强工程改造的抗体对蛋白酶的蛋白水解降解的抗性的一个或多个f
c
突变。
19.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体具有与亲本野生型抗体相比降低或消除工程改造的抗体的效应子功能的一个或多个f
c
突变。20.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体具有l234a、l235a、m428l和n434s f
c
突变，与亲本野生型抗体相比这些突变延长了工程改造的抗体的半衰期并降低了效应子功能，残基编号根据欧盟索引。21.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：31所示的具有l234a、l235a、m428l、n434s fc突变的人igg1重链。22.根据权利要求1至18所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体具有e233p、l234a、l235a、f405l、m428l和n434s f
c
突变并且g236缺失，其使所述抗体与亲本野生型抗体相比抗蛋白水解降解、延长半衰期和减少工程改造的抗体的效应子功能，根据欧盟索引进行残基编号。23.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述人源化抗体或片段包含如seq id no：32所示的具有e233p、l234a、l235a、m428l、n434s fc突变和g236缺失的人igg1重链。24.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段阻断人il-1β与其受体il-1ri的结合。25.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段阻断猴il-1β与其受体il-1ri的结合。26.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段中和、降低或干扰il-1β对其受体il-1ri的功能活性。27.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段在hek-blue il-1β报告基因测定中中和il-1β驱动的报告基因活化。28.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段在细胞因子释放测定中抑制il-1β驱动的il-6从人成纤维细胞mrc-5中释放。29.根据权利要求1至23所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或片段在小鼠关节炎模型中抑制il-1β驱动的膝关节关节炎。30.一种分离的多核苷酸，其编码根据权利要求1-23所述的其抗il-1β igg抗体。31.一种包含权利要求30所述的多核苷酸的载体。32.根据权利要求31所述的载体，其为表达载体。33.一种包含权利要求31或32所述的载体的宿主细胞。34.产生根据权利要求1-23所述的抗il-1β igg抗体或片段的方法，所述方法包含在表达所述抗il-1β igg抗体或片段的条件下培养权利要求33所述的宿主细胞，并分离所述抗il-1β igg抗体或片段。35.一种测量根据权利要求1-23所述的抗il-1β igg抗体或片段的半衰期的方法。36.一种测量根据权利要求1-23所述的抗il-1β igg抗体或片段对蛋白水解降解的抗性的方法。37.一种测量根据权利要求1-23所述的抗il-1β igg抗体或片段的效应子功能的方法。38.一种在有需要的受试者中il-1β介导的疾病或病症的方法，所述方法包含向所述受试者给予有效量的根据权利要求1-23所述的抗il-1β igg抗体或片段。
39.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是炎症性疾病。40.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是心血管疾病。41.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是肺癌。42.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是2型糖尿病。43.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是乳腺癌。44.根据权利要求38所述的方法，其中所述il-1β介导的疾病或病症是胰腺癌。

技术总结

本公开涉及特异性结合并中和白介素-1β(IL-1β)的抗体，并且涉及此类抗体用于性IL-1β介导的疾病和病症的用途。1β介导的疾病和病症的用途。1β介导的疾病和病症的用途。

技术研发人员：

张镝 S

受保护的技术使用者：

拓维创新生物科技（香港）有限公司

技术研发日：

2020.07.09

技术公布日：

2022/12/30