第49卷第10期2021年5月广㊀州㊀化㊀工
Guangzhou Chemical Industry
水貂肉Vol.49No.10May.2021
王㊀旭
(云南省昆虫生物医药研发重点实验室(大理大学)，大理大学药学院，云南㊀大理㊀671000)
摘㊀要：以假酸浆子胶质为片剂辅料制备美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片㊂在单因素试验的基础上，以美洲大蠊提取物胃漂
浮缓释片中尿嘧啶体外释放百分率为评价指标进行正交试验优化美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片处方㊂优化处方为美洲大蠊提取物10g，羟丙甲基纤维素K100M 22g，假酸浆子胶质冻干品4g，十八醇12g，乙基纤维素12g,1%硬脂酸镁㊂应用假酸浆子胶质制备的美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片制备方法简单可行㊂ 关键词：美洲大蠊提取物；假酸浆子胶质；胃漂浮缓释片；制备㊀
中图分类号:R9
㊀文献标志码:A
文章编号:1001-9677(2021)010-0070-04
㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀
作者简介：王旭，在读硕士研究生，专业方向为药物新剂与新技术型研究㊂
Preparation of Intragastric Floating Sustained -Release
Tablets of Periplaneta Americana Extract
WANG Xu
(Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R &D (Dali University),
College of Pharmacy,Dali University,Yunnan Dali 671000,China)
Abstract :To prepare intragastric floating sustained -release tablets of Periplaneta americana extract
with gum from Nicandra physaloides (L.)Gaertn seeds (GNPS)as tablet excipient.Based on single factor test,the orthogonal experiment was conducted to optimize the formulation of intragastric floating sustained -release tablets of Periplaneta americana extract (GFSRTPA),using the percentage released in vitro uracil in GFSRTPA as evaluation indexes.The optimal formulation of GFSRTPA was made up of Periplaneta americana extract 10g,HPMC K100M 22g,GNPS 4g,octadecanol 12g,ethylcellulose 12g,1%magnesium stearate.The prepared method of GFSRTPA with GNPS is simple and feasible.
Key words :Periplaneta americana extract;gum from Nicandra physaloides (L.)Gaertn seeds;intragastric floating sustained -release tablets;preparation
胃溃疡是一种常见的消化道疾病，一般认为其发病机制为侵袭因素和保护性因素之间失去平衡所导致[1]㊂美洲大蠊(Periplaneta americana Linnaeus)，俗称蟑螂，近年研究表明美洲大蠊提取物对消化系统疾病如消化道溃疡㊁胃溃疡㊁上消化道出血等具有较好的疗效[2]㊂邹俊波等[3]研究表明美洲大蠊提取物有抗氧自由基及降低NO 含有量的作用，是其对抗乙醇诱导急性胃粘膜损伤的作用机制之一㊂康复新液是美洲大蠊提取物制成的液体制剂，用于消化性溃疡，但药液会随胃排空很快离开病灶部位，作用时间较短，需一日服用三次㊂胃漂浮缓释片是服用后较长时间滞留胃液内㊁控制药物缓慢释放的制剂㊂制备美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片，可以延长有效成分在胃内的滞留时间，提高有效成分
