1、 取材：放入2.5%戊二醛溶液中固定2-4h(4℃可保存1-2周，冷冻可保存2年)
注：不可用自来水冲洗，被钳、镊夹取造成机械损伤的组织不可 部分可取较大面积，但厚度必须小于1mm（戊二醛固定能力小于0.5mm）
2、漂洗：牙签取出样品至新的1.5ml离心管，用0.1M pH7.0磷酸缓冲液（PBS）漂洗样品三次（摇床），每次15min 3、锇酸固定与再漂洗：1%锇酸溶液固定样品1-2h（临用前计算用量≤50ul/样，用0.1M PBS将2%锇酸稀释至1%，通风橱操作），吸出固定液，用0.1M pH7.0 PBS漂洗样品三次，每次15min
电极片>镜面银油墨 注：漂洗以清除固定液，避免产生沉淀物干扰结构观察
4、脱水剂梯度脱水：用梯度浓度（光固化打印50%，70%，80%，90%和95%）乙醇溶液对样品进行脱水处理，每个浓度处理15min再用100%乙醇处理20min （乙醇细胞内抽提少，但与包埋剂 相容性差）
最后用纯丙酮处理20min（若包埋剂为Epon改用环氧乙烷置换）
注：脱水以清除游离水以便包埋剂均匀渗透；脱水剂易吸收空气中水分，密封，置换时应该迅速
由低到高逐级脱水而不能急剧脱水，更换溶液时应迅速，以免组织内外产生气泡。
5、包埋剂梯度渗透：①用包埋剂丙酮混合液（V/V=1/1）处理样品条纹码1h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)
②用包埋剂丙酮混合液（V/V=3/1）处理样品3h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)
③纯包埋剂渗透样品过夜：将样品移至干燥的新离心管中，常温过夜 (所用器具均应干燥)
注：样品周围不能有气泡
6、加热聚合：牙签取出经渗透处理的样品至0.5ml干燥离心管（预先装入约300 ul包埋剂），加热聚合仪70℃加热过夜。
7、莱卡EM UC 7超薄切片仪修快、切片（50-70nm）
8、正染：塑料包埋模具（刀划几道缝隙），染时温度低影响染效果，冬天空调
醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液100ul染（15min-1h），双蒸水冲洗频偏
柠檬酸铅100ul染15min（极易吸收空气中CO2产生PbCO3 ,染时毋对着说话、呼吸，同时放置数块NaOH）
9、日立H-7650透射电镜观察
spurr包埋剂配制：ERL 2.5g
NSA 5.2 g 混合均匀后再加入催化剂DMAE，搅拌30min；低温干燥保存
DER 2.5 g
DMAE 0.1g
宜新鲜配制但由于使用期限长(3-4天)，混合物可在使用前一天制备。Spurr树脂是嗜氧，聚合时不加盖
不同处理方法
7d后将培养基上的纤维素膜取出用水冲洗（除去膜表面杂质和残余培养基），浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH溶液80℃保温一小时（去除非纤维结构和残余菌体），取出用去离子水冲洗至pH中性后干燥
碱煮：浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH中，100℃煮沸30min，除去残留菌体与培养基杂质，再用0.5%的乙酸浸泡5min，后用水多次冲洗，至薄膜呈乳白半透明，用吸水纸吸取表面水分，测试pH值，80℃干燥至恒重
水煮：浸泡于蒸馏水中，100℃煮沸30min，后用水多次冲洗，用吸水纸吸取表面水分，测试pH值，80℃干燥至恒重
实验步骤
1，7d后将培养基上的纤维素膜取出用水冲洗，浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH，取出冲洗后干燥
2，挖取一小块作为对照组A，电镜下观察微观结构
3，挖取两小块作为实验组B与C，分别碱煮与水煮，之后干燥，电镜下观察微观结构
实际应用
热流道模具1， 细菌纤维素有大表面积网状结构，因此具有很强抗压抗拉能力。（造纸，纸张耐折度与强度能够大幅度提高）
2， 细菌纤维素内部有很多“孔道"，因而有良好的透水和透气性。（人造皮肤，创可贴，纱布，绷带）
