磷酸盐缓冲液配制方法

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磷酸盐缓冲液(PBS配制方法
0.01M PBS
煤气阀PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HP,Op4H 7.2)
PBS缓冲液(pH7.2〜7.4): NaCI 137mmol/L, KCI 2.7mmol/L Na2HPO4
4.3mmol/L,KH2PO4
1.4mmol/L
称7.9g NaC, 0.2g KC| 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO和) 1.8g K2HPO4 溶于800 ml蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4C冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O 溶于1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O 溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4的配制:
先配0.2MPB(pH=7.4, 100ml):取19ml0.2mol/L 的NaH2PO4 81ml0.2mol/L 的Na2HPO4即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4按相应比例适当稀释即可,如:
0.1M PB (PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4 :取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4 :取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCI的话,加入NaCI至0.9% (g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB (100ml)配方:
0.2M Na2HPO4( ml) pH0.2M NaH2PO4(ml)
5.793.5
6.5
5.8928
v50值5.99010
6.08
7.712.3
6.18515
6.281.518.5
6.37
7.522.5
6.473.526.5
6.568.531.5
6.662.53
7.5
6.756.543.5
6.85149
6.94555局域表面等离子体共振
7.03862
7.13367石墨烯地暖瓷砖
7.22872
7.32377
7.419ml81ml
7.51684
旋转木马音乐盒
7.61387
7.710.590.5
7.88.591.5
7.9793
8.05.394.7
0.01M磷酸盐缓冲液(PBS配制方法
称取8gNaC、0.2gKC、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4溶于800ml 蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/i n2(1034 x 1(高Pa下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4C冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml 青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PH7.67.47.27.0
H2O1000100010001000
NaCl8.58.58.58.5
Na2HPO4 2.22.22.22.2
红薯清洗机
NaH2PO4 0.10.20.30.4
根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最
好用试纸测一下过夜了的PBS如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液
称取NaCI 8g KCI 0.2g Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.2,g容于900ml
双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液
取300^Tween-20加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,
在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。
十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~
PH8.0的PBS配方详细
1. NaCl 137mmol/L, KCl
2.7mmol/L, Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4
1.4mmol/L
2. 向烧杯中加入约800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将pH 值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充  1 mM CaCI2和0.5 mMMgCI2。
0.05mol/L PBS磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution, PBS的配制:
甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g加蒸馏水至1000ml乙液:0.05mol/L KH2P04溶液:称取磷酸二氢钾,9.07g 6.803g加蒸馏水至1000m1。
将甲乙液分装在棕瓶内,于4C冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH 的缓冲液,见下表:
pH 甲液ml 乙液mI
5.292.597.5
5.595.095.0
5.9110.090.0
6.2420.080.0
6.4730.070.0
6.6440.060.0
6.8150.050.0
6.98
7.17
7.38
7.7360.0
70.0
80.0
90.040.0
30.0
20.0
10.0
8.0495.05.0
你要配制pH=6.8的PBS可用甲、乙液各50ml混合即可

本文发布于:2023-06-04 06:50:38,感谢您对本站的认可!

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