在病灶部位的作用时间㊂李远辉[4]研究表明以康复新液冻干粉为主药的胃漂浮片具有良好的体外缓释行为㊂假酸浆子胶质(Gum from Nicandra physaloides (L.)Gaertn seeds,GNPS)无㊁无味㊁无毒，在西南地区广为食用，俗称 冰粉 ㊂研究表明假酸浆子胶质是一种大分子果胶多糖，分子量为1.6ˑ106u [5]㊂课题组何海花等[6]对GNPS 制备美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片(intragastric floating sustained -release tablets of Periplaneta americana extract,GFSRTPA)进行体
外释药评价，具有良好的体外缓释特征㊂在此基础上，本文采用GNPS 为助漂剂制备GFSRTPA，通过单因素考察与正交试验优化处方制备GFSRTPA，为GNPS 应用于胃漂浮缓释片提供参考㊂
1㊀仪器与材料
1.1㊀仪㊀器
Agilent1200型高效液相谱仪，美国Agilent 公司;CP224C 型分析天平，奥豪斯仪器有限公司;RC8MD 型溶出实验仪，天津市天大天发科技有限公司;RZD -8D 型取样收集系统，天津天大天发科技有限公司;101-3E 型鼓风干燥机，北京市永光明医疗器械有限公司;YY0221-1995型旋转式压片机，上海天和制药机械厂;KQ5200DB 型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司;GOLD -SIM 型冻干机，美国SIM 国际集团有限公司㊂
1.2㊀药物与试剂
HSCSB
美洲大蠊提取物，云南省昆虫生物医药研发重点实验室提供；假酸浆子胶质冻干品，自制；乙基纤维素(批号15-12),
第49卷第10期王旭：美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片制备研究71
中医推拿按摩床㊀
安徽山河药用辅料股份有限公司；十八醇(批号105220151101)，湖南尔康制药股份有限公司;HPMC K100M (批号200423)，安徽山河药用辅料股份有限公司;HPMC K15M(批号200314)，安徽山河药用辅料股份有限公司; HPMC K4M(批号190211)，安徽山河药用辅料股份有限公司；尿嘧啶(批号100469-201302)，中国食品药品检定研究所；其它试剂为分析纯㊂
2㊀方法与结果
2.1㊀胃漂浮缓释片的制备
辅料过80目筛，采用等量递加法，将十八醇㊁乙基纤维素㊁HPMC㊁溶胀的假酸浆子胶质冻干品与美洲大蠊提取物混合,50%乙醇制软材，过16目筛制湿颗粒,50ħ烘干3h，整粒，加1%硬脂酸镁，压片，即得GFSRTPA㊂
2.2㊀指标成分含量测定
2.2.1㊀溶液的制备
对照品溶液的配制：精密称取尿嘧啶对照品0.0133g，置于100mL容量瓶中，加入适量超纯水，超声溶解，加超纯水定容至刻度，即得尿嘧啶对照品溶液，浓度为133μg/mL㊂供试品溶液的配制：取GFSRTPA研磨成细粉，取0.34g 加入锥形瓶中，加入100mL超纯水，超声30min，取出，放置室温，抽滤，续滤液转移容置100mL容量瓶中，定容，即得供试品溶液㊂
阴性样品溶液的配制：取辅料最大量加入锥形瓶中，加入100mL超纯水，超声30min，取出，放置室温，抽滤，取续滤液转移容置100mL容量瓶中，定容，即得阴性样品溶液㊂2.2.2㊀谱条件
谱柱:ZORBAX SB-C18(4.6mmˑ250mm,5μm)谱柱，含预柱ZORBAX SB-C18(4.6mmˑ12.5mm,5μm)；流动相:(A)超纯水,(B)乙腈；梯度洗脱(0min,2%B;2min, 2%B;10min,10%B;20min,10%B;25min,2%B)，流速0.6mL/min;DAD检测器，检测波长257nm，柱温25ħ，进样量10
μL㊂
图1㊀对照品，供试品和阴性样品的HPLC图Fig.1㊀HPLC chromatograms of reference,test sample and
negative sample
分别精密移取对照品溶液㊁供试品溶液和阴性样品溶液1mL，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按上述谱条件进高效液相谱仪测定，结果见图1㊂
2.2.3㊀线性关系
