陈迪勇;宋光林;李荣华;李占彬
【摘 要】目的:建立内标—标准曲线法定量测定血液中的乙醇含量的气相谱方法,并与SF/Z JD0107001-2010进行比较.方法:用移液管量取0.20 mL血样及1.00 mL 40.0 μg/mL叔丁醇内标工作液加入2.0 mL塑料离心管中,混合均匀,离心后将清液通过0.45 μm的无机滤膜过滤后装入2.0 mL进样瓶中密封,应用自动进样器进样,采用ZB-624柱分离样品中的乙醇和叔丁醇,然后采用内标—曲线法定量分析血液中的乙醇含量.结果:内标—标准曲线法定量分析血液中的乙醇含量,乙醇的加标回收率在97.6 ％～101.0％,相对标准偏差小于2.0％,且重现性好.结论:该法分析血液中的乙醇含量能满足检测工作要求,相较顶空进样—气相谱法更简单,难度也更小.
【期刊名称】洗衣机面板《贵州科学》
离心制丸机【年(卷),期】2016(034)001
【总页数】4页(P81-84)
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钛雷【关键词】内标—标准曲线法;气相谱法;血液;乙醇
【作 者】陈迪勇;宋光林;李荣华;李占彬
【作者单位】贵州省分析测试研究院,贵州贵阳550002;贵州省分析测试研究院,贵州贵阳550002;贵州省分析测试研究院,贵州贵阳550002;贵州省分析测试研究院,贵州贵阳550002
【正文语种】中 文
【中图分类】DF795.1
根据近年世界卫生组织交通事故调查显示，道路交通事故中大约有50 %～60 %与酒后驾车有关，酒后驾车造成了重大的人员伤亡和财产损失。
随着国家对酒驾打击力度的加大，酒驾的司法鉴定工作越来越重要。怎样能够更简单，快捷，准确的测定血液中乙醇含量是司法鉴定工作者们所面临的问题。本试验采用内标-标准曲线气相谱法，通过对待检血样的检测和谱条件的摸索，从而实现检测方法的改进[1，2]。
1.1 仪器和试剂
气相谱仪：Agilent 7890A气相谱仪及工作站，FID检测器；
叔丁醇：分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司；
无水乙醇：谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司。
1.2 谱条件
谱柱为phenomenex的ZB-624毛细柱(60 m×0.25 mm×1.40 μm) 。柱温50 ℃保持10 min，以10 ℃/min的升温速率升至200 ℃，共25 min；汽化室温度200 ℃，检测器温度250 ℃；载气(氮气)流速：1.2 mL/min；进样方式：自动进样器，分流比5∶1 (可根据实际情况调整分流比以改变检出限)，进样量1μL 。
1.3 试验步骤
1.3.1 样品制备
用移液管量取0.20 mL血样及1.00 mL40.0 g/mL叔丁醇内标工作液加入2.0 mL塑料离心管中，混合均匀，离心后将清液通过0.45 μm的无机滤膜过滤后装入2.0 mL进样瓶中密封。用同样方法制备平行样，供上机测试。
1.3.2 乙醇含量的测定
按1.3.1步骤制备样品，按1.2条件测定样品中乙醇的含量。
1.3.3 试验方法可行性[3]
用移液管量取0.20 mL 0.20 mg/mL的乙醇水溶液及1.00 mL 40.0 g/mL叔丁醇内标工作液加入2.0 mL塑料离心管中，混合均匀，离心后将清液通过0.45 μm的无机滤膜过滤后装入2.0 mL进样瓶中密封，上机测试，其对比谱图见图1。从图1可知，乙醇、叔丁醇的出峰时间分别为7.673、10.377，试验条件能达到分离效果，试验方法可行。
1.3.4 方法的重现性
在1.2的谱条件下，对1.3.3制备的样品做
重现性试验，其乙醇的气相谱保留时间(t1=7.669 min、t2=7.664 min、t3=7.676 min)的相对偏差为0.078，叔丁醇的气相谱保留时间(t1=10.372 min、t2=10.372 min、t3=10.386 min)的相对偏差为0.078，此方法的重现性较好，见图2。
1.3.5 计算方法的确定[3]
(a)内标—标准曲线的建立
将配制好的乙醇对照品溶液分别进样，以乙醇和叔丁醇的峰面积比为纵坐标，乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，见图3。
(b)样品中乙醇含量的计算
将1.3.1中制备的血样在1.2的谱条件下上机测试，测试结果按图3中的工作曲线方程计算样品中的乙醇浓度。
(c)平行试验
按以上步骤对同一试样进行平行试验，结果见图4。
按图3中的工作曲线方程计算样品中的乙醇浓度，结果见表2。
按下式计算相对相差：
相对相差
式中：
C1、C2为样品平行定量测定的结果；
C为样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2。
由上式计算得到血样2的相对相差为1.21 %，符合标准中没有凝血块的样相对相差不超过5 %的要求。
1.3.6 回收率试验
分别向血样2中加入一定量的10.0 mg/mL乙醇的水溶液，混合均匀后按1.3.1的方法制备血样，在1.2的谱条件下上机测试，按图3中的工作曲线方程计算样品中的乙醇浓度，然后计算加标回收率，结果见表3。
实验结果表明，用内标—标准曲线法定量测定血液中的乙醇含量，乙醇的加标回收率在97.6 %～101.0 %，平均回收率在99.0 %，相对标准偏差为1.80 %。本方法采用样品直接加内标物进样检测，测定方法简便，快捷，不受样品中乙醇浓度的影响，且能避免系统误差引起的干扰，测定结果准确，方法重现性好，该法分析血样中的乙醇含量能满足司法检测工作要求。
【相关文献】
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硒肥料
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Judicial authentication administration.Determination of ethanol in blood by Headspace Gas Chromatography：SF/Z JD0107001-2010[S].Institute of forensic science and technology，2010.
