WBC分析
WBC值是由C3700系统提供的：
＊WOC（WBC光学计数）
WOC是以WBC计数进行报告的主要值。在WIC和WOC之间存在临床较大差异时，要对数据进一步评估，以便确定最准确的值。 WIC/WOC相互作用
WIC（WOC阻抗计数）与WOC（WBC光学计数）相互作用，产生可报告的最终WBC值。提供了两种方法，因为没中检测都有强度和局限性。由于每种方法局限性的不同，将两种方法都提供给仪器，以便提高仪器能力，使其能够在存在某些干扰物质和病理条件的情况下，能够提供尽量精确的WBC计数。一个数据分析运算法则会自动对每个检测进行评估，并选择相应的结果进行报告。有CELL－DYN3700系统使用的运算法则分为三个主要区域：1）WOC决策树，用于分析和输出WOC数据；2）WIC决策树，用于分析和输出WIC数据；3）WIC/WOC对照决策树，用于比较两个输出。桃园采集
WOC决策树为WBC计数和分类计数计算WOC结果。它为纠正和报警提供结果评估。最后，运算法则将带有相应报警的WOC输出到WIC／WOC对照决策树。
WIC决策树为纠正和报警提供评估，并将WIC输出到WIC／WOC对照决策树。
WIC/WOC对照决策树对照两个输出，寻结果间的差异。如果存在临床意义上的差异性存在，则对结果进行进一步的评估，以到原因。根据原因的属性（干扰类型），运算法则会根据带有相应报警的（或无报警）WOC值和WIC 值哪个更准确，来决定作为WBC来进行报告。
WOC检测过程
本单元对WOC检测进行概述。详情请见本章节使用光工作台的检测以及WBC 分类分析。
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光通道用于检测WOC数据。使用鞘液试剂制成一份1：51的样品稀释液。WOC检测注射器向鞘液流中注射一定量的该稀释液。样品流随后通过液压集中，使通过WOC流动池（光学石英透明容器）的细胞排成单列。其光源是垂直偏光氦氖激光器。仪器对传统前向角度光散射（1－3°，归为0°）以及直角光散射（70－110°，归为90°）参数进行检测。两个其他散射－窄角度光散射（7－11°，归为10°）和90°去偏光散射（70－110°，归为90°D）接受检测。此技术属于MAPSS TM（用于多角度偏光散射隔离）技术。这四个检测结合起来用于对WBC 验货平台
子分类，并提供形态学标记。
注意：从WIC通道得出的数据也可用于增强标记运算法则。
WBC计数是通过对超出计算机在0°通道上所产生阈值的事件数量的计算确定的。从所有四个检测中得出的信息用于将WBC分类进入五个子：
嗜中性粒细胞
淋巴细胞深水采样器
单核细胞
嗜曙红细胞
嗜碱细胞
WOC数据以散点图的形式进行图形表述。也可以根据操作人员的要求以两个直方图的形式表示。
鞘液试剂
绗缝被
鞘液试剂是WOC分析物的组成部分。在鞘液试剂中进行稀释的WBC保持了与其原始状态最为接近的细胞构成。嗜碱细胞的结构由于嗜碱颗粒可溶于水的属性而发生轻微的变化。
由于RBC的渗透压高于鞘液试剂，因此RBC被鞘液试剂所改变。RBC中的血红蛋白从细胞扩散开来，鞘液试剂中的水分扩散进入细胞。尽管细胞膜保持完好，但RBC此时已经与鞘液有着相同的折射指数了，使其无形中呈现在激光下。
图3.4：光工作台的构成
（图中90°Light Scatter PMT－90°光散射PMT，90°Depolarized Light Scatter PMT－90°去偏光光散射，Polarizer（Horizontal）－偏光装置（水平），Helium-Neon Laser－氦氖激光器（632.8nm）垂直偏光，Front Surface Mirror前部表面镜，Cylindrical Lens柱面透镜，700µm Slit－700µm通光缝隙，Beam Splitter光束分离器，10°Light Scatter Photodiode－10°光散
