医学创新研究2008年8月第5卷第24期M ED I C I N E I N N O V A TI O N R E SE A R C H
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承德市中心医院病理科(河北承德067000)
【中图分类号】R363【文献标识码】A【文章编号11671—782112008)一0180-01
【摘要】目的探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段。方法采用石蜡切片进行脱蜡，修复抗原直接免疫荧光染，将染结果与冰冻切片染结果进行比较。结果石蜡包埋肾组织与冰冻切片染的诊断符合率达100％，而石蜡切片具有组织结构保存好，免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点。结论石蜡切片免疫荧光染可做为冰冻切片免疫荧光染的补充手段。 【关键词】石蜡包埋肾组织免疫荧光染病理诊断
1材料和方法
1．1石蜡包埋肾组织免疫荧光染操作步骤①固定：10％中性甲醛缓冲液固定12h以上；②包埋：70％～100％梯度酒精脱水，每步30r ai n，二甲苯透明20rai n，60℃浸蜡2h进行石蜡包埋；
③切片先用(A PE S)对载玻片行防脱片处理，切片厚31xm，置45℃水浴展片，60cc烤箱干燥2h，室温下备用；④脱蜡至水，二甲苯脱蜡、100％一80％梯度酒精至水，每步1—2m i n；⑤修复抗原；
⑥直接免疫荧光染，滴加硫氢酸荧光素(FI TC)标记抗体包括：
I gA、I gG、IgM、C3、C i q及纤维蛋白相关抗原(F PA)的多克隆抗体，上于切片上，湿盒内37℃孵育30r ai n，0．O l m ol／L磷酸盐缓冲渡(PB S)浸洗5r ai n×3次(用摇床洗)，用缓冲液和甘油l：1封片，进行荧光显微镜检查。
1．2石蜡切片最佳染条件
1．2．1脱蜡时间用石蜡切片进行免疫荧光染前必须尽可能将组织听石蜡脱掉，故分别将切片于二甲苯中10n'f i n X4脱蜡，然后进行染效果比较。
1．2．2抗原修复由于用10％中性甲醛缓冲液固定时组织中抗原成分已被封固，故需进行抗原修复。
用高压锅修复抗原，具体方法如下：高压锅修复法，见切片放置布耐高温切片架上，置于高压锅内，锅内放1000m l枸楷酸缓冲液，上气1．5m i n，离火。20m i n 后用冷水冷却，PB S浸洗10r ai n，3％双氧水l O m i n，PB S洗10rai n，滴加羊血清l O m i n。体被稀释成l：20、1：40、1：40、l：加、l：40、1：60进行染。
2结果
2．1两种切片染结果比较就免疫沉积物分类型沿毛细血管壁沉积或(和)于系膜区沉积面言两种切片染结果毫无差别，就免疫沉积物染强度而言，两种切片结果时略有差异，主要的染指标(如：I gA肾病的I gA染，膜性肾病性肾病的I s G染，狼疮肾炎的“满堂亮”等)仍完全一致。石蜡切片的朴体c3染强度较冰冻切片低。
2．2两种染的荧光淬灭时问比较观察I gA，结果显示石蜡切片染的荧光淬灭时间较冰冻切片显著延长。
3讨论
肾组织病理检查包括光学显微镜、免疫病理及电子显微镜检查，而免疫病理检查常由冰冻切片免疫荧光染来完成。冰冻切片免疫荧光检查具有敏感性、高特异性、操作简单、快速的优点，但由于运送
组织标本条件苛刻，稍不慎温度过高抗原遭破坏即会导致假阳性，石蜡切片免疫组化虽能避免上述缺点，将石蜡切片与冰冻切片的免疫荧光染进行了比较，发现两者免疫沉积物的分布类型完全一致，染强度两者虽略有差别，但并不影响疾病的诊断，两者的疾病诊断的符合率为100％，所以石蜡切片免疫荧光检查做为冰冻切片免疫荧光染的一个补充手段应予以推广。
1．2．3抗体稀释F I TC标记的抗I sA、I gG、I gM、C3、C i q、FP A抗【收稿日期】2008-6—18
实质内一般无水肿信号，增强扫描无异常对比增强。蛛网膜囊肿对周围结构有压迫，但信号与脑脊液相似，G d—D T PA增强后无异常强化。囊性血管母细胞瘤G d—D T PA增强后可见到有一强化壁结节突出于囊腔内，壁多不强化，而小脑星形细胞瘤则无明显壁结节，囊壁强化。
4结论
M R I能显示渐桥小脑角区肿瘤本身特征和临近结构的关系。在该区肿瘤的诊断与鉴别诊断中有较高的实用价值，术前定位、定性诊断率高，是桥小脑角区肿瘤诊断的首选法，充分熟悉“哑铃征”、“脑膜尾征”等，并结合临床表现进行全面分析，就能够极大地提高对C PA肿瘤鉴别诊断的准确率，但有些表现特殊的肿瘤还是难以定性，凶此要正确使用“典型征”。关于桥小脑角区少见肿瘤的鉴别诊断仍存在许多问题，努力学习、拓宽思维、提高对少见病的认识可减少误诊。
参考文献
[1]缪飞，展颖，沈天真，等，C PA肿瘤的M RI诊断和鏊剐诊断
[J]．中国医学影像学杂志，2002，10(2)：81—84
C P A各种肿瘤的M R I特征，比如“喇叭征”或“钝角征”、“D征”、【收稿日期】2008—7—3 --——180--——
