名词解释
植物细胞组织培养:植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养,并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术 细胞全能性:每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株
脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程
再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官
外植体:由活体植物体上切取下来的,用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等
愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养
过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞,多在植物体切面上产生。
消毒:指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用
灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。
接种来书网:在无菌条件下,用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。
MS培养基:它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。是目前应用最广泛的培养基。特点是无机盐离子浓度较高,有高含量的N、K,硝酸盐量大,营养丰富。
胚胎培养: 指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养,使其发育成完整植物的技术。包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
胚乳培养:是指将胚乳从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下,让其进一步生长发育,以至形成幼苗的过程。
植物离体授粉:指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的
方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术。
花药培养:是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养,以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。
花粉培养:是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。
离体繁殖:指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其在短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。是工厂化育苗的技术基础。
看护培养法:是指用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单个细胞,并使其生长和增殖的方法。
平板培养法:是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合,平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
细胞悬浮培养: 是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
电子差速器初始植板密度:单细胞固体平板培养时,细胞悬浮液接种到琼脂培养基上的最初细胞密度。
原生质体融合:也称体细胞杂交,就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。
原生质体:是指除去了细胞壁后的裸露的植物细胞。
人工种子:亦称体细胞种子,任何一种经人工种皮包被或裸露的,具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。
无病毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒的苗木,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
种质保存:是利用天然或人工创造的适宜环境,保存种质资源,使个体中所含有的遗传物质保持其完整性,有高的活力,能通过繁殖将其遗传特性传递下去。
增殖率:能长出细胞团的单细胞在接种单细胞中所占的比例。
植板率(%)=每个平板形成的细胞团数/每个平板接种的细胞总数
年生产量(Y):决定于每瓶苗数(m)、每周期增殖倍数(X)和年增殖周期数(n),Y=mXn
植物次生代谢产物:植物中一大类并非植物生长发育所必须的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。次生产物在植物中的合成与分解过程称为次生代谢
填空
1)根据培养的材料,植物组织培养分:离体根培养、茎尖培养、叶培养、花与果实培养、胚胎培养、组织培养蚕丝被加工设备、细胞培养、原生质体培养等类型。
2)植物组织培养的发展分为三个阶段:探索阶段、奠基阶段和快速发展阶段 。
3)1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年,White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织培养为一门新兴学科。
4)培养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分、③植物生长调节物质、④水、⑤天然物质、⑥琼脂、⑦活性炭等。
5)培养基最常用的碳源是 蔗糖,使用浓度在1%-5% 常用 3 %。
6)糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的 碳源 ,而且还能维持培养基渗透压。
