过氧化氢含量测定

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过氧化氢含量测定

一、实验原理

过氧化氢与硫酸钛反应生成过氧化物-钛复合物黄沉淀，可被硫酸溶解后，在415nm波长下比测定。在一定范围内，其颜深浅与过氧化氢浓度呈线性关系。

二、仪器与试剂

    仪器和用具：研钵；移液管0.2ml×2支，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml×8支；离心机；分光光度计。

试剂：100μmol/L H2O2丙酮试剂：取30%分析纯H2O2 57μl，溶于100ml，再稀释100倍；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸钛；丙酮；浓氨水。 

三、实验方法

1，制作标准曲线：取10ml离心管，编号

透镜体

试剂          1        2        3        4        5        6        7

100umol/L H2O2          0        0.1      0.2      0.4      0.6      0.8      1.0

4℃下预冷丙酮    1.0      0.9      0.8      0.6      0.4      0.2      0

5%硫酸钛        0.1      0.1      0.1      0.1      0.1      0.1      0.1

浓氨水          0.1      0.1      0.1      0.1      0.1      0.1      0.1

4000r/min 离心5min，弃上清液留沉淀，然后再向每管中加2mol硫酸 5ml，摇匀，待沉淀溶解后，在415nm波长下比，测其吸光值，绘制标准曲线。

2，样品提取与测定

（1）  称取小麦叶片1g左右，剪碎加2ml预冷丙酮和少量石英砂，研磨成匀浆后，转入离心管中，再用5ml预冷丙酮洗研钵，加入离心管中，4000r/min 离心5min，弃上清液即为样品提取液。

（2）取样品提取液1ml，弃上清液，沉淀用丙酮反复洗（去除绿），3-5次，然后加入硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后4000r/min 离心5min，弃上清液留沉淀，加入5ml硫酸，摇匀，待沉淀溶解后在415nm波长下比，测其吸光值。

3，结果计算

植物组织中H2O酸洗工艺2含量（umol/g.FW）=

c：浓度（umol）  vt：总体积ml    v1：测定体积ml

四、实验结果

1，绘制标准曲线

2，其他数据

FW=1.008g      vt=7ml          A（样品）=1.472

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3，计算结果

植物组织中H2O2含量（umol/g.FW）==12.2314

五、实验分析

abs耐高温1，本次试验在研磨小麦叶片时，由于丙酮易挥发，所以研磨不充分，而且冲洗研钵时也不完全，导致样品的损失。

2，显反应时，用丙酮反复冲洗绿，并不彻底，可能会对结果造成影响。格兰注塑机射咀头

3，离心前要配平。

4，样品提取完成获得沉淀后，需要用丙酮将绿洗涤去除，防止叶绿素对测定结果的影响。

5，放置较长时间的H2O2标准液，使用前应先进行浓度标定。调浮标

本文发布于:2023-05-21 06:45:33，感谢您对本站的认可！

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