网络出版时间：２０２０－７－２８１６：５４ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２００７２８．１５０８．０８８．ｈｔｍｌ
杨志一１，郑 荃１，车兴念１，张丽萍１，周丹丹１，尹崇高２，李洪利３，刘雨清１
（潍坊医学院１．病理学教研室、２．护理学院、３．医学研究实验中心，山东潍坊 ２６１０５３）
收稿日期：２０２０－０３－１８，修回日期：２０２０－０５－０８
基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１７０２９３２，８１６４１１１１，
８１４０２３８９）；山东省自然科学基金资助项目（ＮｏＺＲ２０１９ＭＨ０３３）；潍坊市科学技术发展计划资助项目（Ｎｏ２０１８ＧＸ０７７）
作者简介：杨志一（
船用锚机
无纺布折叠机
玻璃钢蓄水池
合金加工１９９０－），女，硕士生，研究方向：肿瘤病理学，Ｅ ｍａｉｌ：ｙｚｙｅｍｉｌｉａ＠１６３．ｃｏｍ；
刘雨清（１９６２－），女，硕士，教授，研究方向：肿瘤病理学，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：８９３３２６６８４＠ｑｑ．ｃｏｍ家用供暖系统
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２０．０８．０１７
文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２０）０８－１１２４－０６中国图书分类号：Ｒ３２９ ２４；Ｒ３４２ ２；Ｒ７３ ３７；Ｒ７３４ ２０２ ２；Ｒ９７７ ６
摘要：目的 探讨长链非编码ＲＮＡ Ｈ１９（ｌｏｎｇｎｏｎ ｃｏｄｉｎｇＲＮＡ Ｈ１９，ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９）对肺腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 ｑＲＴ ＰＣＲ检测ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９在伴或不伴淋巴结转移的肺腺癌组织中，肺腺癌细胞系Ａ５４９，ＮＣＩ Ｈ１２９９以及人正常支气管上皮细胞系ＢＥＡＳ ２Ｂ中的表达；构建ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９的ｓｉＲＮＡ干扰载体及过表达载体进行细胞转染；ＣＣＫ ８增殖实验及Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞侵袭实验检测转染前后肺腺癌细胞的增殖、侵袭能力；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测转染前后肺腺癌细胞中上皮标志物上皮钙黏着蛋白（Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ），间质标志物波形蛋白（
Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）的表达。结果 ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９在伴有淋巴结转移的肺腺癌组织中的表达明显高于不伴淋巴结转移的肺腺癌组织（Ｐ＜０ ０５），在Ａ５４９、ＮＣＩ Ｈ１２９９细胞中的表达均明显高于Ｂ
ＥＡＳ ２Ｂ（Ｐ＜０ ０５）；过表达ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９后肺腺癌细胞增殖及侵袭能力明显上升，
Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达明显下调而Ｖ
ｉｍｅｎｔｉｎ的表达明显上调，而敲减ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９后结果与之相反。结论 ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９可促进肺腺癌细胞Ａ５４９，ＮＣＩ Ｈ１２９９的上皮－间充质转化（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉ ｔｉｏｎ，ＥＭＴ），进而促进其增殖与侵袭能力。
关键词：肺腺癌；长链非编码ＲＮＡ Ｈ１９；上皮－间充质转化；增殖；侵袭；转移
开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：
在过去的３０年间，癌症的总死亡率持续下降
２７％，使实际癌症死亡人数比死亡率保持在高峰时
期的预期死亡人数减少约２００万人［１］
。大多数癌症
的存活率呈稳步上升趋势，与之相比，肺癌的进展一直比较缓慢，部分原因是超过半数病例在晚期阶段才得以诊断，肺癌相关死亡以≥４０岁男性和６０岁女性为主；另一方面则由于侵袭转移，肺癌患者死亡
率居高不下［２］。肺腺癌是肺癌中占比最多的组织
学类型，是发病率最高的肺癌类型之一，其死亡率也较高。
上皮－间充质转化（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎ ｓｉｔｉｏｎ，ＥＭＴ）的主要特征是胞间粘附的丧失，以致迁移侵袭能力增加。从静止上皮细胞到活动间充质细胞的反式分化对于胚胎发生、纤维化、组织修复、伤
口愈合和肿瘤进展至关重要［
３］
。在癌症中，ＥＭＴ多发生在转移的初始阶段，而肺癌的诊断大多在晚期
阶段，化疗耐药性使其难度增加［４］
。因而更有
潜力的标志物和替代手段愈加需要。在人类基因组中，长链非编码ＲＮＡ Ｈ１９（ｌｏｎｇｎｏｎ ｃｏｄｉｎｇ
打地鼠游戏机ＲＮＡ Ｈ１９
，ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９）定位于１１ｐ１５ ５［５］
。在癌症中，ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９通常高表达，并与癌症发展的许
多方面有关［
６］
。ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９可促进肺癌细胞的耐药性或调控ｍｉＲＮＡ从而促进肺癌细胞的凋亡
等［
７－８］
，但其是否参与肺腺癌的淋巴结转移或远处转移以及侵袭转移的机制仍未完全清楚。因此本研
究通过检测ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９在伴或不伴淋巴结转移的肺腺癌组织中的表达情况，探讨ＬｎｃＲＮＡ Ｈ１９对肺腺癌细胞增殖侵袭能力的影响，为预防肺腺癌的侵袭转移提供潜在靶点。１ 材料与方法１．１ 材料
１．１．１ 主要试剂 ＱｕａｎｔｉＮｏｖａＳＹＢＲＧｒｅｅｎＰＣＲＫｉｔ购自德国Ｑｉａｇｅｎ公司，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室购自Ｃｏｒｎｉｎｇ公司，Ｍａｔｒｉｇｅｌ购自ＢＤ公司，抗体鼠抗人β ａｃｔｉｎ单抗（ａｂ８２２６）（１∶１０００）、鼠抗人Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ单抗（
ａｂ１４１６）（１∶５００）、鼠抗人Ｖｉｍｅｎｔｉｎ单抗（ａｂ８９７８）（１∶１０００）购自Ａｂｃａｍ公司。
１．１．２ 组织样本 收集伴或不伴淋巴结转移的肺
·４
２１１·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２０Ａｕｇ；３６（８）：１１２４～９