取尿嘧啶对照品溶液，加入超纯水制成浓度为13.3㊁11.97㊁10.64㊁9.31㊁7.98㊁6.65㊁5.32㊁3.99㊁2.66㊁1.33㊁0.665μg/mL的尿嘧啶对照品溶液，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按谱条件进样测定，记录峰面积，对照品的峰面积Y与含量X(μg)做线性回归，绘制标准曲线，计算回归方程㊂尿嘧啶线性方程为Y=7083.3X-8.7794,R2为0.9992，尿嘧啶在0.00665~0.133μg范围内线性关系良好㊂2.2.4㊀精密度试验
取尿嘧啶对照品溶液1mL，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按谱条件重复进样6次，记录尿嘧啶的峰面积，计算RSD㊂RSD为0.15%，表明精密度良好㊂
2.2.5㊀稳定性试验
取供试品溶液1mL，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按谱条件测定，分别在0㊁1㊁2㊁4㊁6㊁8㊁10㊁12㊁24h 进样10μL，记录尿嘧啶的峰面积，计算RSD㊂RSD为1.38%，表明24h内稳定性良好㊂
2.2.6㊀重复性试验
按供试品溶液制备方法平行制备6份供试品溶液，取1mL 溶液，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按谱条件进样，记录尿嘧啶的峰面积，计算RSD㊂RSD为1.31%，重复性好㊂
2.2.7㊀加样回收率
取6mL供试品溶液10份，一份进样测定含量，其余9份分为三组，即高㊁中㊁低三组，低剂量组加入0.05mL尿嘧啶对照品溶液，中剂量组加入0.1mL尿嘧啶对照品溶液，高剂量组加入0.15mL尿嘧啶对照品溶液，分别定容至10mL容量瓶中，过ϕ0.22μm滤膜，放入棕进样瓶内，按谱条件进样，计算尿嘧啶回收率，高㊁中㊁低三组的回收率分别为98.91%㊁99.80%㊁100.47%，在95%~105%范围内,RSD 为0.23%㊁0.76%㊁0.18%，加样回收率良好㊂
2.3㊀体外释放度测定
选择‘中国药典“2015年版四部通则中0931项下第二法桨法，以0.1moL/L盐酸500mL为释放介质，温度设定37ħ，转速为100r/min，取样时间设定为0.5㊁1㊁2㊁4㊁6㊁8㊁10㊁12h，在各取样点取样5mL，并及时补充同等温度的5mL新鲜释放介质，取样液水浴蒸干,1mL蒸馏水溶解，过ϕ0.22μm
72㊀广㊀州㊀化㊀工2021年5月
滤膜，续滤液进样，按谱条件进样测定，计算药物释放百分率㊂
2.4㊀单因素考察
2.4.1㊀HPMC 型号对释放百分率影响
固定其他条件不变，考察不同型号的HPMC K4M㊁HPMC K15M㊁HPMC K100M 对GFSRTPA 释放百分率的影响㊂按处方制备不同型号HPMC 的GFSRTPA，测定尿嘧啶释放百分率，考察不同型号的HPMC 对药物释放百分率的影响㊂以药物释放百分率对时间做图，结果见图
2㊂
图2㊀不同型号HPMC 的GFSRTPA 释放百分率曲线图Fig.2㊀Release percentage curve of GFSRTPA with different
types of HPMC 0.5h 时HPMC K4M㊁HPMC K15M㊁HPMC K100M 释放百分率分别为33.23%㊁28.61%㊁26.21%，其中HPMC K4M 型号释放百分率最大,HPMC K100M 型号释放百分率最小;2h 时HPMC K4M㊁HPMC K15M㊁HPMC K100M 释放百分率分别为48.59%㊁52.82%㊁47.66%，其中HPMC K15M 型号释放百分率最大,HPMC K100M 型号释放百分率最小;6h 时HPMC K4M㊁HPMC K15M㊁HPMC K100M 释放百分率分别为79.22%㊁78.84%㊁73.47%，其中HPMC K15M 型号释放百分率最大,HPMC K100M 型号释放百分率最小;10h 时HPMC K4M㊁HPMC K15M㊁HPMC K100M 释放百分率分别为85.57%㊁89.47%㊁85.10%，其中HPMC K4M 型号释放百分率最大,HPMC K100M 型号释放百分率最小㊂总体看各型号释放百分率相差不大，综合考虑，选择释放百分率较小的型号，故选择HPMC K100M㊂
2.4.2㊀GNPS
量对释放百分率影响
图3㊀不同GNPS 用量的GFSRTPA 释放百分率曲线图Fig.3㊀Release percentage curve of GFSRTPA with different
GNPS dosages
固定其他条件不变，选用HPMC 型号为HPMC K100M，将辅料等量递加混合均匀，选择GNPS 冻干品的用量为2㊁4㊁6g，制备GFSRTPA，测定尿嘧啶释放百分率，考察不同用量的GNPS 冻干品对药物释放百分率的影响㊂以药物释放百分率对时间做图，结果见图3㊂
