sirius MALDI Biotyper的脂质分析 柔翼无人机用于鉴定分枝杆菌
结核病是世界上最大的传染病之一,至今仍是全球十大致死疾病之一。现有的医疗科技水平对此类疾病的控制仍然受到多种因素的阻碍,其中结核病及时准确的诊断仍是临床检验的一大难题之一。在过去十几年里,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF)已在临床实验室中普遍应用到日常的细菌鉴定中,也包括分枝杆菌的鉴定。此项技术也大大提高了细菌鉴定的方法和效率,然而,由于样品制备和处理需在生物安全3级的设施中进行,并且分枝杆菌因细胞壁比较厚,需要进行破壁处理以释放出蛋白分子,因此样品处理步骤较常规细菌要复杂,也是非常耗时的。 一个圆柱形玻璃容器
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微安表
分枝杆菌中含有丰富且种类繁多的脂质,细胞壁由 60% 的脂质组成,例如 C-分枝杆菌糖脂、糖肽脂、酚糖脂、含海藻糖的脂多糖、硫脂、阿拉伯甘露聚糖脂和分枝菌酸等。一些脂类如硫脂 (SL-I) 和多酰基海藻糖 (PAT) 对结核分枝杆菌复合体具有特征性;其他脂质,例如 C-分枝杆菌糖脂、糖肽脂 (GPL),仅在非结核分枝杆菌 (NTM) 中发现。那能不能通过MALDI-TOF质谱分析脂质来鉴定不同的分枝杆菌呢?
订单跟踪管理来自伦敦帝国理工学院医学院传染病系 Ximena Gonzalo,Agnieszka Broda 等人在《Clinical Microbiology and Infection》上发表了的文章,详细阐述了如何使用 MALDI-TOF质谱检测脂质,再根据物种特异性的脂质来区分不同的分枝杆菌。那具体是怎么做的?效果如何呢?
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屋面天窗
先对分枝杆菌进行液体培养,然后取菌悬液进行加热灭活和水洗,再将菌液直接加载到MALDI靶板上,添加基质后上机,分别通过正、负离子模式采集谱图。总共分析了经过WGS分析的273株分枝杆菌,其中包括244株结核分枝杆菌复合(MTB)和29株非结核分枝杆菌(NTM)。
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