射光电二极管，Front Surface Mirror前部表面镜，125µm Vertical Slit－125µm 垂直通光缝隙，Imaging Lens成象透镜，WBC Flow Cell－WBC流动池，Obscuration Bar遮光条，Perforated Mirror穿孔镜，0°Light Scatter Photodiode－0°光散射发光二极管）
使用光工作台进行的检测
刚工作台装置（见前图所示）包括了组成流式细胞分析仪的部件。光工作的的主要用途是检测在细胞通过流动池时所散射的光。本单元对该检测过程进行说明。
光源是波长为632.8nm的垂直偏光5－mW的氦氖激光器。该激光束通过一个柱面透镜，该透镜能够使其形状由圆形变为椭圆形。该光束随后通过一个125µm的
通光缝隙，该缝隙可以将较弱的边缘光束阻断。此处理获得大于80µm宽度的光的强度。从而使细胞流
可以在流动池中停留，并暴露在相同的光强度之下。一个成像透镜将激光束聚焦于石英流动池中。
WOC检测注射器将78μL的WOC稀释液缓慢地注射到WOC流动池中的鞘液流中。该样品被液压集中到一个大约直径为30μm的小液流中。这股集中液流使稀释后的细胞排成一列，通过传感区域，从而可以一次对一个细胞进行分析。
由于平均WBC比聚焦激光束小很多，因此细胞不会散射过多激光。如果剩下的所谓轴坐标光可以到达0°检测器，则它会使电子饱和。因此，会通过阻塞条阻止其进入检测器。前向光散射到达一个穿孔镜。0°光散射通过该镜到达0°硅发光二极管检测器。10°光散射从该镜偏转至10°硅发光二极管检测器。
直角散射通过一个700μm 的缝隙，该缝隙阻止源自流动池壁的散射。一台光束分离机随后将直角光散射分割为两个部分。一个部分的光进入90°PMT（光电倍增器管）。剩下的光通过一个水平偏光装置。只有改变了偏光的光（去偏光）才能够通过该偏光装置进入90°D PMT。（PMT的使用，是因为在这样高的角度上所散射的光较少的缘故。）
每个检测器所采集的光信号转换为电信号或脉冲。脉冲根据强度进行数字化，为每个所检测光的角度分配256个通道。
如果脉冲超出0°检测器中的硬件阈值（通道23），则细胞计数器对脉冲进行计数，并对其储存已进行进一步的评估。低于该阈值的脉冲，不会包括在计数中，因此，也不会包括在分类中。如果该原始计数被评估为低于预计值，则仪器会自动继续为进一步的计数阶段计数WBC。对从两个计数阶段中得出的结果进行平均。
从每个检测器中得出的信息，收集在目录模式中。该格式对从四个规格中的每一个中的通道信息进行储存。数据随后用于对分类的确定。
WBC分类分析
光散射信息以地理形式呈现在散点图格式中。（数据也可以以直方图形式提供，根据操作人员的要求。）每个所分析的细胞通过散点图上的一个点位来提供。这些点位位于由X轴和Y轴上指定的通道信息交叉点所确定的点位上。例如，如果细胞落在X轴上的通道50和Y轴上的通道50上，则该点落在两个通道的交叉点上。
散射信息会落在不同的点位上，以便得到不同的信息。C3700系统使用散点图将WBC分类到5个颜代码的子中：
嗜中性粒细胞（黄）
淋巴细胞（蓝）
单核细胞（紫）
嗜曙红细胞（绿）
嗜碱细胞（白）
注意：嗜碱细胞尽管是以白显示的，但在彩打印件上则是以黑表示。
WBC散点图
图3.5：单核－多形核白细胞散射
单核－多形核白细胞分割
连接扣件
散射信息位于Y轴上的90°散点，和X轴上的10°散点。(90°/10°散射点显示在前图中。)两个细胞可以从显示屏上清楚地看到。单核细胞落在三点图左下角的串中，多型核白细胞落在其上部和右侧的串中。
