电麻机
酶联免疫吸附法
碳酸盐包被液
Na2CO3 1.59g
NaHCO3 2.93g
定容至 1L，调pH=9.6
0.1M PBS母液
KH2PO4 0.4g
Na2HPO4邬婧婧.12H2O 6g
NaCl 16g
疲劳驾驶预警系统
定容至 1L,调pH=7.4（稀释10拉纸笔
倍用） 0.01M PBST
0.01M PBS 1000mL
Tween-20 500μl
封闭液
0.01M PBST 50mL
BSA 2.5g
底物缓冲液
0.2M Na2HPO4 25.7mL (PH 5.2)
0.1M柠檬酸 24.3mL(PH 5.2)
OPD 20mg
30%H2O2 800μl
终止液 2M H2SO4
浓硫酸 5.4mL
水 44.6mL
二．操作步骤
1. 取健康叶片和系统感病叶片，称量，用碳酸盐缓冲液按1:20（W/V）进行研磨，于6000rpm,离心5min,取上清。加入酶标板，每孔200μl, 每种材料加3孔，置于4℃过夜（或37℃ 4h）； 2. 用0.01M PBST燃煤助燃剂洗板三次，每孔加200μl的封闭液，37℃保温2h； 插卡式摄像机3. 用0.01M PBST洗板三次，每孔加入100μl的按最适效价稀释的一抗，37℃保温2h；
4. 用0.01M PBST洗板三次，每孔加入100μl的按一定比例稀释的二抗，37℃保温2h；
5. 用0.01M PBST洗板三次，每孔加入100μl的底物缓冲液。37℃保温10-20min；
6. 加终止液，每孔加入50μl；
7. 用酶标仪测492nm下的吸光值。