0.5h 时,GNPS 用量为2g㊁4g㊁6g 的释放百分率分别为26.87%㊁29.28%㊁30.92%，其中用量为6g 的释放百分率最大，用量为2g 的释放百分率最小;2h 时,GNPS 用量为2g㊁4g㊁6g 的释放百分率分别为48.49%㊁55.02%㊁55.04%，其中用量为6g 的释放百分率最大，用量为2g 的释放百分率最小;6h 时,GNPS 用量为2g㊁4g㊁6g 的释放百分率分别为78.26%㊁70.01%㊁84.80%，其中用量为6g 的释放百分率最大，用量为4g 的释放百分率最小;10h 时,GNPS 用量为2g㊁4g㊁6g 的释放百分率分别为83.09%㊁88.87%㊁92.97%，其中用量为6g 的释放百分率最大，用量为2g 的释放百分率最小㊂
2.5㊀正交试验
选用HPMC K100M㊁GNPS㊁十八醇和乙基纤维素的用量为考察因素，每个因素设定三个水平，进行
正交设计，以尿嘧啶释放百分率为指标，根据2015版‘中国药典“四部缓控释剂指导原则，设定三个标准,2h 释放百分率(Q 2)以30%为标准;6h 释放百分率(Q 6)以60%为标准;10h 释放百分率(Q 10)以85%为标准，采用综合评分法对正交试验结果分析，即综合评分K 的计算公式为:K =|Q 2-30%|+|Q 6-60%|+|Q 10-85%|,K 值越小说明优化条件越佳[7]㊂因素水平见表1，正交试验结果见表2，方差分析见表3㊂
表1㊀因素水平表Table 1㊀Factor level table
水平因素
A(HPMC K100M)B (GNPS)
C (十八醇)
D(乙基纤维素)12221212225415153
28
6
18
18
表2㊀正交试验及结果
电镀铜包钢
Table 2㊀Orthogonal test and results
实验号A B C D 实验结果K 1111140.832122229.163133356.724212362.115223134.856231235.747313265.928321340.269碳油
3
3
2
1
38.75
均值142.23756.28738.94338.143均值244.23334.75743.34043.607均值348.31043.73752.49753.030极差
6.07321.53013.55414.887
第49卷第10期王旭：美洲大蠊提取物胃漂浮缓释片制备研究
73
㊀表3㊀方差分析
Table 3㊀Analysis of variance
因素偏差平方和自由度F 比F 临界值显著性HPMC K100M 57.491
2 1.0009.000GNPS
701.684212.205
9.000∗
十八醇286.8682 4.9909.000乙基纤维素
340.2602 5.918
9.000
误差57.492
由表2可各因素对尿嘧啶释放百分率的影响为B>D>C>A，直观分析最佳处方为A 1B 2C 1D 1，方差分析结果表明,B 有显著性差异，拟定GFSRTPA 处方为HPMC K100M 22g,GNPS 4g，十八醇12g，乙基纤维素12g，美洲大蠊提取物10g,1%硬脂酸镁㊂
2.6㊀验证试验
按上述确定的最佳处方，制备三批GFSRTPA，测定尿嘧啶释放百分率㊂结果见图4㊂GFSRTPA 的12h 释放百分率为91.44%ʃ0.44%，结果表明，最佳处方的重现性良好
㊂
图4㊀三批GFSRTPA 尿嘧啶释放百分率曲线图Fig.4㊀Uracil release percentage curve of GFSRTPA
in three batches
3㊀结㊀论
(1)胃漂浮片依据动力学平衡原理，亲水凝胶材料吸水膨胀在片剂表面形成凝胶，维持胃漂浮片的密度小于1，保持漂浮性，控制药物释放[8]㊂本实验用HPMC 为胃漂浮缓释片的骨架材料，以GNPS 为助漂剂，和其他辅料混合制备GFSRTPA,HPMC 遇水形成凝胶，控制药物释放㊂
(2)胃漂浮片的体外释放度测定采用的装置通常为篮法[9]
和桨法[10]，因需要观察片剂的体外漂浮性能，故选用桨法装置㊂美洲大蠊的主要成分有氨基酸类㊁核苷类㊁有机酸㊁小分子肽㊁生物碱类物质㊁香豆素类化合物[11-16]等成分，尚未有研
究指出美洲大蠊产生作用的特定成分，因此，本实验选择核苷类中含量较高的尿嘧啶为指标成分，测定体外释放度㊂
(3)实验通过单因素考察，进行正交试验设计筛选优化处方，确定了处方为HPMC K100M 22g,GNPS 4g，十八醇12g，乙基纤维素12g，美洲大蠊提取物10g,1%硬脂酸镁，采用湿法制粒压片法制备GFS
RTPA，实验结果表明,12h 内GFSRTPA 缓慢释放药物,12h GFSRTPA 的尿嘧啶的体外释放百分率为91.44%ʃ0.44%，制备方法简单，易于操作㊂
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