7)培养基灭菌一般在0.1—0.15MPa的压力下,锅内温度达 121 ℃ ,维持 20 min。
补充:
1、组织培养实验室必要的设备有 超净工作台、 高压灭菌器 、 空调机 、 天平 、 显微镜 、 蒸馏水发生器 、酸度计等 。
2、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物 ,一般用量为 6-10g/L 之间。
3、驯化的目的: 在于提高试管苗对外界环境条件的适应性,提高其光合作用的能力,促使试管苗健壮,提高苗的移裁成活率 。
★4、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值
高:有利于 根的形成和愈伤组织 的形成;
低:有利于 芽 的形成。
5、选择外植体时应选择 ①选择优良的种质、②选健壮的植株 、③选最适的时期 和④选取适宜的大小 。
6、诱导胚状体比诱导芽的优点: (1)数量多 、 (2)速度快 、 (3)结构完整 。
7、试管苗的生态环境: 高温且恒温 、 折叠炕桌高湿 、 弱光 、 无菌 。
★8、筛选培养基的方法:单因子试验法、多因子试验法、光谱实验法
★9、植物培养技术:灭菌、接种、培养、驯化四个环节
★10、试管苗的驯化注意:基质、温、光、水、肥、气的综合管理
11、绝大多数培养植物再生植株时都先经过 愈伤组织 阶段。
★12、愈伤组织形成大致经历 诱导期 、分裂期 和 分化期 三个时期。
13、使用植物生长调节物质时要注意: 种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值 。
★14、愈伤组织的形态发生方式主要有 不定芽方式 和胚状体 方式。
15、组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器官发生)和植株水平的分化
16、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
★17、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养 和 普通茎尖培养 两种类型。前者主要是对 茎尖长度不超过0.1mm,最小只有几十微米的 茎尖进行培养,目的是 获得无病毒植株;后者是对 几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的 培养,目的是离体快繁 。
18、不定芽产生的途径:
一是从外植体上直接产生
二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生。
19、离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。
20、在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;2,4-D利于愈伤组织的形成
21、离体胚的培养分为二种类型: 成熟胚 培养和 幼胚 培养。
★22、胚珠培养分二类: 受精胚珠 的培养和 未受精胚珠 的培养。受精胚珠培养目的一是打破种子的休眠; 二是挽救胚的发育,以获得杂交种。未受精胚珠培养的目的是获得 单倍体植株 。
23、子房培养分 授粉子房 培养和 未授粉子房 的培养。前者培养的目的是挽救胚,后者培养的目的是获得单倍体植株。
24、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉。
★25、离体胚培养方法:成熟胚和幼胚培养
26、胚珠培养的培养基:Nitsch或N5,B5,MS,子房培养的培养基:N6,MS
27、花药和花粉培养的共同特点是利用花粉 (小孢子)染体数目的单倍性,培育出单倍体植株。
28、花药和花粉培养时,花粉发育的最适宜时期是单核中、晚期(单核靠边期)。
29、MS和H培养基适合双子叶植物花药培养; B5培养基适合豆科和十字花科花药培养; N6培养基适合禾谷类作物的花药培养。
30、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。
31、压片染法是检测花粉发育时期的简便有效方法,常用染剂为醋酸洋红。
32、花药培养包括:选择材料-消毒-接种培养-愈合组织生成-分化出单倍体植株。
33、花粉的四大发育途径包括:营养细胞发育、生殖细胞发育、营养和生殖细胞同时发育及花粉均等分裂发育
★34、花粉培养大致过程包括:花粉的分离-预处理-培养过程
35、花药培养一般选择花粉的单核期进行接种
36、较高浓度蔗糖可诱导花粉形成愈伤组织;较低 浓度蔗糖可使愈伤组织分化成苗
37、一般平板培养要求细胞密度每毫升为1x103∽100x103 个。
5-氯-2-戊酮★38、条件培养基是悬浮培养过一段时间组织或细胞的液体培养基。
★39、细胞悬浮培养主要应用于 植物有用物质的生产、诱发和筛选突变体、原生质体培养和细胞器分离、食品生产等。
40、由植物叶片分离单细胞的方法有机械法和酶解法。
★41、细胞悬浮培养方法:成批培养;连续培养
★42、连续培养的种类:(1)半连续培养;(2)连续培养
★43、连续培养的方法:(1)浊度恒定法;(2)化学恒定法
★44、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。
45、原生质体培养基常用的渗透剂是甘露醇和山梨醇。
★45、原生质体的纯化方法有:沉降法、漂浮法和界面法。
★46、原生质体活力的测定:形态识别;染识别。
★47、原生质体融合的方法:无机盐诱导融合;高pH高钙离子法;PEG法;聚乙二醇与高pH高钙相结合的诱导融合;电融合技术
★48、细胞的筛选与鉴定:互补选择;机械分离细胞法;双荧光标记选择法
★49、植株的鉴定:形态学鉴定;细胞学观察;DNA内切图谱分析;同工酶分析
50、原球茎发生型是兰科植物特有的一种快繁方式。
51、离体快繁商业化生产应注意的问题是快繁苗的污染、玻璃化、褐化和黄化。
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52、根据繁殖体的类型人工种子可分为两类:一类是体细胞胚人工种子;另一类是非体细胞胚人工种子。
53、人工种子包裹方法离子交换法;干燥法;冷却法。
54、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。